2023年组织病理学实验室的标准化.docx

组织病理学实验室的标准化 切片质量的好坏，直接影响对疾病的认识和判断，关系到对疾病的诊断和治疗。因此，做好每一份切片并保持优良的质量水平，具有重要的意义。为到达这一目的，应做好思想教育、业务培训和技术操作及质量控制标准化三方面工作，三者相互关联为一整体，不可偏废。由于涉及问题较多，以下仅就技术操作及质量控制标准化，促进质量提高方面进行简要介绍。 标准化是组织病理学实验室建设和开展的目标和方向之一。只有逐步到达并实现标准化才能满足现代化的需要，迎合时代的开展，更好地与国际接轨。技术操作及质量控制标准化，包括自接受标本到制成切片，以及以后的资料整理归档全过程的技术操作及质量控制工作，标准化是贯穿始终的一个主题。通过这一活动，可以及时解决切片质量存在的问题，提出改进措施，促进质量提高。如何开展标准化工作，应分以下几步进行。 一、技术操作及质量控制标准化 （一）制片前 制片前过程从标本送到实验室至包埋结束为止。包括。 1.标本的交接编号记录及检查 （1）实验室人员收检标本时人必须认真执行查对制度，包括：送检标本种类和数量与送检单上填写的是否一致；容器上的联号或姓名与送检单上是否符合；固定液的种类（通常要求为2023％中性缓冲甲醛液）和量是否符合要求；送检单是否按规定用墨水笔逐项填写清楚。假设发现有错误、疑问或不符合要求时，应立即查询清楚和适当处理，在合格前方可签名接收。如标本已干涸、腐败或其它明显不符那么不应接收。接收标本应在初级人员接收后，再由中级人员和主检或具体负责人员复核，以确保没有过失发生。 （2）收到标本后应按标本顺序逐一在申请单上编上病理检查号，并在标本容器外壁贴上相应的号码，然后按号码先后顺序排列放好，再在申请单上打上收到日期。将收检的标本，按申请单逐一向负责处理的医师交代清楚，包括标本种类、数量、临床诊断及有无特殊本卷须知等。 （3）取检过程中，实验室人员应认真记录填写好工作单，包括标本号、块（包）数、有无特殊处理、标本名称，如标本全取、标本过小等均应记录在案以备日后查对。对一些易碎、小而少的标本应用尼龙丝小袋或擦镜纸包裹好后再做上机处理，以防丧失。标本的取材块通常控制在2cm×2cm×0.3cm左右。标本取检多于一个包埋块者，在标本病理检查号后缀写-1或-2等，以便于查找校对。取好的标本应及时浸泡在指定的固定液中，来不及取完的标本特别是大标本应缝上号码投入固定池内以备次日再取。标本取检完后，自报揭发出之日起，通常规定小标本保存1月以上，大标本保存6月以上。 （4）标本在上机处理之前，必须由初级和中级实验技术人员共同检查标本总数与申请单和工作单是否一致，确定无疑前方可上机处理。 2.标本的处理 利用全自动密闭式组织处理机处理。 （1）固定程序二道，固定液为2023％中性缓冲甲醛液，时间为45min，设置加温50℃，加压，搅拌。 （2）脱水程序八道，前四道为95％乙醇，后四道为20230％乙醇，时间均为60min，仅在最后一道的95％和20230％乙醇设置加压、搅拌。 （3）透明程序二道，第一道为硬脂酸和石蜡，比例为3：2，第二道为硬脂酸和石蜡，比例为2：3，时间均为60min，均设置加温65℃，加压，搅拌。 （4）浸蜡程序二道，均为56℃～58℃纯蜡，时间均为60min，设置加温65℃，加压，搅拌。 所有试剂由专人负责定时检测定期更换，并做好详细记录。 3.标本的包埋 利用自动包埋中心处理。 首先清点检查标本，确认完好无缺前方可开始包埋操作，操作时应注意核对标本与工作单记录是否吻合。包埋的石蜡温度应尽量与标本浸蜡温度一致，大约控制在65℃～70℃之间，温度太低会造成包埋平面凹凸不平，尤其是内镜活检等小块标本，易出现切片不完整而发生漏诊现象。 包埋时，先取大小适宜的不锈钢模型，注入蜡液置于热台上，液面刚好与模型的上缘平齐，不得低于或高于此限。取出包埋盒内的组织，校对正确后用干净的热镊子将所有组织悉数放入模型的底部，待组织与模型内的蜡液充分融合后，按要求排列后迅速移动模型至冷台，至底部石蜡刚开始凝固，用镊子轻压组织数秒，待组织埋平后，迅速盖上包埋盒注上蜡液，约过2023sec～15sec，包埋盒与模型周边的蜡液凝固后，再次补充注入少许蜡液，以增加包埋盒的稳固性，注意液面高度不得高于包埋盒上缘，加盖包埋盒时一定要保持与模型底部平面平行，无前后左右倾斜的现象。待蜡块在冷冻台彻底冷却后，从模型内取出修去包埋盒周边多余的石蜡。清点包埋好的蜡块总数，按大小类别放好，冷冻备切。 （二）制片中 制片中过程从预备切片开始到封固切片为止。 1.每天切片之前 应先检查切片机的角度并将其调整固定，即刀座的角度约在2023°，夹具的上下二边与刀刃平行，左右二边与刀刃垂直。预备切片和正式切片过程中所有角度均保持一致不得随意变动。 2.预备切片应用轮转式切片机（附二档进样装置）装上旧的一次性刀片操作，将蜡块外表多余的石蜡及不平整的组织修去，至组织尽量暴露最大面，用毛刷刷净，重新冷冻以备正式切片。遇有钙化或硬化组织可用5n盐酸对蜡块外表进行软化处理。 3.正式切片 用毛刷将切片机清扫干净，换上新的一次性刀片准备切片。切片厚度通常规定为4μm，切片的完整性平整性要求组织完整，厚薄均匀，平整无皱，无刀痕。选取平整光滑无污染的切片置入水面，用纱布将载玻片擦拭干净，捞取切片时使切片与载玻片沿长轴方向平行。漂片仪的温水须每日更换，保持清洁，温度范围在45℃～49℃之间。在载玻片上写上正确的号码后迅速放入烘片箱内，烘片箱温度设置为80℃～90℃左右。通常烘烤15min～30min即可染色。 4.切片染色 所有用于染色的液体每天过滤，定时更换。每天正式染色之前最好用对照组织试染，检查液体是否正常有效，如苏木素染液有无结晶和沉渣，伊红染液色彩是否保持鲜艳等。染色结果要求核桨分化清晰，比照适度，防止现出现切片过蓝和过红。推荐使用gill苏木素染液代替传统的harris苏木素染液。其优点是配制简便快捷，不易产生大量的结晶和沉渣，染色结果鲜艳，尤其是一些在harris苏木素染液中不易显示的黏液物质，在gill苏木素染液中却能被染成漂亮的湖蓝色。伊红的配制选用酸化加醇化的方法，色彩艳丽，着色力强。根据局部地区气候潮湿的特点，在脱水的无水乙醇与透明的二甲苯之间，增加一道苯酚（即石碳酸）二甲苯混合液，比例为1：4，利用苯酚吸去组织脱水缺乏的水份，以保证切片下步透明的质量。 5.封固切片 结束染色的切片用中性树胶封固。操作时用滤纸轻轻吸去组织周围的液体，保持组织切片的轻度湿润，滴少许树胶，用镊子取盖玻片轻轻盖上。注意封片时不能让组织切片干涸，否那么会出现人为色素即“中性树胶色素〞。封片动作要轻，以防产生气泡或溢胶。树胶浓度要适当，预先可用二甲苯调试好备用。太稠不宜操作，太稀易出现气泡或溢胶。 （三）制片后 制片后过程由封固切片结束到上交切片为止。 1.封固好的切片，由初级实验技术人员按号码顺序排放在切片夹内，与相应的蜡块进行校对，检查切片与蜡块的号码是否一致，有无错号。检查切片与蜡块中组织的形状是否一致，是否切全。仔细粘贴标签后交上级人员复查。 2.上级人员根据申请单或工作单上的记录全面仔细检查切片，评分内容、标准及其分值如下。 外观（5分）。清洁，无溢胶。载玻片及盖玻片完整。 标签（5分）：清洁，号码清晰，粘贴牢固，贴在指定位置。裱片（5分）：组织裱贴在适当位置上，方向适宜。厚薄（5分）：切片厚薄均匀一致。平整（7分）：切片平整无皱折。 切痕（8分）。切片完整，无破裂或划痕。 透明（2023分）：切片透明，无云雾状，组织固定脱水彻底。颜色（18分）：核浆着色正，比照度清晰明显。 层次、气泡（5分）：染色有层次，深浅清楚，无气泡。细胞形态（12分）：无挤压、皱缩及膨胀变形。污染（15分）：无异物或其它组织混入切片。洁净度（5分）：玻片内无残留染料。 如有上述不合格工程，按评分表格标准扣分，总分为20230分，90分以上为甲级片，90分～80分为乙级片，80分以下为丙级片。 3.切片检查完毕后登记交接给负责诊断的医师。 二、常见组织切片的缺陷及消除方法 1.颤痕即组织切片在与刀刃平行的方向上产生有规那么的波纹状痕迹，其原因可能是刀和包埋块高频率的颤抖所致。如果改变刀角度或切速那么可消除。假设局部出现颤痕，那么可能因组织结构不均匀或包埋块硬度不一致所造成，调整切面部位或改变石蜡硬度，那么可消除。 2.空洞空洞的形成一般是由于标本内有硬组织或钙化，使包埋剂（石蜡）不能充分渗透到这一区域；或组织内含有小气泡、脂类成分较多、浸透不良等都可导致空洞形成。消除方法为改变包埋石蜡的融点使其与组织硬度一致或将组织内硬化局部修掉。 3.皱折产生皱折的原因可能切速过高、包埋块太软或刀片太钝等因素造成。可采用改变切速、调整包埋剂融点或更换新刀片等方法消除。 4.刀痕多由组织内有硬化物或刀片有缺口所致。应更新刀片或修掉硬化组织。 5.切片厚薄不均原因是刀钝或包埋块浸透不好。应更换新刀片或重新包埋。 6.跳片由于刀片不锋利、组织较硬、包埋块或刀座夹末夹紧等所致。更新刀片，拧紧包埋块夹具或刀座夹可解决此问题。 7.切片不能形成连续的切片带其主要原因是切片边缘不整齐，使切片在水中盘旋所致。可重新修整包埋块致规那么形状。 关于组织切片中的可能遇到的问题及其对策还可参考第二篇中的相关章节。 三、促进标准化的质控调查法 切片的缺陷表现多种多样，但影响质量的原因归纳起来，不外乎人员、材料（试剂、染料等）、仪器、方法、环境条件等五类。通过标准化的过程，不断地有的放矢地调整这五类因素，使其适合于实际，技术质量定将得以提高并稳定在一定水平。 促进标准化的质控调查法有以下三类。 1.回忆性调查 主要是对过去一段时间（如一年、一个季度、一个月等）切片质量进行调查，从而对该段时间的工作情况进行分析，以指导下一段时间的工作。这种调查样本较大，概括性强，易于找出影响切片质量的主要因素，指导下阶段的工作。 2.日常性调查 主要是每天调查当日的切片质量，随时掌握情况，及时提出改进措施。在进行调查时，当天工作情况就在眼前，分析问题寻找原因较为切实，如何做好次日工作心中有数，对提高质量甚为有效。实际工作中应将这种调查制度化，在每天制片完成后坚持进行。 3.专题调查 这是针对某一问题而进行的调查，对象较单一，调查内容较集中。例如对某种组织的切片进行质量调查；对某种方法处理的组织切片的质量调查；对某个人员所作切片进行调查等；视具体需要而进行。例如某技术人员开始单独进行工作，对他初期工作逐项进行质量调查，并针对性的进行指导，促使其工作稳步进行，质量不断提高。 第二篇：口腔组织病理学口腔组织病理学＆ 名解： 1，、唇裂：是球状突和上颌突未联合或局部联合所致 2、口凹：在额鼻窦，上颌窦和下颌窦的中央，形成以个凹陷，称为口凹 3、面裂。上颌突与下颌突未联合或局部联合将发生横面裂，上颌突与侧鼻突未联合将形成斜面裂。 4、牙胚。牙板向深层得结缔组织内伸延，在其最末端细胞增生，进一步发育成牙胚。（牙胚的分化○蕾状期 ○帽状期 ○钟