解剖学研究2023年第45卷第1期AnatRes,2023,Vol.45,No.1E3蛋白泛素连接酶WWP1调控TLR4介导的炎症性肠病炎性聚集中的作用徐舒佳，杨剑，李燕飞深圳市前海蛇口自贸区医院消化内科，广东深圳518000·论著·【摘要】目的探讨E3蛋白泛素连接酶WWP1调控TLR4介导的炎症性肠病炎性聚集中的作用及机制。方法构建髓系细胞中特异性敲除E3蛋白泛素连接酶WWP1基因的小鼠，检测WPP1基因是否被敲除，随后进行分组，分为WWP敲除组（WWP1+/+）和WWP未敲除组（WWP1-/-），两组小鼠再分别喂养菊聚糖硫酸钠（DSS）建立炎症性肠病模型（DSS组）和喂养生理盐水（无菌水组），每组小鼠共10只，喂养7d，每天检测小鼠结肠炎的临床症状，结束后处死小鼠，测量结肠长度，评估小鼠结肠炎损伤情况，Elisa检测小鼠结肠黏膜组织炎性因子IL⁃6、IL⁃10、TNF⁃α水平，采用RT⁃qPCR和Westernblot检测TLR4表达水平。同时使用基因沉默方法敲除RAW264.7细胞的WWP1基因，使用LPS刺激构建结肠炎症情况下的巨噬细胞环境，检测WWP1+组与WWP1-组细胞中IL⁃6、IL⁃10、TNF⁃α和TLR4、WWP1表达水平。结果WWP1+/+组和RAW264.7细胞沉默组中WWP1⁃mRNA表达均明显下调，提示成功敲除WWP1基因。DSS组WWP1-/-小鼠体质量减轻程度明显大于DSS组WWP1+/+小鼠，DSS组WWP1-/-小鼠的DAI值明显大于DSS组WWP1+/+小鼠，DSS组WWP1+/+小鼠结肠长度明显长于DSS组WWP1-/-小鼠；与WWP1-/-相比，WWP1+/+的小鼠组织病理损伤程度更轻，结肠炎的症状更轻，同时小鼠IL⁃6、TNF⁃α表达水平明显更低，IL⁃10表达水平明显更高，炎症损伤程度更轻，RT⁃qPCR和Westernblot检测结肠组织和细胞中TLR4的表达也显示，与WWP1-/-相比，WWP1+/+的小鼠TLR4表达水平明显更低，在细胞株中，WWP1+组TLR4表达水平明显更低（P<0.05）。结论E3蛋白泛素连接酶WWP1可以对炎症性肠病中炎性聚集起到保护作用，这种保护作用的发挥可能是通过TLR4通路实现的。【关键词】炎症性肠病；泛素化修饰；含WW结构域的E3泛素连接酶1（WWP1）；作用机制基金项目：深圳市南山区卫生科技计划项目（深南科［2021］NS046）DOI：10.20021/j.cnki.1671⁃0770.2023.01.09TheroleofE3proteinubiquitinligaseWWP1inregulationofTLR4⁃mediatedinflammatoryaggregationininflammatoryboweldiseaseXUShu⁃jia，YANGJian，LIYan⁃FeiDepartmentofGastroenterology，ShekouFreeTradeZoneHospitalofShenzhenQianhai，Shenzhen518000，China【Abstract】ObjectiveToinvestiga...
