法医学杂志2022年10月第38卷第5期17年陈案被害人衣物检出DNA基因型1例高金林,乔伟,徐庆泰州市公安局刑事警察支队,江苏泰州225300关键词:法医遗传学;接触性DNA;磁珠法;短串联重复中图分类号:DF795.2文献标志码:Bdoi:10.12116/j.issn.1004-5619.2020.500904文章编号:1004-5619(2022)05-0687-031案例1.1简要案情张某,女,某年3月12日下午失踪,当年4月4日,当地一村民在自家放置杂物的猪圈中发现死者尸体。死者衣着整齐,面朝墙躺于猪圈内侧。由于当时侦破条件有限,本案一直未能获得有效的破案线索,也未获得嫌疑人的DNA分型。17年后,应公安部“云剑2020”行动的要求,对张某被杀案现场检材进行再次检验。1.2检验方法1.2.1检材前处理送检检材为1件尼龙外套、1条帆布牛仔裤、1个黑色皮质双肩包。鉴于检材情况和案件检验要求,将3个检材都分成若干区域,检材的粗糙面用粘取器粘取、光滑面用棉签擦拭的方式采集样本。外套上提取73份检材、牛仔裤上提取79份检材、双肩包上提取106份检材,合计258份。1.2.2检材DNA提取上述样本均使用微量检材DNA提取试剂盒(烟台澳斯邦生物工程有限公司)提取,过夜孵育后,在LET-8-PUREDNA提取工作站(烟台澳斯邦生物工程有限公司)上进行DNA提取纯化。具体步骤如下:(1)裂解。将检材放入套管,套管放入2.0mL微量离心管中,加入500μL裂解液、15μL蛋白酶K,混合均匀;56℃振荡保温处理混合液,8h以上过夜孵育。之后套管放入PicoTM17微量离心机(美国ThermoFisherScientific公司),10000×g离心3min;去掉载体和套管,此时消化液全部在2.0mL微量离心管内。(2)将离心管和相应提取、洗涤、洗脱试剂按照LET-8-PUREDNA提取工作站要求放置到工作站指定位置,运行工作站。(3)工作站将纳米磁珠、结合液、消化液进行充分混合,按照结合、洗涤、洗脱的步骤自动提取,最终得到提取液。提取液作为模板,进行STR扩增。1.2.3STR分型使用VeriFilerTMPlusSTR扩增试剂盒(美国ThermoFisherScientific公司)对258份检材中的23个常染色体STR和2个性别标记Amelogenin和Y-InDel进行检测。根据常染色体STR检验结果,在样本质量较高的男性DNA样本中使用6色荧光检测体系YfilerTMPlusPCR扩增试剂盒(美国ThermoFisherScientific公司)进行Y-STR检测,扩增体系为10μL,均按照试剂盒说明书推荐流程操作。扩增反应在9700型PCR仪(美国AppliedBiosystems公司)上进行,扩增产物在3500型基因分析仪(美国AppliedBiosystems公司...