2022第二十四卷第十一期★Vol.24No.11〔ModernizationofTraditionalChineseMedicineandMateriaMedica-WorldScienceandTechnology〕冰片促灯盏乙素透体外血-视网膜内屏障的作用研究*李志林1,郑祖杰1,黎晓冬1,曾洁萍2**(1.成都中医药大学成都610075;2.成都中医药大学附属医院成都610075)摘要:目的观察不同比例冰片对灯盏乙素在体外血-视网膜内屏障的促透作用。方法完成高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)检测灯盏乙素药物浓度的方法学开发和验证;体外培养大鼠视网膜血管内皮细胞,并用Transwell建立视网膜内皮细胞屏障模型;在体外血-视网膜内屏障模型的上室中给予含有不同比例冰片的灯盏溶液,分时段提取透屏障后的HBSS液,采用HPLC-MS/MS检测透屏障的下室HBSS液中灯盏乙素浓度。结果①自建HPLC-MS/MS检测灯盏乙素的方法特异性好,准确度、灵敏度高,各项方法学验证均符合2015版《中国药典》第四部中《9012生物样品定量分析方法验证指导原则》的要求。②建立体外血-视网膜内屏障模型成功,在体外内皮细胞屏障模型中,上室灯盏乙素浓度为100µg·mL-1,在2h后,上室中未添加冰片的下室灯盏乙素药物透过浓度为8.82µg·mL-1,上室添加冰片分别为60µg·mL-1、120µg·mL-1、240µg·mL-1、480µg·mL-1的下室中的灯盏乙素药物浓度分别为9.50µg·mL-1、9.57µg·mL-1、11.30µg·mL-1、12µg·mL-1。在冰片浓度为480µg·mL-1时,下室中灯盏乙素的能达到最大浓度为12µg·mL-1。结论①灯盏乙素在HBSS中的含量检测方法学验证成功;②冰片可能具备促进灯盏乙素透体外血-视网膜内屏障模型的作用;③在上室的冰片药物浓度达到480µg·mL-1时,本研究灯盏乙素透过体外血-视网膜内屏障模型达到最大药物浓度。关键词:高效液相色谱-串联质谱联用灯盏乙素冰片视网膜内屏障doi:10.11842/wst.20210910004中图分类号:R285.5文献标识码:A青光眼是以视网膜神经节细胞(Retinalganglioncells,RGCs)及其轴突进行性丢失为病理基础的神经变性性疾病,临床上青光眼的主要治疗措施是降低眼压,但临床发现某些眼压得到有效控制的青光眼患者,仍然存在视功能继续受损的情况,单纯控制眼压无法遏止RGCs凋亡[1]。故如何在眼压控制后继续对视神经保护成为国内外研究热点,在既往研究中已有采用各种中药对视神经保护的研究,诸如枸杞多糖、雷公藤、白藜芦醇等[2]。也有研究证实活血通络中药如灯盏细辛提取物对急性眼内压升高的大鼠RGCs具有确切的保护作用[3-...