77现代检验医学杂志第38卷第1期2023年1月JModLabMed,Vol.38,No.1,Jan.2023miR-146调控TLR4/NF-κB通路减少卵泡颗粒细胞凋亡及干预卵巢早衰中的机制研究何凤屏1，2，刘彦慧1，熊符3，唐莉1，马秋林1，郭义红1，刘玉兰2（1.南方医科大学附属东莞妇幼保健院，东莞市生殖与遗传研究所，广东东莞523125；2.汕头大学医学院附属粤北人民医院分子生物学实验室，广东汕头512026；3.南方医科大学基础医学院遗传重点实验室，广州510515）摘要：目的探究miR-146通过调控Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）减少卵泡颗粒细胞凋亡和干预卵巢早衰（prematureovarianfailure,，POF）的机制。方法野生小鼠实验：60只SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照组（n=30）和POF组（n=30）。POF组建立卵巢早衰模型，造模后15天qPCR检测2组小鼠卵巢组织中miRNA-146表达水平；基因敲除鼠实验：40只C57BL/6小鼠和20只miR-146敲除小鼠分为三组：对照组（n=20）、野生型POF组（n=20）和miR-146敲除POF组（n=20），野生型POF组和miR-146敲除POF组建立POF模型，建模后15天HE染色分析各组小鼠卵巢组织病理情况及原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和闭锁卵泡数，ELISA检测各组小鼠卵巢组织炎症信号通路分子TLR，NF-κB,肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素6（IL-6）的表达水平；Westernblot检测卵巢组织凋亡蛋白BCL2-AssociatedX蛋白（Bax），B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl2）和TLR4信号通路蛋白TLR4，NF-κB表达水平。结果野生鼠实验表明与对照组相比，POF组小鼠卵泡中miR-146表达水平下调（0.51±0.14vs1.52±0.21），差异具有统计学意义（t=7.338，P<0.01）；基因敲除鼠实验表明：与对照组相比，野生型POF组和miR-146敲除POF组原始卵泡（9.43±2.03，6.43±1.60vs16.82±2.11）、初级卵泡（6.15±1.11，5.01±1.10vs8.88±1.12）、次级卵泡（5.11±1.71，4.01±1.26vs7.11±1.34）均降低，闭锁卵泡（10.17±1.41，11.46±1.96vs7.18±1.64）升高，差异具有统计学意义（F=7.787,8.214,9.726,7.811,均P<0.01）。与对照组相比，野生鼠POF组和miR-146敲除POF组小鼠卵巢组织TLR4（68.18±5.92pg/ml，91.11±16.34pg/mlvs24.81±2.81pg/ml），NF-κB（74.19±8.11pg/ml，88.11±16.71pg/mlvs68.18±5.92pg/ml），TNF-α（72.81±2.10pg/ml，94.31±2.26pg/mlvs28.07±3.67pg/ml）和IL-6（69.19±7.11，81.11±16.34vs19.43±10.81pg/ml）分泌显著升高，差异均有统计学意义（F=6.281,7.264,8.724,6.817,...
