miR-181C-5P在胶...织中表达及其与预后关系研究_王铁峰.pdf

20创伤与急危重病医学 2023 年 1 月 第 11 卷 第 1 期Trauma and Critical Care Medicine Jan.2023 Vol.11，No.1 论 著 miR-181C-5P 在胶质母细胞瘤组织中 表达及其与预后关系研究王铁峰，陈茗炜，崔海随，王 刚，苏春芳，彭 浩海南省第二人民医院神经外科，海南五指山572299摘要 目的 探讨 miR-181C-5P 在胶质母细胞瘤（GBM）组织中的表达及其与预后的关系。方法 选取自 2015 年 1 月至2017 年 6 月收治的 142 例 GBM 患者为研究对象，另选取同期颅脑损伤内减压术中切除的正常脑组织 50 例为参考，检测组织中miR-181C-5P表达水平，以中位数为截断值，将患者分为高表达组与低表达组。用COX多因素分析患者预后的影响因素；生存曲线分析 miR-181C-5P 与生存预后的关系。结果 GBM 组织中 miR-181C-5P 相对表达量明显高于正常脑组织，差异有统计学意义（P0.05）。年龄 50 岁、病灶部分切除、术后未放疗、术后未化疗、miR-181C-5P 高表达是 GBM 生存预后的独立影响因素（P0.05）。miR-181C-5P 高表达组总生存率低于低表达组，差异有统计学意义（P0.05）。结论 GBM 瘤组织中 miR-181C-5P 表达水平升高，miR-181C-5P 高表达与不良生存预后有关。关键词 胶质母细胞瘤；预后；微小 RNA；危险因素中图分类号：R739.41 DOI：10.16048j.issn.2095-5561.2023.01.04 文章编号：2095-5561（2023）01-0020-04Expression of miR-181C-5P in glioblastoma tissues and its relationship with prognosisWANG Tie-feng，CHEN Ming-wei，CUI Hai-sui，WANG Gang，SU Chun-fang，PENG Hao（Department of Neurosurgery，Hainan Second People s Hospital，Wuzhishan 572299，China）Abstract：Objective To investigate the expression of miR-181C-5P in glioblastoma（GBM）and its relationship with prognosis.Methods A total of 142 patients with GBM admitted from January 2015 to June 2017 were selected as research objects，and 50 cases of normal brain tissue excised during internal decompression of craniocerebral injury during the same period were selected as reference.The expression level of miR-181C-5P in tissues was detected，and patients were divided into high expression group and low expression group with median as cut-off value.The influencing factors of prognosis were analyzed by COX multivariate analysis.The relationship between miR-181C-5P and survival prognosis was analyzed by survival curve.Results The relative expression level of miR-181C-5P in GBM tissues was significantly higher than that in normal brain tissues，and the difference was statistically significant（P0.05）.Age 50 years old，partial tumor resection，no postoperative radiotherapy，no postoperative chemotherapy，high expression of miR-181C-5P was an independent factor affecting the survival and prognosis of GBM（P0.05）.The overall survival rate of the high expression group of miR-181C-5P was lower than that of the low expression group（P0.05），具有可比性。本研究通过医院伦理委员会批准，患者家属均签署知情同意书。1 2 纳入与排除标准 纳入标准：（1）术前未接受放疗、化疗或免疫治疗等；（2）术后组织病理学检查证实为 GBM；（3）未合并其他部位肿瘤。排除标准：（1）合并感染；（2）代谢性疾病或免疫系统疾病；（3）近 3 个月内服用免疫制剂；（4）合并心肝肾等脏器功能不全。1 3 研究方法 检测组织中 miR-181C-5P 表达水平。采用总 RNA 提取试剂盒（上海尚宝生物科技有限公司）提取组织中总 RNA，而后采用逆转录试剂盒（上海尚宝生物科技有限公司）合成 cDNA。聚 合 酶 链 式 反 应（polymerase chain reaction，PCR）试剂盒购自上海尚宝生物科技有 限 公 司，扩 增 引 物：miR-181C-5P 上 游 引 物5-UAAAGUGCUUAUAGUGCAGGUAG-3，下 游 引 物 5-CUACCUGCACUAUAAGCACUUUA-3；内参 GAPDH上游引物 5-TCAAGGCTGAGAACGGGAAG-3，下游 引 物 5-TGGACTCCACGACGTACTCA-3。PCR反应条件为：预变性 15 min（95），变性 15 s（95），退火 30 s（95），延伸 30 s（70），共 40 个循环。用 2-CT法计算 miR-181C-5P 相对表达水平，以中位数为截断值，将患者分为高表达组与低表达组。术后以门诊和电话方式对所有 GBM 患者进行随访，随访截止 2022 年 6 月。记录总生存期，用于绘制生存曲线。1 4 统计学方法 采用 SPSS 20.0 软件对数据进行统计学分析。计量资料以均数 标准差（xs）表示，组间比较用 t 检验；计数资料以例（百分率）表示，比较采用 2检验。GBM 患者生存预后的影响因素用 COX 回归分析；绘制生存曲线分析 miR-181C-5P与 GBM 患者生存预后的关系。以 P0.05 为差异有统计学意义。2 结果2 1 GBM 组织和正常脑组织中 miR-181C-5P 表达水平 GBM 组织中 miR-181C-5P 相对表达量为（3.070.89），明显高于正常脑组织的（1.160.54），差异有统计学意义（P0.05）。2 2 GBM 患者生存预后影响因素分析 单因素分析结果显示，年龄、切除范围、术后放疗、术后化疗、miR-181C-5P 表达水平是 GBM 生存预后的影响因素（P0.05）。以上述因素作为自变量，以是否生存作为因变量，进行 COX 多因素分析，结果显示，年龄 50 岁、病灶部分切除、术后未放疗、术后未化疗、miR-181C-5P 高表达是 GBM 生存预后的独立影响因素（P0.05）。见表 1。表 1 GBM 患者生存预后的单因素及 COX 多因素分析因素单因素COX 多因素OR 值95%可信区间P 值OR 值95%可信区间P 值年龄 50 岁1.6001.1234.89301.3141.2103.8970.010性别0.9080.6731.0030.201癫痫1.0270.8941.5620.281肿瘤 5 cm1.2010.8311.3760.190肿瘤部位（额叶）0.9930.9351.1380.300病理类型（多形胶质母细胞瘤）1.3410.9522.0460.095囊变1.1050.7341.8420.141切除范围3.7851.1835.55501.6611.1833.9050.031术后放疗1.8951.1746.51101.5471.2033.8750.027术后化疗2.2191.5296.93201.4521.1103.2040.011miR-181C-5P 表达情况3.0011.2416.21002.1031.4214.1040.00122创伤与急危重病医学 2023 年 1 月 第 11 卷 第 1 期Trauma and Critical Care Medicine Jan.2023 Vol.11，No.12 3 不同 miR-181C-5P 表达水平 GBM 患者预后情况 miR-181C-5P 高表达组总生存率低于低表达组，差异有统计学意义（P0.05）。见图 1。图1 miR-181C-5P不同表达水平患者生存曲线3 讨论GBM 的恶性程度较高，具有浸润性增长和高侵袭性等特征，手术后复发风险高，患者生存预后较差1，10。探讨 GBM 的发病机制对提高患者生存预后有重要意义。miRNA 是长度约为 22 个核苷酸的单链 RNA，在生命体中参与转录后基因调控11。现已发现，miRNA 可通过影响细胞增殖、侵袭、凋亡、分化、细胞周期等过程，参与 GBM 的发生发展，并影响患者生存预后12-14。本研究发现，GBM 组织中 miR-181C-5P 表达水平升高，miR-181C-5P 高表达与不良生存预后有关。miR-181C-5P 是新发现的一种 miRNA，已被发现与多种肿瘤性疾病的发生发展密切相关，例如宫颈鳞癌、喉癌、肺癌、口腔鳞癌等15-18。笔者既往研究表明，miR-181C-5P 在 GBM 组织和 U87 细胞系中表达水平升高9。本研究发现，miR-181C-5P 在GBM 组织中高表达，提示 miR-181C-5P 可能参与GBM 发生发展。然而 miR-181C-5P 在 GBM 中的作用机制目前尚未明确。研究表明，miR-181C-5P 可能通过靶向抑制 NDRG2，促进 U87 细胞增殖、迁移和侵袭，并抑制凋亡。也有研究发现，miR-181C-5P可能会通过影响细胞周期，参与肿瘤进展19。miR-181C-5P 通过影响细胞增殖、侵袭而参与疾病进展，进而影响预后7。本研究 COX 多因素分析结果显示，年龄50岁、病灶部分切除、术后未放疗、术后未化疗、miR-181C-5P 高表达是 GBM 生存预后的独立影响因素。生存分析结果显示，miR-181C-5P 高表达组总生存率低于低表达组，以上结果提示，miR-181C-5P 与 GBM 预后密切相关。综上所述，GBM 组织中 miR-181C-5P 表达水平升高，miR-181C-5P 高表达与不良生存预后有关。miR-181C-5P 可能成为 GBM 生物标志物，对临床诊治有一定意义。本研究也存在一些局限性，例如未检测 GBM 患者外周血 miR-181C-5P 表达水平；未检测其他类型胶质瘤患者 miR-181C-5P 表达。未来需要进一步开展临床及基础研究，深入探讨 miR-181C-5P的早期诊断价值及生物学机制。参考文献：1 McKinnon C，Nandhabalan M，Murray SA，et al.Glio