陈秋勇,陈渊泉,陈如敬,等.PEDV、TGEV双重TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立及病原学调查[J].福建农业学报,2022,37(11):1381−1387.CHENQY,CHENYQ,CHENRJ,etal.DuplexTaqManqPCRforDetectingPorcineEpidemicDiarrheaandTransmissibleGastroenteritisVirusesandEpidemicStudyinFujian[J].FujianJournalofAgriculturalSciences,2022,37(11):1381−1387.PEDV、TGEV双重TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立及病原学调查陈秋勇1,陈渊泉2,陈如敬1,车勇良1,吴学敏1,刘玉涛1,周伦江1*,王隆柏1*(1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;2.福建省仙游县畜牧兽医局,福建莆田351200)摘要:【目的】实现猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速鉴别诊断,并调查分析福建省2019–2021年PEDV和TGEV流行情况。【方法】根据PEDV的N基因和TGEV的S基因序列分别设计特异性引物和标记FAM、VIC荧光报告基团的探针,建立、优化双重荧光定量PCR反应条件和体系,并检测其敏感性、特异性和重复性。应用该方法对福建省2019–2021年收集的297份疑似腹泻病料进行病原检测。【结果】建立的方法对PEDV和TGEV的最低检测限均为10拷贝·μL−1,比普通PCR检测灵敏度提高100倍;对其他常见猪病原不发生非特异性反应;批内、批间变异系数均小于1%。福建省297份临床样本检测结果显示,单PEDV感染率为88.89%,单TGEV感染率为1.01%,PEDV和TGEV混合感染率为3.37%。【结论】本研究建立的方法具有敏感性高、特异性强、稳定性好等特点。福建省内2019–2021年以PEDV感染为主,TGEV感染率低,存在PEDV、TGEV混合感染的情况。关键词:猪流行性腹泻病毒;猪传染性胃肠炎病毒;双重荧光定量PCR;流行情况中图分类号:S858.28文献标志码:A文章编号:1008-0384(2022)11−1381−07DuplexTaqManqPCRforDetectingPorcineEpidemicDiarrheaandTransmissibleGastroenteritisVirusesandEpidemicStudyinFujianCHENQiuyong1,CHENYuanquan2,CHENRujing1,CHEYongliang1,WUXuemin1,LIUYutao1,ZHOULunjiang1*,WANGLongbai1*(1.InstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine,FujianAcademyofAgriculturalSciences/FujianAnimalDiseaseControlTechnologyDevelopmentCenter,Fuzhou,Fujian350013,China;2.BureauofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicineofXianyouCounty,Putian,Fujian351200,China)Abstract:【Objectiv...