·172·ChinJModApplPharm,2023January,Vol.40No.2中国现代应用药学2023年1月第40卷第2期WBSCR22基因调控人恶性肿瘤细胞铁死亡的研究屠凌岚，颜冬梅*(杭州医学院检验医学院、生物工程学院，杭州310013)摘要：目的研究WBSCR22是否参与调控细胞铁死亡。方法设计合成靶向人WBSCR22基因的siRNA(siWBSCR22)，瞬时转染敲低WBSCR22mRNA；RT-qPCR、Westernblotting分别检测WBSCR22mRNA、蛋白表达水平；铁死亡诱导剂Erastin、RSL3单独或联合抗氧化剂NAC、坏死抑制剂NSA、凋亡抑制剂ZVAD-FMK、自噬抑制剂3-MA作用于人结直肠癌细胞系HCT116和RKO、人肺癌细胞系H460、人肝癌细胞系SMMC7721，CCK8法检测细胞死亡率；丙二醛法、菲罗嗪法分别检测细胞脂质过氧化水平、Fe2+浓度。结果siWBSCR22瞬时转染显著降低WBSCR22mRNA及蛋白水平；WBSCR22敲低显著促进Erastin、RSL3诱导的HCT116、RKO、H460、SMMC7721细胞铁死亡；加入NAC后显著降低Erastin、RSL3诱导的WBSCR22敲低细胞铁死亡，而加入NSA、ZVAD-FMK、3-MA对Erastin、RSL3诱导的WBSCR22敲低细胞铁死亡无影响；Erastin、RSL3诱导后细胞内的Fe2+浓度无明显变化，脂质过氧化水平显著增加。结论WBSCR22基因参与调控肿瘤细胞铁死亡。关键词：WBSCR22；铁死亡；肿瘤细胞；脂质过氧化；Fe2+中图分类号：R966文献标志码：A文章编号：1007-7693(2023)02-0172-07DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2023.02.004引用本文：屠凌岚,颜冬梅.WBSCR22基因调控人恶性肿瘤细胞铁死亡的研究[J].中国现代应用药学,2023,40(2):172-178.StudyontheRegulationofFerroptosisinCancerCellsbyWBSCR22GeneTULinglan,YANDongmei*(SchoolofLaboratoryMedicineandBioengineering,HangzhouMedicalCollege,Hangzhou310013,China)ABSTRACT:OBJECTIVEToinvestigatewhetherWBSCR22wasinvolvedinferroptosis.METHODSThesiRNAtargetinghumanWBSCR22gene(siWBSCR22)wasdesignedandsynthesized,whichwastransienttransfectedtoknockdownWBSCR22mRNA.ThelevelofWBSCR22mRNAandproteinweremeasuredbyRT-qPCR,Westernblotting,respectively.ThehumancolorectalcancercelllinesHCT116,RKO,lungcancercelllinesH460,andhepatomacelllineSMMC7721weretreatedwiththeferroptosisinducerErastin,RSL3aloneorincombinationwithantioxidantNAC,necrosisinhibitorNSA,apoptosisinhibitorZVAD-FMK,autophagyinhibitor3-MA,andcelldeathratewasmeasuredbyCCK8.Inadditi...
