分子植物育种，2023年，第21卷，第3期，第819-825页MolecularPlantBreeding,2023,Vol.21,No.3,819-825研究报告ResearchReport斑地锦肉桂酸4-羟基化酶基因及启动子的克隆与分析郭三保1,2黄胜和1*邹嘉轩3刘欢胜3全文军3杨晖11江西中医药高等专科学校医学基础部,抚州,344000;2江西中医药高等专科学校药学系,抚州,344000;3南昌大学抚州医学院,抚州,344000*通信作者,hsh712@163.com摘要槲皮素属于黄酮类化合物，是斑地锦主要药效成分之一，在槲皮素生物合成过程中，肉桂酸4-羟基化酶(C4H)是一个关键酶。为了阐明斑地锦中槲皮素生物合成机制，应用同源克隆结合RACE技术、Tail-PCR，获得C4H基因编码区及其启动子序列，RT-qPCR技术检测基因在不同生长期不同组织中的表达模式，并对启动子进行生物信息学分析。结果显示，斑地锦C4H基因编码区为1518bp，编码505个氨基酸，与麻疯树C4H氨基酸序列的相似性高达93.1%。RT-qPCR实验表明，斑地锦中C4H基因在苗期根中表达水平最高。克隆到的C4H基因启动子长约为1440bp，内含TAAT-box、CAAT-box等序列。此结果丰富了C4H基因资源，也为进一步研究斑地锦C4H基因功能及表达调控提供基础。关键词斑地锦;C4H基因;启动子;克隆;RT-qPCRCloningandAnalysisofCinnamateAcid4-hydroxylaseGeneandItsPromoterfromEuphorbiamaculataL.GuoSanbao1,2HuangShenghe1*ZouJiaxuan3LiuHuansheng3QuanWenjun3YangHui11DepartmentofBasicMedicine,JiangxiCollegeofTraditionalChineseMedicine,Fuzhou,344000;2DepartmentofPharmacy,JiangxiCollegeofTraditionalChineseMedicine,Fuzhou,344000;3FuzhouMedicalCollege,NanchangUniversity,Fuzhou,344000*Correspondingauthor,hsh712@163.comDOI:10.13271/j.mpb.021.000819AbstractQuercetinbelongstotheflavonoidsfamilyandisoneofthemainmedicinalingredientsofEuphorbiamaculata.Thecinnamate4-hydroxylase(C4H)isakeyenzymeinquercetinbiosynthesis.ToexplorethemechanismofquercetinbiosynthesisinEuphorbiamaculate,theORFofC4Hgeneanditspromotersequencewereclonedbyhomologouscloning,RACEtechnology,andTail-PCR.Then,geneexpressionlevelsweredetectedwithRT-qPCRindifferenttissuesduringdifferentgrowthperiods,andthebioinformaticanalysisofthisgeneanditspromoterwasperformed.Theresultsshowedthattheopeningreadingframe(ORF)ofEmC4Hgenewas1518bp,encoding505aminoacidresi...
