E-钙黏素和N-钙黏素在胃...间质瘤中的表达及其临床意义_张艳霞.pdf

第39卷第1期2023年2月山西大同大学学报（自然科学版）Journal of Shanxi Datong University(Natural Science Edition)Vol.39 No.1Feb.2023E-钙黏素和N-钙黏素在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义张艳霞1，闫燕艳1，邓亮1，董志敏2，朱壮彦1，李加善1，赵鑫2（1.山西大同大学医学院，山西 大同 037009；2.大同市第二人民医院病理科，山西 大同 037006）摘要：目的目的 探讨胃肠道间质瘤（GISTs）中E-钙黏素（E-cad）和N-钙黏素（N-cad）的表达及其临床意义。方法方法应用免疫组化SP法检测216例GISTs中E-cad和N-cad的表达情况，分析二者与胃肠道间质瘤临床病理参数的关系。结果结果 GISTs中E-cad阳性表达率为59.26%，N-cad阳性表达率为76.39%，E-cad和N-cad表达与 GISTs的发生年龄、性别、部位、组织学类型无关，而与GISTs的病理分级和是否远处转移有关（P0.05），且E-cad和N-cad的表达呈显著性负相关。结论结论 E-cad和N-cad联合检测可作为判定GISTs恶性程度及预后的参考指标。关键词：胃肠道间质瘤；E-钙黏素;N-钙黏素；免疫组织化学中图分类号：R361.2文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1674-0874.2023.01.016胃 肠 道 间 质 瘤（gastrointestinal stromal tumorsgastrointestinal stromal tumors，GISTs）以往常被诊断为平滑肌瘤或神经源性肿瘤，1983年Mazur1根据肿瘤的分化特征提出了胃肠道间质瘤的概念。胃肠道间质瘤起源于胃肠道的 Cajar细胞或其前体细胞2，与KIT或 PDGFRA基因突变相关3。胃肠道间质瘤在消化道各个部位均可发生，可见于胃、食管、小肠、结肠及直肠4，主要依据组织病理学检查和免疫组织化学检查结果确诊。胃肠道间质瘤没有绝对良性，其危险度与肿瘤的大小和部位以及核分裂象密切相关5。临床治疗以手术为主，当前腹腔镜和内镜的治疗更加广泛5，配合分子靶向药物预后更佳。但仍有文献报道，约50%的 GISTs 患者术后仍会出现复发或转移，预后极差6，因此研究影响 GISTs预后的有效生物学指标很有必要。E-钙黏素（E-cadherin，E-cad）和 N-钙黏素（N-cadherin，N-cad）在上皮性肿瘤中研究非常广泛，在间叶性肿瘤中研究甚少。本实验通过检测E-cad和N-cad 在不同分组的GISTs中的表达情况，分析二者表达与GISTs患者的性别、年龄、肿瘤原发部位、肿瘤组织学类型、肿瘤病理分级和肿瘤转移的关系，二者表达的相关性及其与肿瘤预后的关系。1 材料与方法1.1 临床资料收集大同市第二人民医院（大同市肿瘤医院）2010-2018 年收治的GISTs患者的存档石蜡标本216例，排除临床资料不全者，所有病例都经免疫组化确诊。其中男性116例，女性100例；患者年龄2179岁，中位年龄50岁。肿瘤发生部位:胃98例，肠73例，其他部位45例，其中84例发生了远处转移。组织学类型:上皮样细胞型例76，梭形细胞型89例，混合细胞型51例。依据NIH提出的GISTs危险度分级标准7进行病理分级，分为极低度侵袭组（VLR）37例，低度侵袭组（VLR）58例，中度侵袭组（IR）75例，高度侵袭组（HR）46例。1.2 免疫组化试剂来源及染色方法鼠抗人E-cad单克隆抗体、鼠抗人N-cad单克隆抗体均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。采用SP免疫组织化学法，按试剂盒说明书进行操作。用PBS代替一抗作阴性对照。1.3 染色结果判定E-cad阳性主要为细胞膜着色，少数近胞膜处的胞浆也可着色。N-cad 阳性主要为细胞浆染色，少数有细胞膜染色。每张切片随机观察5个高倍视野（400），阳性细胞10判定为阴性；阳性细胞10判定为阳性。1.4 统计学方法采用 SPSS 11.5 软件，组间采用 2检验比较。P0.05 时差异有统计学意义。收稿日期：2022-12-07基金项目：大同市科技局应用基础研究项目2019163；山西大同大学2017年度科研基金项目2017K9作者简介：张艳霞（1978-），女，山西大同人，硕士，讲师，研究方向：肿瘤分子病理。E-mail:文章编号：1674-0874（2023）01-0080-042023年2 结果2.1 E-cad和N-cad在GISTs组织中的表达及与临床病理参数的关系216 例 GISTs 中，128 例（59.26%）E-cad 阳性表达，主要为细胞膜或细胞浆染色。165例（76.39%）N-cad阳性表达，主要为细胞浆染色。通过 2检验，发现不同年龄、不同性别、不同部位、不同组织学类型之间 E-cad 的阳性表达率无显著性差异（P0.05），但不同病理分级之间和是否发生远处转移之间E-cad的阳性表达率有显著性差异（P0.05）（表1）。进一步比较显示，极低度侵袭组和低度侵袭组之间，低度侵袭组和中度侵袭组之间，中度侵袭组和高度侵袭组之间E-cad阳性表达率无显著性差异（P0.05），但极低度侵袭组和中度侵袭组之间、极低度侵袭组和高度侵袭组之间、低度侵袭组和高度侵袭组之间E-cad 阳性表达率有显著性差异（P0.05）（见表2）。通过 2检验，发现不同年龄、性别、部位、组织学类型之间 N-cad 的阳性表达率无显著性差异（P0.05），但不同病理分级之间和是否发生远处转移之间 N-cad 的阳性表达率有显著性差异（P0.05）（表 1）。进一步比较显示，极低度侵袭组和中度侵袭组之间、极低度侵袭组和高度侵袭组之间、低度侵袭组和中度侵袭组之间、中度侵袭组和高度侵袭组之间 N-cad 阳性表达率有显著性差异（P0.05），其余各组比较无统计学意义（P0.05）（表 2）。表1 E-cad、N-cad的表达与胃肠道间质瘤临床病理参数的关系表2 病理分级间两两比较对比组VLR与LRVLR与IRVLR与HRLR与IRLR与HRIR与HRE-cad2值1.0994.6249.8631.5976.0722.037P值0.2940.0320.0020.2060.0140.154N-cad2值0.9008.1568.2044.2324.6780.197P值0.3430.0040.0040.0400.0310.6572.2 E-cad和N-cad在GISTs组织中表达的相关性E-cad 和 N-cad 在 GISTs 组织中的表达经 Spear-man等级相关分析，r值为0.326，P值小于0.05，有统计学意义，可见二者在GISTs的阳性表达具有显著性负相关（P0.05）（见表3）。表3 E-cad与N-cad表达的关系E-cad阳性阴性合计N-cad阳性9075165阴性381351合计12888216注：Spearman相关分析r=-0.326，P0.05。临床病理指标性别年龄部位组织学类型病理分级远处转移男女50岁50岁胃肠其他梭形上皮样混合型极低度侵袭组（VLR）低度侵袭组（LR）中度侵袭组（IR）高度侵袭组（HR）有无n116100128889873458976513758754684132E-cad阳性数/例（）70(60.34%)58(58.00%)75(58.59%)53(60.23%)58(59.18%)44(60.27%)26(57.78%)54(60.67%)45(59.21%)29(56.86%)28(75.68%)38(65.52%)41(54.67%)19(41.30%)40(47.62%)88(66.67%)20.1220.3940.0720.19511.7137.714P值0.050.050.050.050.050.05N-cad阳性数/例（）85(73.28%)80(80.00%)97(75.78.%)68(77.27%)72(73.47.%)58(79.45%)35(77.78%)68(76.40.%)59(77.63%)38(74.51%)22(59.46%)40(68.97%)63(84.00%)40(86.96%)71(84.52%)94(71.21%)21.3460.0640.8910.16512.9095.043P值0.050.050.050.050.050.05张艳霞等：E-钙黏素和N-钙黏素在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义81山西大同大学学报(自然科学版)2023年3 讨论肿瘤的侵袭转移是一个多基因、多步骤的复杂过程，包括癌细胞的增殖，从原发病灶的脱离，进一步再溶解其细胞外基质，然后经细胞间的裂隙扩散，最终通过淋巴管、血管发生远处转移。这个过程往往伴随 E-cadherin 等上皮表型的表达下调，N-cadherin 等间质表型的表达上调，使细胞极性紊乱和细胞间连接丧失，细胞富于侵袭性而容易转移，此过程即 EMT8。E-cadherin 是细胞黏附分子家族中的重要成员，与人类许多肿瘤的发生发展及转移密切相关9-12，负责钙依赖的细胞黏附与细胞连接，与肿瘤的侵袭转移密切相关。E-cadherin 能使细胞间保持密切接触，难以脱离原发灶进入周围组织和脉管，因此被认为是肿瘤转移抑制基因13。有研究显示，E-cadherin和N-cadherin在肿瘤侵袭转移中的作用相反，E-cadherin 表达下降意味着同种细胞失去黏附效应，肿瘤细胞即具备了侵袭转移的特点，是肿瘤高度侵袭性和转移的一个重要的特征，N-cadherin表达增高和肿瘤侵袭性增高有关。结合本实验结果，E-cadherin 在 GISTs 转移组的阳性表达率明显低于非转移组（P0.05），而 N-cadherin在 GISTs 转移组的阳性表达率明显高于非转移组（P0.05），与Yang等14研究一致，说明二者的表达与肿瘤的侵袭转移密切相关。House15等研究发现，E-cadherin 基因在 GISTs中甲基化达到37%，是明显的肿瘤抑制基因，是肿瘤复发转移的独立危险因素。本项研究发现，E-cad-herin和N-cadherin表达与 GISTs的发生年龄、性别、部位、组织学类型无关，而与GISTs的病理分级有关（P0.05），且E-cad阳性表达率随着GISTs侵袭程度的增加而逐渐减少，表明E-cad表达越少，肿瘤越容易发生侵袭转移，导致预后越差，这与文献报道一致16-17。研究还发现E-cad 表达较高的极低度侵袭组和E-cad 表达很低的高度侵袭组比较，GISTs细胞的侵袭转移能力较弱，同样表明E-cadherin表达能增强细胞间黏附，降低细胞的侵袭转移能力，抑制GISTs的转移。本实验中N-cadherin 在GISTs中的阳性表达率为76.39%，在极低度侵袭组和高度侵袭组之间N-cad 阳性表达率有显著性差异（P0.05），并且随着GISTs侵袭程度的增加N-cadherin阳性表达增高，表明N-cadherin表达增高在肿瘤侵袭转移中发挥了重要作用，可能通过上皮间质转化，促进肿瘤发生转移。因此联合检测这两种钙黏蛋白可能是判断肿瘤是否发生EMT 的一个重要参考，同时也提示E-cad-herin 和 N-cadherin 可能参 与了 GISTs 的发生发展，有望成为GISTs的病理分级及预后判断的新参考指标。后续继续开展E-cadherin和N-cadherin对GISTs患者生存期影响的研究可以使本研究更趋完善，从而为 GISTs 的预后判断和临床治疗提供新的方向。参考文献1 MAZUR M T，CLARK H B.Gastric stromal tumors reappraisal of histogenesis J.Am J Surg Pathol，1983，7（6）:507-519.2 TERADA T.Smooth muscles and stem cells of embryonic gu