UPLC-MS_MS测定桂皮中的氨基甲酸酯类农药残留_吴晓萍.pdf

食品工业 2023 年第44卷第 2 期 332 分析检测UPLC-MS/MS测定桂皮中的氨基甲酸酯类农药残留吴晓萍福建中检华日食品安全检测有限公司（福州 350028）摘要建立桂皮中8种氨基甲酸酯类农药的QuEChER-超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品经乙腈提取并由混合净化剂(PSA、MWCNTs和无水硫酸镁)净化,色谱柱分离,在多反应监测模式下进行测定。在0.0010.5 g/mL范围内,8种氨基甲酸酯类农药在桂皮中的峰面积与其质量浓度呈良好线性关系(R20.99)。在0.02,0.04和0.20 mg/kg添加水平下重复6次试验,8种氨基甲酸酯类农药回收率为71.0%110.7%,相对标准偏差(SRSD)为1.7%10.3%,定量限(SLOQ)为0.02 mg/kg。试验方法简捷、灵敏、稳定,可满足实际检测需求。关键词QuEChERS;高效液相色谱-串联质谱;桂皮;氨基甲酸酯Simultaneoue Determination of Carbamate Pesticide in Cinnamomum cassia by UPLC-MS/MSWU XiaopingFujian CCIC-Fairreach Food Safety Testing Co.,Ltd.(Fuzhou 350028)Abstract An analytical method for the determination of 8 carbamate pesticides in Cinnamomum cassia using ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS)matching a QuEChERS procedure was developed.The samples were extracted with acetonitrile and cleaned-up by primary secondary amine(PSA),multi-walled carbon nanotubes(MWCNTs)and MgSO4 as sorbent in Cinnamomum cassia.The analytes were separated by a column of C18 connected to an electrospray ionization source in positive mode(ESI+)and monitoring(MRM)mode.Eight pesticides showed good linearity in the range 0.001-0.5 g/mL with correlation coefficients higher than 0.99.The average recoveries ranged from 71.0%to 110.7%in Cinnamomum cassia at three levels(0.02,0.04 and 0.20 mg/kg)and the relative standard deviation(SRSD)was 1.7%-10.3%(n=6).The SLOQ was 0.02 mg/kg.The method was simple,sensitive and stable,meeting the requirements of practical detection.Keywords QuEChERS;ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS);Cinnamomum cassia;carbamate桂皮（或肉桂、官桂或香桂）常被用作中药、香料和调料。但近年来，随着食品安全要求的提高和农药的不合理使用，使得各个国家对这类产品制定严格的限量。农药残留问题影响我国桂皮的出口，故有必要建立一种能快速检测桂皮中农药残留的方法。关于桂皮中农药残留的检测方法主要有气相色谱量上高出食品钢。二样本间Cr、Cu、Mo、P、C均差异极显著（P0.01）。部分食品级不锈钢存在成分与钢号标准不符的现象，主要体现在S、P、Mn等元素的含量上超出牌号含量上线，Cr含量低于标准。建议国家相关部门出台食品级不锈钢主要合金元素含量标准，以确保消费者的使用安全。试验对30种合金元素不合格产品进行食品迁移量检测，所有检测样品的迁移量指标均符合国家相关标准，不存在食品安全风险。参考文献：1 季文华.不锈钢的分类与选择J.科技信息,2012(4):455.2 张爱雷.食品级不锈钢餐饮具辨别与安全使用J.科技与企业,2014(17):378.3 刘凤莲.商用厨具产品用不锈钢性能对比研究J.中国标准化,2022(21):221-224.4 苏忠亮,杨越飞,张晔,等.不诱钢餐具的质量与安全管控J.厦门科技,2021(2):60-62.5 单燕莉,朱燕,孙烨.20112014年永康市不锈钢保温杯卫生质量分析J.中国卫生检志,2015,25(20):3546-3547.6 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会.低合金钢多元素的测定 电感耦合等离子体发射光谱法:GB/T 201252006S.北京:中国标准出版社,2006.7 国家卫生和计划生育委员会.食品安全国家标准 食品接触材料及制品 砷、镉、铬、铅的测定和砷、镉、铬、镍、铅、锑、锌迁移:GB 31604.492016S.北京:中国标准出版社,2017.8 白鹤,王伯健.马氏体不锈钢成分、工艺和耐蚀性的进展J.特殊钢,2009,30(2):30-33.食品工业 2023 年第44卷第 2 期 333 分析检测（GC）1-3和气相色谱三重四极杆质谱联用（GC-MS/MS）4-5。GC或GC-MS/MS对于检测苯氨基甲酸酯类等沸点高且热稳定性差的化合物并不适用，而液质联用色谱对于这些化合物却有着高于GC或GC-MS/M的选择性和灵敏度6。桂皮一种相对基质较复杂中草药，为提高检测的准确性和避免对仪器造成污染，开发一种有效净化前处理很有必要。农药检测常用的提取方法有固相萃取（SPE）7、基质固相分散萃取（MSPD）8、加速溶剂萃取法（ASE）9、液-液萃取（LLE）10和凝胶色谱法（GPC）11。其中，部分方法（如MSPD）需要大量有机溶剂（LLE）、特殊设备（GPC和ASE）和劳动量，所以环保型的检测技术是目前主推的检测手段12，如QuEChERS技术，其操作简便，分析速度快，溶剂使用量少，污染小，近年来被广泛用于复杂基质农药的多残留测定，但在对复杂基质净化效果这方面还存在欠缺。因此，选择一款高选择性的净化剂成为关键突破口，据报道，多壁碳纳米管作为净化剂被应用于农产品中农兽药的检测13-15，其吸附性能不仅优于C18、GCB和PSA等常用吸附材料，而且拥有高选择性。故试验采用改良后的前处理方法结合液相色谱串联质谱技术，建立桂皮中氨基甲酸酯类的快速检测方法。1材料与方法1.1仪器与试剂UPLC-MS/MS（Agilent 1290-6470，安捷伦有限公司）；低速离心机（德国Sigma公司）；克百威、3-羟基克百威、灭多威、涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜、甲萘威和异丙威（德国Dr.Ehrenstorfer公司）；PSA粉末（美国Supelco公司）；多壁碳纳米管（上海麦克林生化科技有限公司）；多管涡旋混匀仪（逗点生物技术有限公司）；乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、甲酸和乙酸铵均为分析纯或色谱纯（国药科技）；试验用水为三重过滤去离子水。1.2标准溶液的制备 标准储备液：分别准确称取一定质量的8种氨基甲酸酯类农药标准品，用丙酮溶解、定容配制成不同浓度的标准储备液，于-20 的冰箱储存。混合标准溶液：分别吸取不同体积的标准储备液，用乙腈稀释配制成10 mg/L的混合标准溶液，同样置于-18 储存。1.3样品的前处理将样品粉碎，准确称取2.0 g（精确至0.01 g）于50 mL聚四氟乙烯离心管中，加入10 mL超纯水涡旋30 s后浸泡30 min，加入15 mL乙腈、5.0 g氯化钠混匀和漩涡振荡3 min，在4 000 r/min条件下离心5 min，离心后取2.00 mL上清液于5 mL离心管（50 mg PSA、150 mg无水硫酸镁和5.0 mg选择性多壁碳纳米管），漩涡振荡2 min，在15 000 r/min条件下高速离心5 min，取上层清液过0.22 m有机滤膜，待UPLC-MS/MS分析。1.4色谱条件 色谱条件：ACQUITY BEH C18色谱柱（2.1 mm 50 mm，1.7 m，美国Agilent公司）；流动相A为0.1%甲酸乙酸铵水，流动相B为乙腈；梯度洗脱程序：01.0 min，75%A；12.5 min，75%70%A；2.54 min，10%A；45 min，10%75%A，57 min，75%A；流速0.3 mL/min；柱温40；进样量3 L。质谱条件：ESI源，正离子模式，毛细管电压3.0 kV，离子源温度300，脱溶剂气温度350，锥孔反吹气流量50 L/h，脱溶剂气流量900 L/h，多反应监测模式（MRM）。表18种农药的保留时间、监测离子对、碰撞电压（CE）和去簇电压（DP）分析物保留时间/min母离子子离子去簇电压 碰撞能量3-羟基克百威1.318238162.8*/106.9609/29甲萘威0.798202144.8*/126.9409/28克百威3.863222165.2*/123.1879/21灭多威1.116163106*/88559/9涕灭威2.263213116.2*/89.1659/13涕灭威风0.994223.186.1*/76.1759/9涕灭威亚砜0.805207131.9*/88.9605/9异丙威4.492194.195*/7710010/40注:*为定量离子。2结果与分析 2.1检测条件的优化 氨基甲酸酯类化合物是含有较强的电负性元素，如氧原子和氮原子等，在ESI+模式下，氨基甲酸酯类化合物中的这些强电负性元素可以和喷雾液滴中的H+形成加合离子（M+H+），从而实现检测。一般进样瓶和溶剂存在微量的钠离子，这些钠离子会和目标物形成较强的加合离子（M+Na+），从而降低基于M+H+的检测灵敏度。但如果向流动相的水相中添加适量NH4+，便可有效抑制M+Na+的形成从而提高检测M+H+的灵敏度16。通过MS2Scan选择丰度最高的母离子，对去簇电压进行优化，通过产物离子扫描选择2个响应较大的子离子并对两者的碰撞能量进行优化。响应值大的1组设为定量离子对，响应强度相对较弱的1组设为定性离子对。为保证各农药成分拥有足够的灵敏度和较好的峰形，同时考察乙腈-水溶液（0.1%甲酸）、乙腈-含4 mmol/L乙酸铵的水溶液（0.1%甲酸）这2种流动相体系，得到如图1所示的总离子流图：选择乙腈-含4 mmol/L乙酸铵的水溶液（0.1%甲酸）为流动相时，仅有部分农药化合物（如涕灭威、灭多威）响应强度被抑制，大部分农药化合物响应度高，峰形较好，故选择加4 mmol/L乙酸铵的-0.1%甲酸水溶液作为流食品工业 2023 年第44卷第 2 期 334 分析检测动相。图18种化合物的总离子流图2.2前处理条件优化2.2.1样品加水量的考察从含水量低的样品中提取农药时，用溶剂直接浸提难以充分渗透到组织内部，加入适量的水进行复水处理有利于提高目标农药的回收率。试验比较目标农药分别加入5，10，15和20 mL水量后的回收率，结果表明，加水量5 mL时，6种农药回收率70%；加水量10 mL时，8种农药的回收率在70%110%；加水量10 mL时，回收率110%的农药数量明显增多，且20 mL加水量的高回收率农药数量较10 mL加水量的多。因此，2 g桂皮中加入10 mL水