福建畜牧兽医第45卷第1期2023年不同pH值消化液对ST细胞分散作用的影响范珞菲兆丰华生物科技（福州）有限公司福州350014摘要本试验采用不同pH值胰蛋白酶消化液分别消化转瓶ST细胞，并观察记录ST细胞消化时间、分散效果、瓶壁残留情况、细胞计数、细胞粒径以及细胞再次贴壁生长状态，获得转瓶培养ST细胞的胰蛋白酶消化液最佳pH值，为ST细胞在转瓶传代培养过程中出现的细胞不脱壁、团块大的问题提供数据支持。关键词胰蛋白酶消化液pH值ST细胞细胞培养文献标识码：A文章编号：1003-4331（2023）01-0009-03EffectofdifferentpHdigestionatesondispersionofSTcellsFanLuofei（JofunhwaBiotechnology(Fuzhou)Co.Ltd,Fuzhou350014）AbstractInthisexperiment,thetrypsindigestionsolutionwithdifferentpHvalueswasusedtodigestSTcellsintherotatingbottles,andthedigestiontime,dispersioneffect,residualconditionofthebottlewallandthestateofcelladherentgrowthwereobservedandrecorded,soastoobtaintheoptimalpHvalueoftrypsindigestionsolutionforSTcellsdigestion.ToprovidedatasupportforsolvingtheproblemthatSTcellsdonotexfoliatefromthewallandarepronetoformlargeclumpsintheprocessoftransflaskculture.KeywordsTrypsindigestionsolutionpHSTcellsCellculture猪睾丸细胞（Swinetes，ST）是由猪睾丸分离得到的一种成纤维样细胞，可连续体外传代培养，细胞呈贴壁生长[1]。该细胞属于病毒敏感型细胞系，能感染多种病毒，如猪传染性胃肠炎病毒（Transmissiblegastroenteritisvirus，TGEV）[2]、猪瘟病毒（Classicalswinefevervirus，CSFV）[3]、猪细小病毒（Porcinepar-vovirus，PPV）[4]、伪狂犬病病毒（Pseudorabiesvirus，PRV）等[5]。在疫苗制备中，用于繁殖病毒的细胞是关键原辅材料之一。细胞培养质量好坏，直接影响到病毒类疫苗质量。ST细胞作为贴壁型细胞，可在方瓶、转瓶上进行传代培养。在传代过程中胰蛋白酶作为消化液具有很好的分离细胞的作用。转瓶培养过程中，存在ST细胞对所使用的消化液不敏感、出现细胞不易脱壁现象，而同代次方瓶培养的细胞没有发现该现象。因此，为解决转瓶细胞不易脱壁问题，本文采用同一浓度、同一温度、不同pH值消化液对ST细胞进行消化，通过消化时间、分散效果、瓶壁残留情况、细胞计数、细胞粒径以及细胞再次贴壁生长状态，获得消化ST细胞的胰蛋白酶消化液最佳pH值，为后期研究ST细胞提供数据参考。1材料1...
