中华人民共和国国家标准犌犅5413.20—2022食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定20220630发布20221230实施中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局发布犌犅5413.20—2022Ⅰ前言本标准代替GB5413.20—2013《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定》。本标准与GB5413.20—2013相比,主要变化如下:———删除了第二法雷氏盐分光光度法,增加了离子色谱法作为第二法;———增加了液相色谱串联质谱法作为第三法。犌犅5413.20—20221食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定1范围本标准规定了婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定。第一法酶比色法2原理试样经酸水解,再经酶作用后与显色剂反应生成有色物质,在一定浓度范围内,其颜色的深浅与胆碱含量成正比,外标法定量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。3.1试剂3.1.1三羟甲基氨基甲烷[(CH2OH)3CNH2]。3.1.2苯酚(C6H5OH)。3.1.3浓盐酸(HCl)。3.1.4氢氧化钠(NaOH)。3.1.5胆碱氧化酶:≥10U/mg,置于-20℃保存。3.1.6过氧化物酶:≥250U/mg,置于2℃~8℃保存。3.1.74氨基安替比林(C11H13N3O)。3.1.8磷脂酶D:≥60U/mg,置于-20℃保存。3.2试剂配制3.2.1盐酸溶液(1mol/L):量取85mL浓盐酸注入约900mL水中,稀释至1000mL。3.2.2盐酸溶液(3mol/L):量取250mL浓盐酸注入约600mL水中,稀释至1000mL。3.2.3三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液(Tris)(0.05mol/L):准确称取6.057g三羟甲基氨基甲烷溶于500mL水中,用盐酸溶液(1mol/L)调pH至8.0±0.2,再用水定容至1000mL。此溶液在4℃冰箱中可保存1个月。3.2.4显色剂:取120U的胆碱氧化酶、280U的过氧化物酶、100U的磷脂酶D、15mg4氨基安替比林和50mg苯酚置于100mL的容量瓶中,用0.05mol/LTris缓冲溶液溶解并定容。临用现配。3.2.5氢氧化钠溶液(500g/L):称取500g氢氧化钠,溶于水并稀释至1000mL,采用塑料容...