血细胞形态2014.ppt

外周血细胞形态学检查 赤峰学院附属医院检验科赤峰学院附属医院检验科 张张 皓皓 血细胞分析是临床诊疗工作中常做的检验项目，血细胞分析仪广泛用于全血细胞计数，随着自动化血细胞分析仪的普及和仪器性能的提高，使检验结果更加准确，但是全自动血细胞分析仪也存在着内在缺陷，由于血细胞形态的多样化和复杂性，只能提供血细胞多少、大小、分布及相互间比例，得出正常或异常的提示，不能直接提供血细胞质量改变的确切信息，如过度依赖会出现漏诊和误诊。对于发热、贫血和血细胞异常的标本，在鉴别感染性疾病和非感染性疾病，病毒性感染和细菌性感染等必须做外周血的形态学检查。血液涂片制备 取末梢血1滴，置于载玻片的一端，以边缘平滑的推片（推片两端应平整光滑，比载片稍窄或磨去两角）的一端，放在血滴前方，逐渐后移接触血滴，血液立即沿推片散开。然后将推片与载玻片保持30-45度角，平稳地向前推动至载玻片的另一端，载玻片上便留下一薄层血膜。血涂片制成后，立即在空气中挥动，迅速干燥，以免血细胞形态改变。血膜干燥后，用铅笔在厚血膜处写明病人姓名或编号。血液涂片制备是血液学检查重要的基本技术之一。一张良好的血片，厚薄要适宜，头体尾要明显，细胞分布要均匀，血膜边缘要整齐，并留有一定的空隙。试剂配制 1、瑞氏染液 将瑞氏染料0.1g粉放在清洁干燥的乳钵里，加少量甲醇，充分研磨使染料溶解。将巳溶解的染料倒入棕色试剂瓶中，未溶解的再加少量甲醇研磨，直至染料全部溶解，60毫升甲醇全部用完为止。或将瑞氏粉和甲醇直接置于棕色瓶中，加适量碎玻璃，立即振荡混合5分钟（一般600 ml甲醇加瑞氏粉1.21.5g），置37水浴中3天，每天振摇混合23次，促其溶解，待一周后方可使用。新配染料的染色效果较差，放置愈久天青愈多，染色效果愈好。染液中也可加中性甘油3.0ml，防止甲醇挥发，使细胞染色较清晰。2、磷酸盐缓冲液(pH6.46.8)磷酸二氢钾（KH2P04）0.3g，磷酸氢二钠(Na2HP04)0.2 g，蒸馏水加至1000.0ml。配好后用磷酸盐溶液校正pH,塞紧瓶口贮存。染色方法 1、将制备好血涂片平放在染色架上。2、先加瑞氏染液数滴，覆盖整个血膜，固定细胞0.51min。3、按1：1或1：2加磷酸盐缓冲液，与染料混匀，染色10 min左右。4、用接近中性的水冲去染液，待自然干燥或用滤纸吸干后，用油镜观察。5、染色结果 在正常情况下，血膜外观为淡紫红色。在显微镜下红细胞染粉红色，在厚薄均匀处略有碟状感，白细胞胞浆中的颗粒能显示各种细胞的特有色彩，细胞核染天青紫红色，染色质清楚，粗细松紧可辨。一、外周血中白细胞形态检查 1、正常白细胞形态 中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。正常白细胞可自然退化变性，正常的血涂片上也可以见到变形或破裂的细胞，数量极少 2、异常白细胞形态（中性粒细胞和淋巴细胞）（1）中性粒细胞 1）中性粒细胞的毒性变化 大小不均；中毒颗粒；空泡变性；Dohle小体；退行性变，2）棒状小体；3）中性粒细胞胞核的异常形态；常见多分叶核中性粒细胞 4）其他异常形态粒细胞，多于遗传性疾病有关 注意：中毒颗粒、嗜碱性粒细胞、染色偏碱的中性颗粒的鉴别 （2）淋巴细胞 1）异形淋巴细胞 在传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、病毒性肝炎、流行性出血热等病毒性感染时或过敏原刺激下，可使淋巴细胞增生，并出现某些形态学变化，称为异型淋巴细胞。正常人外周血中偶见不超过2%，传染性单核细胞增多症、流行性出血热时，可高达10%。形态特征分为3型:I型(空泡型)：最多见。胞体比正常淋巴细胞稍大，多为圆形、椭圆形或不规则形。核圆形、肾形或分叶状，常偏位。染色质粗糙，呈粗网状或小块状，排列不规则。胞质丰富，染深蓝色，含空泡或呈泡沫状 型(不规则型)：胞体较大，外形常不规则，可有多数伪足。核形状圆形或不规则，染色质较粗糙致密。胞质丰富，染淡蓝或灰蓝色，有透明感，边缘处着色较深，一般无空泡，可有少数嗜天青颗粒。型(幼稚型)：胞体较大，核圆形或卵圆形。染色质细致呈网状排列，可见12个核仁。胞质深蓝色，可有少数空泡。2）放射线损伤后淋巴细胞形态变化 3）淋巴细胞性白血病时形态学变化（3）浆细胞：见于多发性骨髓瘤细胞、反应性浆细胞增多症、疟疾、黑热病、伤寒等。莫氏细胞；火焰状浆细胞；拉塞尔小体 二、外周血中红细胞形态检查 各种病因作用于红细胞生理进程的不同阶段，引起红细胞相应的病理变化，导致红细胞产生特殊的形态改变，与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略推断贫血原因，对贫血的诊断和鉴别诊断有重要的临床价值。1、正常红细胞形态：69 m 2、异常红细胞形态（1）红细胞大小不一 1）小红细胞：直径6 m 2）大红细胞：直径10 m 3）巨红细胞：直径15 m 4）红细胞大小不均：同一患者的红细胞之间直径相差一倍以上。大红细胞直径可达12 m，小红细胞直径仅2.5 m。见于巨幼红细胞性贫血，严重的增生性贫血等 （2）红细胞形态异常 1）球形红细胞：遗传性球形红细胞增多症 2）靶形细胞：缺铁贫，其他溶血性贫血等 3）椭圆形红细胞：杆状，长度大于宽度34倍，遗传性椭圆形红细胞增多症，缺铁贫，巨幼贫等 4）镰形细胞：镰形红细胞性贫血 5）口形细胞：遗传性口形细胞增多症，溶贫等 6）棘状红细胞：酒精性肝病，脾切除 7）新月形红细胞：红细胞残缺不全，体积大。见于溶血性贫血 8）红细胞缗钱状形成：多发性骨髓瘤，原发性巨球蛋白血症等 9）泪滴形红细胞：贫血、骨髓纤维化 10）裂红细胞：红细胞碎片，DIC、严重烧伤 11）红细胞形态不整：某些感染或严重贫血。如巨幼红细胞性贫血 12）有核红细胞：病理情况有溶血性贫血；造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤；慢性骨髓增生性疾病；脾切除后 （3）红细胞染色反应异常 1）正常色素性：急性失血、再生障碍性贫血、白血病。2）低色素性：见于缺铁贫，珠蛋白生成障碍性贫血等 3）高色素性：见于巨幼贫，球形红细胞 4）嗜多色性：红细胞呈淡灰蓝或紫灰色，正常人外周血中约占1%，其增多反应骨髓造血功能活跃，红细胞系增生旺盛。见于增生性贫血，尤见于溶血性贫血、急性失血性贫血 5）细胞着色不一：双形性贫血，多见于铁粒幼红细胞性贫血 （4）红细胞内出现异常结构 1）嗜碱性点彩红细胞：变性的核糖体凝集而成，多见于铅中毒 2）染色质小体：一个或多个紫红色圆形小体，是核的残余物质，多见于溶血性贫血、巨幼红细胞性贫血、脾切除术后 3）卡-波环：淡紫红色线状体呈环形或8字形，提示溶血性贫血、巨幼红细胞性贫血、脾切除术后、白血病 4）寄生虫：疟原虫、微丝蚴等 三、外周血血小板形态检查（一）正常血小板形态 两面微凸圆盘状无核细胞，直径23 m，约为红细胞的1/3 1/2。年轻的血小板体积大，成熟的体积小。（二）异常血小板形态 1、大小异常 （1）大血小板：直径47 m，巨型血小板7 m，大小不均和大血小板增多是血小板生成活跃的证据。主要见于特发性血小板减少症、粒细胞白血病、血小板无力症、MDS和脾切除后等。（2）小血小板：直径1.5 m，骨髓受抑制，如再障、缺铁性贫血时，血小板常偏小。2、形态异常 影响因素多，不规则血小板和畸形血小板比值10%，才有临床意义。3、聚集性和分布异常 间接反应血小板功能 外周血细胞形态学检查在临床的应用是非常广泛的，当造血系统出现各种疾病，造血功能出现紊乱时，外周血细胞形态学的质和量均会出现变化，产生幼稚细胞、有核红细胞、细胞内部出现异常结构等，因此外周血细胞形态学检查可提供许多疾病的诊断和治疗效果，预后状况，从中发现许多线索或证据，对于常见的贫血、白血病、不明原因的出血、感染等疾病得到及时明确的诊断和治疗有极其重要的应用价值。