2023年水溶性多糖的提取及结构测定方案.docx

水溶性多糖的提取及结构测定方案 1多糖的生产及提取 种子液制备。单菌落入50ml（葡萄糖2%，蛋白胨1%，乙酸0.4%，磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.03%，乙醇1.5%，naoh0.25%，115-120℃维持20min。）120r/m48h。将种子液按5%（v/v）转接入20230ml上述种子液中，120r/m，4d。 4000r/m去bc，0.22μm膜过滤去细胞或14000r/m，20min去细胞。50℃旋转蒸发浓缩至原体积的1/5。参加无水乙醇，使其浓度为85%。沉淀再经90%乙醇洗涤3次。50℃真空枯燥24h。 [1]杜秀菊，徐伟，穆红梅，彭向前，冯玮.桦褐孔菌多糖的药理活性与化学结构研究进展[j].食用菌学报，2023，01：20230-20234. [1]林华娟，田晓春，秦小明，路垚，杨基柱.金花茶多糖单一成分的化学结构特征解析[j].食品科学，2023，03：141-146. 2多糖除杂 （sevag法）多糖参加适量蒸馏水溶解，按多糖溶液：氯仿：正丁醇=25：5：1比例参加氯仿及正丁醇，漩涡振荡20-30min，静置分层（或者3400r/m，15min），提取水层多糖液，反复操作3次，获得多糖水溶液，将其稀释至2023倍，在紫外-可见分光光度计扫描，直至260-280nm处没有吸收峰为止。（张倩，张民，王超，等.枸杞多糖的别离纯化及结构研究[j].食品与发酵工业，2023，40（12）：41-47.） [1]李娟.桦褐孔菌子实体和发酵多糖的促生细胞因子作用及化学结构研究[d].浙江理工大学，2023. 3分子量测定 经除杂的多糖水溶液参加无水乙醇，使其浓度为90%，经50℃真空枯燥24h，保存备用。称取一定量的多糖，参加蒸馏水溶解，以葡聚糖为标准物质，上gpc进行分子量测定。（[1]罗建光.鲍氏层孔菌菌丝体多糖别离纯化、结构鉴定及其生物活性的研究[d].南京农业大学，202223.） 4多糖组成测定 （1）称取适量多糖于具塞试管中，参加2mol/l三氟乙酸（tfa）4ml，在120℃下水解2h。（2）减压蒸干（低于40℃）。 （3）然后参加3ml甲醇蒸干，重复以上操作4一5次，以完全除去tfa。 [1]姜军.山药多糖的别离纯化及其化学结构的初步研究[d].扬州大学，202223.[1]毛丰玮.亚麻籽壳多糖的提取、别离纯化与结构研究[d].浙江工商大学，2023. [1]凡军民.毛头鬼伞菌丝体多糖的别离、纯化和化学结构鉴定及生物活性研究[d].南京农业大学，2023.（4）hplc测定色谱条件为： 色谱柱为shodexks804sugar（300mm×7.8mm）柱温40度流动相为水 -1 流速0.8ml·min 检测用42023rⅠ示差检测器，数据处理用82023gpc软件进行。 同时用鼠李糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸8种单糖进行对照，根据峰值确定样品的单糖组成。 （[1]李军.阿魏侧耳子实体多糖别离纯化及其化学结构的初步研究[d].华中农业大学，2022.） 5红外光谱确定多糖结构 水溶性多糖的提取及结构测定方案.doc免费为全国范文类知名网站，下载全文稍作修改便可使用，即刻完成写稿任务。 支付6元已有11人下载 下载这篇word文档 第3页 共3页