SD大鼠灌胃妙茯止痛颗粒单次给药毒性试验_薛蕊.pdf

实验研究基金项目:国家重点研发计划(2017YFC1704005)。作者简介:薛蕊(1994)，女，汉族，硕士研究生在读，研究方向为民族医药单验方收集整理与评价研究。E mail:826776733 通信作者:许嘉鹏(1974)，男，彝族，本科，主任医师，研究方向为中医、彝医药。E mail:xjp2324 SD 大鼠灌胃妙茯止痛颗粒单次给药毒性试验薛蕊1杨国卉2李万芳3杨春燕3鲁碧楠4周文斌4许嘉鹏2*1 云南中医药大学，云南昆明650500;2 云南省彝医医院/云南省彝族医药研究所，云南楚雄675000;3 中国医学科学院/北京协和医学院新药安全评价研究中心，北京100050;4 民族医药教育部重点实验室(中央民族大学)/中央民族大学药学院，北京100081【摘要】目的:通过对大鼠灌胃妙茯止痛颗粒后进行观测，阐明该药的急性毒性作用，为临床毒副反应监测提供依据。方法:本试验采用最大给药量法，灌胃给药。试验共给药 2 次，间隔 4 h，每次给药剂量为 20 g/kg，给药体积为 40mL/kg;另设溶媒对照组，每组 20 只，雌雄各半。观察给药后动物出现的中毒症状及中毒症状出现的时间、表现程度、发展过程。给药后连续观察 2 周，观察期结束剖检动物，观察主要脏器改变。结果:动物一般状况观察:给药当天，第一次给药后给药组所有动物均未见明显异常;第二次给药后给药组部分动物可见活动减少、竖毛，且4 h 内未恢复。给药后第1天雌鼠 No.23 出现肛周污秽，雄鼠 No.31 35 出现肛周污秽。给药后第 2 天雌鼠 No.23 出现肛周污秽，雄鼠 No.34 出现肛周污秽。给药后第 3 14 天，所有动物外观、行为活动情况、呼吸状态、分泌物、排泄物等均未见异常。动物体重:试验期间，给药组雌雄鼠各阶段体重与溶媒对照组相比均无显著性差异。动物大体解剖:14 d 观察期结束后对全部动物实施安乐死并进行解剖观察，所有动物心、肝、肾、脾、肺、胃肠等脏器均未见明显异常。结论:在本次试验条件下，SD 大鼠24 h 内 2 次灌胃给予妙茯止痛颗粒的最大耐受剂量(MTD)大于 40 g/kg。【关键词】妙茯止痛颗粒;单次给药毒性;大鼠【中图分类号】285.5【文献标志码】A【文章编号】1007 8517(2023)01 0020 04Single Dose Toxicity Test of Miaofu Zhitong Granules by Gavage in SD atsXUE ui1YANG Guohui2LI Wanfang3YANG Chunyan3LU Binan4ZHOU Wenbin4XU Jiapeng2*1 Yunnan University of traditional Chinese medicine，Kunming 650500，China;2 Yunnan Yi medical hospital and Yunnan Yi Medical esearch Institute，Chuxiong 675000，China;3 Chinese Academy of Medical Sciences/new drug safety evaluation and research center of BeijingXiehe Medical College，Beijing 100050，China;4 Key Laboratory of ethnic medicine，Ministry of Education(Central University for Nationalities)，School of pharmacy，Central University for nationalities，Beijing 100081，ChinaAbstract:Objective The acute toxic effects of Miaofu Zhitong granules were elucidated through observation of the granules afterintragastric administration in rats，so as to provide basis for clinical monitoring of toxic and side effects Methods The maximum dosemethod was used in this study Intragastric administration was conducted for 2 times with an interval of 4 hours，with a dose of 20 g/kgand a volume of 40 mL/kg Another solvent control group was set There were 20 males and females in each group To observe thepoisoning symptoms and the time，manifestation and development of poisoning symptoms in animals after administration After adminis-tration，the animals were observed for 2 weeks After the observation period，the animals were dissected and the changes of main or-gans were observed esults Observation of general conditions of animals:on the day of administration，no obvious abnormality wasobserved in all animals of the administration group after the first administration;After the second administration，some animals in theadministration group showed decreased activity and hair standing，and did not recover within 4 hours On the first day after administra-tion，female rat numbered 23 developed perianal filth，Male rats numbered 31 to 35 presented with perianal filth;On the second dayafter administration，female rat numbered 23 developed perianal filth，Male rat numbered 34 presented with perianal filth;From thethird day to the fourteenth day after administration，there was no abnormality in the appearance，behavior，activity，respiratory state，secretion and excreta of all animals Animal weight:during the test，there was no significant difference in the body weight of male andfemale rats in the administration group compared with the vehicle control group Gross observation of spleen，liver and other organs was02中国民族民间医药2023 年1 月第32 卷第1 期Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2023，Vol.32，No.1not found in all animals 14 days after euthanasia Conclusion:under the conditions of this test，the maximum tolerated dose(MTD)ofMiaofu Zhitong granules given to SD rats by gavage twice within 24 hours is greater than 40 g/kgKey words:Miaofu Zhitong Granules;Single Dose Toxicity;ats随着人们生活水平的进步，饮食结构的改变，痛风性关节炎的患病率也在不断增长，并呈年轻化趋势发展。西医治疗此病的主要方法为急性期消炎镇痛，间歇期降尿酸，但常伴随消化道、肝肾损伤等不良反应，严重影响患者的治疗信心。与之相比，传统医药不仅能明显改善痛风性关节炎患者的症状，又具有毒副作用低、可减少复发、价格实惠等优点。中药的毒性有广义与狭义的区分。广义的“毒”为药物的偏性和治疗作用，狭义的“毒”为与治疗无关的作用1。素问有言:“毒药治其内，针石治其外。”诸病源候论记载:“凡药云有毒及大毒者，皆能变乱，于人为害，亦能杀人。”因此对中药的毒性进行深入探究，也是为临床安全用药提供有力保障。在临床应用中，通过中药的配伍和(或)炮制的方法，来降低(消除)药物的毒性作用，增强药效，提升治疗作用，从而保证患者的安全。妙茯止痛颗粒是云南省楚雄州中医医院名老彝医张之道和余惠祥专家的临床经验方，并以协定处方的形式在院内使用，疗效肯定。该方由土茯苓(洪赊牛)、红萆薢(土涩)各 30 g，醋莪术、炒苍术、百合、车前子(自然熬)、大追风(乃替力)各 20 g，叶下花(帕陶唯)、威灵仙、黄柏各 15 g 组成，具有清热除湿，化瘀散结等功效，对于痛风性关节炎急性发作期湿热闭阻证有良好的治疗效果2。制成颗粒剂也更方便患者直接冲服，具有易于储存、方便携带、干净卫生等优点3。为进一步探究该组方的安全性，以 中药、天然药物急性毒性研究指导原则4 药理实验方法学5 等为根据，本试验对大鼠采取单次最大给药量，观察用药后大鼠的毒性反应，为临床安全用药提供依据。1材料1.1实验动物及环境SD 大鼠 40 只，SPF 级，雌雄各半，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，实验动物生产许可证号:SCXK(京)201 0006，动物质量合格证号:110011201100703。实验动物设施持续保持屏障环境标准，主要环境指标的控制范围:室温20 26，相对湿度 40%70%。最小换气次数15 次/h，光照明暗=12 h12 h。动物饲养于聚丙烯大鼠群养盒中:笼具视格为:545 mm 395 mm 200 mm，每盒 5 只，其饲养空间符合中华人民共和国国家标准 GB14925 2010 中关于实验动物所需最小空间的规定，自由饮食和进水。新领到的动物检疫期 6 d，动物反应灵敏、摄食和健康状况良好且无异常分泌物，大鼠皮毛光滑、确认健康无病，可以用于试验。1.2药品妙茯止痛颗粒(批号:19110561，云南省彝医医院)，性状:棕色颗粒。15 25 遮光干燥保存。1.3仪器赛多利斯电子天平。2方法2.1剂量设计及动物分组大鼠单次给药临床拟用剂量:642.86 mg/kg;给药途径:口服;临床拟用疗程:5 d;临床主要适应症:痛风性关节急性期湿热痹阻证。剂量与分组:本试验采用最大给药量法，每天给药 2 次，1 次给药剂量 20 g/kg。给