12-去氧佛波醇-13-棕榈酸酯通过Fas/FasL通路调控K562细胞凋亡马立威1陈哲2李京3张洪涛3贾永明4刘吉成1(齐齐哈尔医学院1医药科学研究院,黑龙江齐齐哈尔161006;2公共卫生学院;3附属第三医院;4药学院)〔摘要〕目的探讨12-去氧佛波醇-13-棕榈酸酯(DP)诱导人白血病K562细胞凋亡及可能的分子机制。方法Ho-echst33342/PI染色后,荧光显微镜下观察不同浓度DP作用后的K562细胞形态学变化;DNA琼脂糖凝胶电泳法检测DP作用后的细胞DNA“梯带”;分光光度法检测半胱氨酸蛋白酶(caspase)3酶的活性;实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测caspase3、Fas、FasLmRNA表达;Western印迹检测procaspase3、Fas、FasL蛋白表达。结果荧光显微镜下可见:DP作用的K562细胞形态学变化明显;DNA琼脂糖凝胶电泳可见清晰的梯带,随剂量的增加片段化更加明显;与control组比较,DP的作用使caspase3酶活明显增加(P<0.05,P<0.01);DP的作用使caspase3、Fas、FasLmRNA表达明显增加(P<0.05,P<0.01);DP能明显下调procaspase3蛋白表达,明显上调Fas、FasL蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论Fas/FasL通路参与DP诱导K562细胞凋亡的调控。〔关键词〕12-去氧佛波醇-13-棕榈酸酯;K562细胞;Fas/FasL通路;细胞凋亡〔中图分类号〕R733.7〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202(2023)03-0684-05;doi:10.3969/j.issn.1005-9202.2023.03.045基金项目:齐齐哈尔医学科学院青年博士基金(QMSI2019B-02)通信作者:刘吉成(1958-),男,博士,教授,主要从事天然药物抗肿瘤分子生物学研究。第一作者:马立威(1987-),男,博士,助理研究员,主要从事抗肿瘤药物研究。白血病是造血干细胞的恶性克隆性疾病,恶性程度高、进展快、预后差。按起病的缓急可分为急性白血病和慢性白血病两大类。其中,K562细胞是慢性白血病中的慢性粒细胞性白血病的典型代表细胞,常被用于抗白血病的药物研究。目前西医对白血病的治疗仍以化疗为主要治疗手段。近年来,由于化疗方案的不断完善,使白血病能够得到一定的缓解,但化疗带来许多的不良结果不容忽视,诸如产生耐药、骨髓抑制、白细胞低易感染、血色素低需输血、血小板低出血等〔1〕。而中药具有多靶点、多环节、多效应的作用特点,使得从中药中寻找有效的抗肿瘤成分的研究成为热点,也为探讨中药及其有效成分对白血病的治疗研究提供了重要的方向。狼毒大戟为多年生的草本植物,根入药,其味辛,性平,具有逐水祛痰,散结杀虫的功效。中医记载为毒性中药,作为传统中药...