流式细胞术及其科研应用.pptVIP免费

流式细胞术及其科研应用流式细胞仪的原理BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞术的基本概念流式细胞术（FlowCytometry,简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性，并加以定量的技术，同时可以对特定群体加以分选研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞术的特点极短时间内可分析大量细胞，只要标本中的细胞数量足够，流式细胞仪（Flowcytometer）可以每秒钟数十、数百、数千个细胞的速率进行测量，测量的细胞总数可达数千、数万乃至数百万个。可同时分析单个细胞的多种特征，当同时用多种分子探针，如用不同荧光素标记的不同单克隆抗体进行多色荧光染色，通过流式细胞分析，即可获得单细胞的多种信息，使细胞亚群的识别、计数更为准确。定性或定量分析细胞：通过荧光染色对单细胞的某些成分如DNA含量、抗原或受体表达量、Ca2+浓度、酶活性以及细胞的功能等均可进行单细胞水平的定性与定量分析强大的分选功能，在分析的同时可以对特定群体加以分选BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞仪的检测范围细胞结构细胞大小细胞粒度细胞表面面积核浆比例DNA含量与细胞周期RNA含量蛋白质含量细胞功能细胞表面/胞浆/核的特异性抗原细胞活性细胞内细胞因子酶活性激素结合位点细胞受体BDBiosciencesImmuneFunction当前流式细胞分析发展趋势从相对细胞计数到绝对细胞计数从相对定量到绝对定量分析从单色到多色荧光分析从细胞膜成分到细胞内成分分析从细胞分析到可溶性成分的流式细胞分析BDBiosciencesImmuneFunction散射光信号RightAngleLightDetectorCellComplexitySSCForwardLightDetectorCellSurfaceAreaFSCIncidentLightSource前向角散射光（FSC,ForwardScatter）细胞相对大小及其表面积侧向角散射光（SSC,SideScatter）细胞粒度及细胞内相对复杂性LaserFALSSensorBDBiosciencesImmuneFunction外周全血细胞散射光双参数点图（红细胞溶解后）BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞仪的检测信号荧光信号•使用荧光标记的单克隆抗体染色，做多色分析•荧光信号的强弱，反映了细胞抗原的表达含量BDBiosciencesImmuneFunction荧光信号双色直接染色BDBiosciencesImmuneFunction数据分析直方图分析BDBiosciencesImmuneFunction数据分析点图分析BDB...