2023年地锦草化学成分研究地锦草的功效.docx

天道酬勤 地锦草化学成分研究:地锦草的成效 　　【】目的：研究地锦草的化学成分。方法：采用硅胶、聚酰胺和 Sephadex LH-20柱色谱别离，通过理化性质和光谱数据确定结构。结果：从乙醇提取物的正丁醇萃取局局部得8个化合物，其结构分别鉴定为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷〔Ⅰ〕、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷〔Ⅱ〕、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷〔Ⅲ〕、槲皮素〔Ⅳ〕、短叶苏木酚〔Ⅴ〕、槲皮素-7-O-β-D -葡萄糖苷〔Ⅵ〕、紫云黄芪苷-6″-O-没食子酸酯〔Ⅶ〕、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖〔1→6〕-β-D-吡喃半乳糖苷〔Ⅷ〕。结论：化合物Ⅲ，Ⅵ，Ⅶ和Ⅷ均为首次从该植物中别离得到。 　　【关键词】地锦草；化学成分；黄酮；短叶苏木酚 　　【中图分类号】R668 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2023)06-0298-02 　　 地锦草为地锦Euporbia humifusa Willd或斑地锦Euporbia maculata L..的枯燥全草。地锦草分布广泛，资源丰富。历版中国药典均收载地锦草，其味辛，性平，归肝、大肠经，具有清热解毒，凉血止血之成效。药理研究说明地锦草具有抗菌、抗病毒、止血、止泻、抗氧化、保肝、抑制肾功能损伤、抗肿瘤、抗焦虑和镇痛等作用[1]。已报道的文献中关于地锦草化学成分的研究较少，为探寻其有效成分，本文对地锦草进行了系统的化学成分研究，从乙醇提取物的正丁醇萃取局部得到了8个化合物〔Ⅰ~Ⅷ〕，其中化合物Ⅲ，Ⅵ，Ⅶ和Ⅷ为首次从该植物中别离得到。 　　1 仪器与材料 　　Yanaco MP-S3显微熔点测定仪；HITACHI 200-20型紫外分光光度计；Bruker ARX-300型核磁共振仪〔TMS为内标，DMSO-d6为溶剂〕；Shimadzu 2023型质谱仪。柱色谱用硅胶及薄层色谱用硅胶G〔青岛海洋化工厂〕；柱色谱用聚酰胺及薄层色谱用聚酰胺〔浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂〕；Sephadex LH-20〔Pharmacia公司〕。 　　地锦草于购自河北祁新中药颗粒饮片。槲皮素对照品〔中国药品生物制品检定所〕。 　　2 提取与别离　　地锦草枯燥全草5.0 kg，95 %乙醇回流提取3次，趁热过滤，合并滤液，减压回收乙醇，浸膏加适量水分散，依次用石油醚〔60 ~ 90 ℃〕、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到相应萃取物。正丁醇萃取物〔80 g〕经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇〔100 : 0 ~ 0 : 100〕梯度洗脱，共收集到363个流分，每个流分约2700 mL。Fr.109 ~ 186得到化合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅴ的粗品，化合物Ⅰ，Ⅱ，和Ⅴ的粗品，用Sephadex LH-20柱色谱〔甲醇洗脱〕进行纯化，分别得到化合物Ⅰ〔308 mg〕，Ⅱ〔425 mg〕和Ⅴ〔186 mg〕。Fr.66 ~ 89〔1.9 g〕，Fr.153 ~ 159〔1.1 g〕，和Fr.195 ~ 201〔5.0 g〕经聚酰胺和Sephadex LH-20柱色谱纯化，分别得到化合物Ⅳ〔47 mg〕，Ⅲ〔36 mg〕和Ⅷ〔72 mg〕。Fr.171 ~ 194〔6.0 g〕经聚酰胺和Sephadex LH-20柱色谱纯化，得到化合物Ⅵ〔27 mg〕和Ⅶ〔35 mg〕。 　　3 结构鉴定 　　化合物Ⅰ 浅黄色粉末〔甲醇〕，mp 226~228 ℃，盐酸镁粉反响阳性，三氯化铝反响呈黄绿色荧光。UV〔MeOH〕nm：270，335。ESI-MS m/z：431[M - H]-。1H-NMR〔DMSO-d6〕δ：12.97〔1H，s，5-OH〕，10.42〔1H，s，4′-OH〕，7.97〔2H，d，J = 8.7 Hz，H-2′，6′〕，6.94〔2H，d，J = 8.7 Hz，H-3′，5′〕，6.88〔1H，s，H-3〕，6.84〔1H，s，H-8〕，6.45〔1H，s，H-6〕。13C-NMR〔DMSO-d6〕δ：182.7〔C-4〕，165.0〔C-7〕，163.6〔C-2〕，162.0〔C-5〕，161.8〔C-4′〕，157.7〔C-9〕，129.4〔C-2′，6′〕，121.7〔C-1′〕，116.8〔C-3′，5′〕，106.0〔C-10〕，103.7〔C-3〕，100.6〔C-1″〕100.2〔C-6〕，95.6〔C-8〕，77.8〔C-5″〕，77.0〔C-3″〕，73.8〔C-2″〕，70.3〔C-4″〕，61.3〔C-6″〕。以上数据与文献[2]报道一致，故鉴定为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷。 　　化合物Ⅱ 浅黄色粉末〔甲醇〕，mp 252~254 ℃，盐酸镁粉反响阳性，三氯化铝反响呈黄绿色荧光。UV〔MeOH〕nm：258，348。ESI-MS m/z：447[M - H]-。1H-NMR〔DMSO-d6〕δ：12.97〔1H，s，5-OH〕，7.45〔1H，dd，J = 8.3，2.3 Hz，H-6′〕，7.42〔1H，d，J = 2.3 Hz，H-2′〕，6.90〔1H，d，J = 8.2 Hz， H-5′〕，6.79〔1H，d，J = 1.9 Hz，H-8〕，6.76〔1H，s，H-3〕，6.45〔1H，d，J=1.9 Hz，H-6〕，5.08〔1H，d，J = 7.1 Hz，H-1″〕。�13C-NMR〔DMSO-d6〕δ：182.0〔C-4〕，164.6〔C-2〕，163.0〔C-7〕，161.2〔C-5〕，157.0〔C-9〕，150.1〔C-4′〕，145.9〔C-3′〕，121.4〔C-1′〕，119.3〔C-6′〕，116.1〔C-5′〕，113.6〔C-2′〕，105.4〔C-10〕，103.7〔C-3〕，99.9〔C-1″〕，99.7〔C-6〕，94.8〔C-8〕，77.2〔C-3″〕，76.5〔C-5″〕，73.2〔C-2″〕，69.6〔C-4″〕，60.7〔C-6″〕。以上数据与文献[2]报道一致，故鉴定为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷。 　　化合物Ⅲ 浅黄色簇状结晶〔甲醇〕，mp 171~173 ℃，盐酸镁粉反响阳性，三氯化铝反响呈黄色荧光。UV〔MeOH〕nm：266，350。ESI-MS m/z：447[M - H]-。��1H-NMR〔DMSO-d��6〕δ：12.62〔1H，s，5-OH〕，10.85〔1H，s，7-OH〕，10.20〔1H，s，4 ′-OH〕，8.04〔2H，d，J = 8.7 Hz，H-2′，6′〕，6.89〔2H，d，J = 8.7 Hz，H-3′，5′〕，6.44〔1H，d，J = 2.0 Hz， H-8〕，6.21〔1H，d，J = 2.0 Hz，H-6〕，5.47〔1H，d，J = 7.2 Hz，H-1″〕。�13C-NMR〔DMSO-d6〕δ：177.6〔C-4〕，164.2〔C-7〕，161.3〔C-5〕，160.0〔C-4′〕，156.5〔C-2〕，156.3〔C-9〕，133.3〔C-3〕，131.0〔C-2′，6′〕，121.0〔C-1′〕，115.2〔C-3′，5′〕，104.1〔C-10〕，100.9〔C-1″〕98.8〔C-6〕，93.8〔C-8〕，77.6〔C-5″〕，76.5〔C-3″〕，74.3〔C-2″〕，70.0〔C-4″〕，60.9〔C-6″〕。以上数据与文献[3]报道一致，故鉴定为山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷。 　　化合物Ⅳ 黄色粉末〔甲醇〕，mp 298~300 ℃，盐酸镁粉反响阳性，三氯化铝反响呈黄绿色荧光。UV〔MeOH〕nm：257，375。ESI-MS m/z：301[M - H]-。1H-NMR〔DMSO-d6〕δ：12.50〔1H，s，5-OH〕，10.77〔1H，s，7-OH〕，9.37〔3H，brs，3-OH，3 ′-OH，4 ′-OH〕，7.67〔1H，d，J = 1.8 Hz，H-2′〕，7.54〔1H，dd，J = 8.7，1.8 Hz，H-6′〕，6.88〔1H，d，J = 8.4 Hz， H-5′〕，6.40〔1H，d，J = 1.5 Hz，H-8〕，6.18〔1H，d，J = 1.5 Hz，H-6〕。以上数据与文献[4]报道一致，且薄层色谱Rf值与槲皮素对照品一致，故鉴定为槲皮素。 　　化合物Ⅴ 浅黄色粉末〔甲醇〕，mp ＞300 ℃，盐酸镁粉反响阳性，三氯化铝反响呈蓝色荧光。UV〔MeOH〕nm：276。ESI-MS m/z：247[M - H]-。��1H-NMR〔DMSO-d6〕δ：7.26〔1H，s，H-7〕，3.18〔2H，m，H-3〕，2.51〔2H，m，H-2〕。�13C-NMR〔DMSO-d6〕δ：195.6〔C-1〕，160.7〔C-11〕，149.4〔C-12〕，145.1〔C-10〕，144.4〔C-8〕，141.6〔C-9〕，140.7〔C-5〕，115.5〔C-4〕，112.9〔C-6〕，108.0〔C-7〕，33.1〔C-2〕，24.0〔C-3〕。以上数据与文献[5]报道一致，故鉴定为短叶苏木酚。 　　化合物Ⅵ 浅黄色粉末〔甲醇〕，mp 221~223 ℃，盐酸镁粉反响阳性，三氯化铝反响呈黄绿色荧光。UV〔MeOH〕nm：256，373。ESI-MS m/z：463[M - H]-。1H-NMR〔DMSO-d6〕δ：12.53〔1H，s，5-OH〕，7.72〔1H，d，J = 2.1 Hz，H-2′〕，7.57〔1H，dd，J = 8.7，2.1 Hz，H-6′〕，6.90〔1H，d，J = 8.7 Hz，H-5′〕，6.77〔1H，d，J = 1.8 Hz，H-8〕，6.42〔1H，d，J = 2.1 Hz，H-6〕，5.08〔1H，d，J = 7.2 Hz，H-1″〕。13C-NMR〔DMSO-d6〕δ：176.1〔C-4〕，162.8〔C-7〕，160.5〔C-5〕，155.8〔C-9〕，148.0〔C-4′〕，147.7〔C-2〕，145.2〔C-3′〕，136.2〔C-3〕，122.0〔C-1′〕，120.1〔C-6′〕，115.7〔C-5′〕，115.5〔C-2′〕，104.8〔C-10〕，99.9〔C-1″〕，98.8〔C-6〕，94.3〔C-8〕，77.3〔C-5″〕，76.5〔C-3″〕，73.2〔C-2″〕，69.6〔C-4″〕，60.7〔C-6″〕。以上数据与文献[6]报道一致，故鉴定为槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷。 　　化合物Ⅶ 浅黄色粉末〔甲醇〕，盐酸镁粉反响阳性，三氯化铝反响呈黄色荧光。UV〔MeOH〕nm：267，347。ESI-MS m/z：599[M - H]-。��1H-NMR〔DMSO-d�6〕δ：7.94〔2H，d，J = 9.0 Hz，H-2′，6′〕，6.91〔2H，s，H-2″′，6″′〕，6.76〔2H，d，J = 8.7 Hz，H-3′，5′〕，6.38〔1H，d，J = 2.1 Hz，H-8〕，6.18〔1H，d，J = 1.8 Hz，H-6〕，5.45〔1H，d，J = 7.2 Hz，H-1″〕，4.26〔1H，d，J = 11.4 Hz，H-6″〕，4.21〔1H，dd，J = 11.4，3.5 Hz，H-6″〕，3.43〔1H，m，H-5″〕，3.30，3.27，3.25〔each 1H，t，J = 7.5 Hz，H-2″，3″，4″〕。13C-NMR〔DMSO-d��6〕δ：177.3〔C-4〕，165.7(C-7″′),164.7〔C-7〕，161.2〔C-5〕，160.0〔C-4′〕，156.8〔C-9〕，156.5〔C-2〕，145.6〔C-3″′,5″′〕,138.5〔C-4″′〕,133.2〔C-3〕，130.8〔C-2′，6′〕，120.7〔C-1′〕，119.4〔C-1″′〕，115.2〔C-3′，5′〕，108.6〔C-2″′，6″′〕，103.9〔C-10〕，101.6〔C-1″〕99.0〔C-6〕，93.9〔C-8〕