论著与临床研究ｌｎｃＲＮＡＳＮＨＧ３靶向调控ｍｉＲ⁃３４０对卵巢癌细胞上皮间质转化的影响蒋静，张珂∗，王丽基金项目：２０２２年度湖南省卫生健康委科研课题（项目编号：２０２２０５０１３３６２）作者单位：４１００００湖南长沙，湖南省妇幼保健院盆底专科作者简介：蒋静，毕业于南华大学，硕士研究生，主治医师，主要研究方向为卵巢肿瘤∗通信作者，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｊｉａｎｇｊｊ４１＠１６３．ｃｏｍ【摘要】目的探究长链非编码ＲＮＡ小核仁ＲＮＡ宿主基因３（ｌｎｃＲＮＡＳＮＨＧ３）对卵巢癌细胞恶性生物学行为的调控机制。方法体外培养人卵巢癌细胞株（ＳＫＯＶ３、Ａ２７８０、ＳＷ６２６和ＯＶＣＡＲ３）和正常卵巢上皮细胞（ＨＯＳＥｐｉＣ），将对数生长期的ＯＶＣＡＲ３细胞分为对照组、ｓｉ⁃ＮＣ组、ＳＮＨＧ３沉默组、ｍｉＲ⁃ＮＣ组、ｍｉＲ⁃３４０⁃５ｐ过表达组、ＳＮＨＧ３沉默＋ａｎｔｉ⁃ｍｉＲ⁃ＮＣ组、ＳＮＨＧ３沉默＋ａｎｔｉ⁃ｍｉＲ⁃３４０⁃５ｐ组。ＲＴ⁃ｑＰＣＲ检测细胞中ｌｎｃＲＮＡＳＮＨＧ３、ｍｉＲ⁃３４０⁃５ｐ表达；双荧光素酶实验验证ＳＮＨＧ３和ｍｉＲ⁃３４０⁃５ｐ的调控作用；ＣＣＫ⁃８法、划痕实验和Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室实验检测各组细胞增殖、迁移、侵袭能力；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测各组细胞中上皮间质转化（ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ＥＭＴ）相关蛋白［Ｅ⁃钙粘蛋白（Ｅ⁃ｃａｄｈｅｒｉｎ）、Ｎ⁃钙粘蛋白（Ｎ⁃ｃａｄｈｅｒｉｎ）、波形蛋白（ＶＩＭ）］表达。裸鼠成瘤实验检测沉默ＳＮＨＧ３的ＯＶＣＡＲ３细胞体内生长情况；免疫组织化学法和ＲＴ⁃ｑＰＣＲ检测移植瘤组织中Ｅ⁃ｃａｄｈｅｒｉｎ、ＶＩＭ和ｌｎｃＲＮＡＳＮＨＧ３、ｍｉＲ⁃３４０⁃５ｐ表达。结果与ＨＯＳＥｐｉＣ细胞相比，卵巢癌细胞系中ｌｎｃＲＮＡＳＮＨＧ３表达增加，ｍｉＲ⁃３４０⁃５ｐ表达降低（Ｐ＜０.０５）。双荧光素酶实验结果证实，ｍｉＲ⁃３４０⁃５ｐ是ＳＮＨＧ３的靶基因。敲低ＳＮＨＧ３或过表达ｍｉＲ⁃３４０⁃５ｐ可降低ＯＶＣＡＲ３细胞的增殖活性和迁移、侵袭能力以及Ｎ⁃ｃａｄｈｅｒｉｎ、ＶＩＭ水平，升高Ｅ⁃ｃａｄｈｅｒｉｎ水平（Ｐ＜０.０５）；下调ｍｉＲ⁃３４０⁃５ｐ可激活ＥＭＴ，减弱ＳＮＨＧ３沉默对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。体内实验结果显示，敲低ＳＮＨＧ３可抑制裸鼠移植瘤生长，并升高肿瘤组...
