HMGA1在膀胱癌细胞中的作用及其机制研究秦明明,余倩倩,朱亚,叶开,徐雪莹,张德轩,许岩,吴竞(皖南医学院第二附属医院检验科,安徽芜湖241001)摘要:目的探讨高迁移率族蛋白A1(HighMobilityGroupProteinA1,HMGA1)对人膀胱移行细胞癌细胞(T24)迁移和化疗耐药的作用及其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫蛋白印迹(Westernblot)的方法检测HMGA1在人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)和人膀胱癌T24细胞中的表达;用脂质体将构建好的HMGA1siRNA瞬时转染入T24细胞中,CCK-8法检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞增殖能力的变化;平板划痕和Transwell实验检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞迁移能力的变化;CCK-8法和流式细胞术检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞化疗敏感性和存活率的变化;Westernblot检测沉默HMGA1后下游相关基因的改变。结果RT-PCR实验表明,相比于SV-HUC-1细胞中HMGA1mRNA的表达水平(0.98±0.01),HMGA1mRNA在人膀胱癌T24细胞中的表达上调(3.55±0.13,P<0.001);T24细胞中HMGA1蛋白表达量明显高于SV-HUC-1细胞(P<0.05);相比于阴性对照组,沉默HMGA1后,膀胱癌细胞的增殖水平明显降低(P<0.001);且膀胱癌细胞的迁移能力也显著下调(P<0.01);另外,膀胱癌细胞的化疗敏感性和凋亡率也显著增加(P<0.01)。随着化疗药物浓度增加,PI3K和AKT表达不断降低;且在降低HMGA1表达水平后,PI3K和AKT表达水平也降低。结论HMGA1在膀胱癌细胞中表达上调,高水平HMGA1可能通过调控PI3K/AKT通路促进膀胱癌细胞的转移和化疗耐药,有望为临床膀胱癌的治疗提供新的分子靶点和理论依据。关键词:膀胱癌;T24细胞;HMGA1;转移;化疗耐药中图分类号:R737.14文献标识码:A文章编号:1001-7550(2023)01-0016-05基金项目:皖南医学院校重点项目(WK2022ZF28)作者简介:秦明明(1992-),男,硕士,初级检验技师,研究方向:肿瘤与分子生物学研究。通讯作者:吴竞,副主任技师,研究方向:临床检验和分子标志物。TheroleandmechanismofHMGA1inbladdercancercellsQINMing-mingetal(DepartmentofClinicalLaboratory,theSecondAffiliatedHospitalofWannanMedicalCollege,Wuhu241001,China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectandmolecularmechanismofhighmobilitygroupproteinA1(HMGA1)onthemigrationandchemotherapyresistanceofhumanbladdercancercells(T24).MethodsTheexpressionofHMGA1inhumanbladderepithelialimmortalizedcells(SV-HUC-1)a...