94现代检验医学杂志第38卷第1期2023年1月JModLabMed,Vol.38,No.1,Jan.2023miR-124靶向调控CMTM6增强CIK对胶质瘤细胞杀伤效应机制研究秦君翔，黄锦峰，袁学刚，胡振坤，肖胜（鄂州市中心医院神经外科，湖北鄂州436000）摘要：目的研究细胞因子诱导杀伤（cytokineinducedkiller，CIK）细胞对胶质瘤细胞杀伤效应的影响以及微小核糖核酸（miRNA，miR）-124在此过程中的调节作用及可能机制。方法收集2017年3月～2019年10月鄂州市中心医院神经外科收治的30例脑胶质瘤患者的癌组织及癌旁组织标本，通过qRT-PCR法检测脑胶质瘤及癌旁组织中miR-124，含MARVEL跨膜结构域的趋化素样因子家族基因6(chemokine-likefactor-likeMARVELtransmembranedomain-containingfamilymember6，CMTM6)mRNA表达量及相关性。诱导培养CIK细胞后，分别与胶质瘤细胞C6和U87共培养，另转染miR-124mimic，inhibitor及阴性对照序列，通过CCK-8实验检测CIK细胞及转染对胶质瘤细胞的杀伤效应；双荧光素酶报告实验分析miR-124与CMTM6基因的靶向关系，qRT-PCR和Westernblot检测胶质瘤细胞中miR-124，CMTM6mRNA及蛋白表达。结果与癌旁组织比较，脑胶质瘤组织中miR-124表达(0.325±0.031vs1.004±0.086)显著降低，CMTM6mRNA表达(3.167±0.324vs0.981±0.089)显著升高，差异有统计学意义（t=39.051，26.337，均P＜0.001），二者呈负相关（r2=0.262）。与转染阴性对照比较，miR-124mimic转染及其与CIK细胞共培养对C6(72.84%±3.81%vs99.67%±3.45%，51.46%±3.18%vs74.59%±3.47%)，U87细胞(71.93%±3.94%vs98.26%±3.59%，52.67%±3.24%vs76.28%±3.64%)增殖均有显著抑制作用，差异有统计学意义（q=16.340，15.486,14.087,13.886，均P＜0.001）。双荧光素酶报告实验显示，miR-124和CMTM6具有明显的靶向关系。Westernblot结果显示，与转染阴性对照+CIK组比较miR-124mimic与CIK细胞共培养的C6，U87细胞CMTM6蛋白表达(0.435±0.042vs0.897±0.061，0.354±0.029vs0.725±0.068)显著降低，转染miR-124inhibitor与CIK细胞共培养的C6，U87细胞CMTM6蛋白表达(1.142±0.121vs0.897±0.061，1.326±0.125vs0.725±0.068)显著增加，差异均有统计学意义（q=13.817，10.839,7.327，17.558，均P＜0.001）。结论CIK细胞可有效杀伤胶质瘤细胞，miR-124可通过靶向抑制CMTM6增强CIK细胞对胶质瘤细胞的杀伤效应。关键词：胶质瘤；微小核糖核酸-124；含MARVEL跨膜结构域的趋化素样因子家族基因6；细胞因子诱导杀...
