HJ 960-2018 土壤和沉积物 氨基甲酸酯类农药的测定 柱后衍生-高效液相色谱法.pdf

中华人民共和国国家环境保护标准 HJ 9602018 土壤和沉积物 氨基甲酸酯类农药的测定 柱后衍生-高效液相色谱法 Soil and sedimentDetermination of carbamate pesticides Post-column derivatization-high performance liquid chromatography 2018-08-02 发布 2019-01-01 实施 生 态 环 境 部 发 布 HJ 9602018 i 中华人民共和国生态环境部 公 告 2018 年 第 27 号 为贯彻中华人民共和国环境保护法，保护生态环境，保障人体健康，规范生态环境监测工作，现批准土壤和沉积物 氨基甲酸酯类农药的测定 柱后衍生-高效液相色谱法等四项标准为国家环境保护标准，并予发布。标准名称、编号如下：一、土壤和沉积物 氨基甲酸酯类农药的测定 柱后衍生-高效液相色谱法（HJ 9602018）；二、土壤和沉积物 氨基甲酸酯类农药的测定 高效液相色谱-三重四极杆质谱法（HJ 9612018）；三、土壤 pH 值的测定 电位法（HJ 9622018）；四、固体废物 有机磷类和拟除虫菊酯类等 47 种农药的测定 气相色谱-质谱法（HJ 9632018）。以上标准自 2019 年 1 月 1 日起实施，由中国环境出版集团出版。标准内容可在生态环境部网站（ 2018 年 8 月 2 日 HJ 9602018 iii 目 次 前 言.iv 1 适用范围.1 2 规范性引用文件.1 3 方法原理.1 4 干扰和消除.2 5 试剂和材料.2 6 仪器和设备.3 7 样品.3 8 分析步骤.4 9 结果计算与表示.5 10 精密度和准确度.6 11 质量保证和质量控制.6 12 废物处理.7 附录 A（规范性附录）方法检出限和测定下限.8 附录 B（资料性附录）方法精密度和准确度.9 HJ 9602018 iv 前 言 为贯彻中华人民共和国环境保护法，保护生态环境，保障人体健康，规范土壤和沉积物中氨基甲酸酯类农药的测定方法，制定本标准。本标准规定了测定土壤和沉积物中 10 种氨基甲酸酯类农药的柱后衍生-高效液相色谱法。本标准的附录 A 为规范性附录，附录 B 为资料性附录。本标准为首次发布。本标准由环境监测司、科技标准司组织制订。本标准起草单位：浙江省环境监测中心。本标准验证单位：江苏省环境监测中心、杭州市环境监测中心站、绍兴市环境监测中心站、苏州市环境监测中心站、浙江环境监测工程有限公司和中检集团理化检测有限公司。本标准生态环境部 2018 年 8 月 2 日批准。本标准自 2019 年 1 月 1 日起实施。本标准由生态环境部解释。HJ 9602018 1 土壤和沉积物 氨基甲酸酯类农药的测定 柱后衍生-高效液相色谱法 警告：实验中使用的溶剂和标准溶液对人体健康有害，溶液配制及样品前处理过程应在通风橱内进行；操作时应按要求佩戴防护器具，避免直接接触皮肤和衣物。1 适用范围 本标准规定了测定土壤和沉积物中 10 种氨基甲酸酯类农药的柱后衍生-高效液相色谱法。本标准适用于土壤和沉积物中涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、3-羟基克百威、涕灭威、残杀威、克百威、甲萘威、异丙威、甲硫威等 10 种氨基甲酸酯类农药的测定。当取样量为 10 g，试样定容体积为 1.0 ml，进样体积为 15 l 时，10 种氨基甲酸酯类农药的方法检出限为 13 g/kg，测定下限为 412 g/kg。详见附录 A。2 规范性引用文件 本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 17378.3 海洋监测规范 第 3 部分：样品采集、贮存与运输 GB 17378.5 海洋监测规范 第 5 部分：沉积物分析 HJ 494 水质 采样技术指导 HJ 613 土壤 干物质和水分的测定 重量法 HJ 783 土壤和沉积物 有机物的提取 加压流体萃取法 HJ/T 166 土壤环境监测技术规范 3 方法原理 土壤或沉积物中的氨基甲酸酯类农药经有机溶剂提取、固相萃取柱净化、浓缩、定容、用液相色谱柱分离后，在碱性条件下水解生成甲胺式（1），与衍生化试剂反应生成具有强荧光物质式（2），用荧光检测器测定。根据保留时间定性，外标法定量。CH3+H2ONHOROCH3NH2+ROH+CO32-碱性水溶液 （1）CHO+CH3NH2CHO+HSCH2CH2OHNCH3SCH2CH2OH碱性水溶液 （2）HJ 9602018 2 4 干扰和消除 具有相近保留时间的物质对测定产生干扰，可通过改变流动相梯度洗脱程序、标准添加法、定量定性波长吸收比等方法消除干扰。5 试剂和材料 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的不含目标物的纯水。5.1 乙腈（CH3CN）：液相色谱级。5.2 甲醇（CH3OH）：液相色谱级。5.3 二氯甲烷（CH2Cl2）：液相色谱级。5.4 氢氧化钠（NaOH）。5.5 四硼酸钠（Na2B4O710H2O）。5.6 2-巯基乙醇（HSC2H4OH）或 2-二甲氨基乙硫醇盐酸盐（C4H11NSHCl）。5.7 邻苯二甲醛（C8H6O2）。5.8 无水硫酸钠（Na2SO4）。马弗炉中 450灼烧 4 h，稍冷却后置于干燥器中备用。5.9 水解液：氢氧化钠溶液，c（NaOH）=0.05 mol/L。称取 2.0 g 氢氧化钠（5.4），用水溶解并稀释至 1 L，经滤膜（5.19）过滤。也可直接购买市售商品。5.10 四硼酸钠溶液：c（Na2B4O710H2O）=0.05 mol/L。称取 19.1 g 四硼酸钠（5.5），用水溶解并稀释至 1 L，经滤膜（5.19）过滤。也可直接购买市售商品。5.11 衍生化试剂。称取 0.1 g 邻苯二甲醛（5.7），溶于 10 ml 甲醇（5.2）。移取 200 l 2-巯基乙醇（5.6）或称取 2.0 g 2-二甲氨基乙硫醇盐酸盐（5.6），溶于 10 ml 四硼酸钠溶液（5.10）。将上述 2 种溶液混合后用四硼酸钠溶液（5.10）稀释至 1 L。5.12 甲醇-二氯甲烷混合溶剂：1+2。用甲醇（5.2）和二氯甲烷（5.3）按 12 体积比混合。5.13 甲醇-二氯甲烷混合溶剂：1+9。用甲醇（5.2）和二氯甲烷（5.3）按 19 体积比混合。5.14 氨基甲酸酯类农药标准贮备液：=100 mg/L。直接购买市售有证标准溶液，按标准溶液证书要求保存。5.15 氨基甲酸酯类农药标准使用液：=10 mg/L。取 500 l 氨基甲酸酯类农药标准贮备液（5.14）于 5 ml 容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，混匀，置于18冰箱，密封、避光保存，保存期为 6 个月。5.16 固相萃取柱：石墨化炭黑/N-丙基乙二胺复合填料萃取柱（500 mg/6 ml）或其他性能相近的固相萃取柱。5.17 硅藻土：0.60.9 mm（3020 目）。5.18 石英砂：150830 m（200100 目）。马弗炉中 450灼烧 4 h，稍冷却后置于洁净干燥器中备用。5.19 滤膜：0.45 m 聚醚砜或其他等效材质。5.20 滤膜：0.45 m 聚四氟乙烯或其他等效材质。HJ 9602018 3 5.21 氮气：纯度99.99%。6 仪器和设备 6.1 高效液相色谱仪。6.1.1 具有荧光检测器、梯度洗脱功能。6.1.2 具有柱后衍生系统，能自动完成衍生反应。6.1.3 色谱柱：填料粒径为 5 m，柱长为 25.0 cm，内径为 4.0 mm 的 C8色谱柱或其他性能相近的色谱柱。6.2 冷冻干燥仪。6.3 提取装置：加压流体萃取仪（配有 50 ml 以下萃取池）、索氏提取装置、自动索氏提取仪或其他性能相当的提取装置。6.4 浓缩装置：氮吹浓缩仪、旋转蒸发仪或其他性能相当的设备。6.5 分析天平：感量为 0.01 g。6.6 一般实验室常用仪器和设备。7 样品 7.1 样品采集和保存 按照 HJ/T 166 的相关要求采集和保存土壤样品，按照 HJ 494 的相关要求采集水体沉积物样品，按照 GB 17378.3 的相关要求采集海洋沉积物样品。样品采集后，04密封、避光保存，7 d 内完成萃取。7.2 样品的制备 除去样品中的异物（枝棒、叶片、石子等），将样品完全混匀。如样品水分含量较高，应先用冷冻干燥仪（6.2）干燥。称取两份约 10 g（精确至 0.01 g）的样品。土壤样品一份用于测定干物质含量，另一份用于提取。使用加压流体萃取法提取时，加入适量硅藻土（5.17），装入萃取池中。使用索氏提取时，加入适量无水硫酸钠（5.8），装入提取管中。沉积物样品一份用于测定含水率，另一份用于提取，提取方法参照土壤样品。7.3 水分的测定 按照 HJ 613 测定土壤样品干物质含量，按照 GB 17378.5 测定沉积物样品含水率。7.4 试样的制备 7.4.1 提取 7.4.1.1 加压流体萃取 采用甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.12）提取样品中氨基甲酸酯类农药，压力 10.34 MPa，萃取温度 80，加热时间 5 min，静态萃取时间 5 min，冲洗量 80%，萃取后氮气吹扫 60 s，循环萃取 3 次。或按照 HJ 783进行萃取条件的设置和优化。7.4.1.2 索氏提取 将滤筒置于索氏提取器回流管中，在圆底溶剂瓶中加入 200 ml 甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.12），提取 12 h，回流速度控制在 46 次/h。提取完毕，取出圆底溶剂瓶，待浓缩。注：若经过验证也可使用其他等效提取方法。HJ 9602018 4 7.4.2 浓缩 用浓缩装置（6.4）将萃取液（7.4.1）浓缩至近 1.0 ml，待净化。7.4.3 净化 用 5.0 ml 甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.13）以 2 ml/min 的速度活化固相萃取柱（5.16），在填料即将暴露于空气之前，将浓缩液（7.4.2）转移至柱头，在填料即将暴露于空气之前，用 5.0 ml 甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.13）洗脱萃取柱，收集洗脱液于刻度管中。注：使用不同批次萃取柱净化样品时，需通过实验确定洗脱溶剂用量。7.4.4 净化后浓缩 用氮吹浓缩仪（6.4）将洗脱液（7.4.3）30以下浓缩至近干，用甲醇（5.2）定容至 1.0 ml，过滤膜（5.20），待测。处理好的试样应于18以下冰箱冷冻保存，在 30d 内完成分析。7.5 空白试样的制备 用石英砂（5.18）代替实际样品，按照与试样的制备（7.4）相同的步骤制备空白试样。8 分析步骤 8.1 参考测量条件 8.1.1 柱后衍生条件 反应器温度：100。衍生泵流速：0.3 ml/min。8.1.2 色谱条件 流动相：流动相 A 乙腈（5.1），流动相 B 水，梯度洗脱程序见表 1。流速：0.8 ml/min；进样体积：15 l；柱温：37；荧光检测器：激发波长 330 nm，定量发射波长 460 nm，定性发射波长 435 nm。表 1 梯度洗脱程序 时间/min 流动相 A/%流动相 B/%0 12 88 2 12 88 42 66 34 45 100 0 48 12 88 8.2 标准曲线的建立 移取适量的氨基甲酸酯类农药标准使用液（5.15）至 5 ml 容量瓶，用甲醇（5.2）稀释至标线，配制至少 5 个质量浓度点的标准系列，标准系列质量浓度分别为 0.05 g/ml、0.50 g/ml、1.00 g/ml、2.50 g/ml 和 5.00 g/ml（此为参考浓度）。由低质量浓度到高质量浓度依次对标准系列溶液进样，按照测量条件（8.1）分析，以标准系列溶液中各氨基甲酸酯农药的质量浓度为横坐标，以其对应的峰面积（或峰高）为纵坐标，建立标准曲线。8.3 试样测定 按照与标准曲线的建立（8.2）相同的步骤进行试样（7.4）的测定。HJ 9602018 5 8.4 空白试验 按照与试样测定（8.3）相同的步骤进行空白试样（7.5）的测定。9 结果计算与表示 9