血液细胞分离仪幻灯片.ppt

血液细胞分离仪 行政院卫生署丰原医院检验科 报告者：苏俞绫 报告日期：2004年 8 月 12 日 受训单位：台北荣总内科部输血医学科血液分离室 指导者：易曼芬学姐、刘绿霜学姐、林炯熙大夫 受训日期：2004年6月1日7月31日 血液细胞分离仪-机型 COBE Spectra 6.1 PBSC（Peripheral Blood Stem Cell）COBE Spectra 7.0 LRS（Leukocyte-Reduced Apheresis Platelet）COBE 2991 B.M Fenwal CS-3000 Plus Fenwal CS-3000 Plus COBE SPECTRA 6.1，7.0 COBE 2991 血液细胞分离仪-kit、圆盘 Kit-WBC TPE ELP LRS RBC 圆盘-大圈圈（WBC、TPE）小圈圈（ELP、PBSC）小漏斗（LRS）血液细胞分离仪-项目 WBC：1.MNC-DLI（Donor Lymphocyte Infusion）2.PMN-Therapeutic Leukocytopheresis（pt）Granulocytapheresis（donor）3.AutoPBSC-Peripheral Blood Stem Cell 4.BMP-Bone Marrow ProcessingCOBE 2991机型 TPE：Therapetic Plasma Exchange ELP：Therapetic Thrombocytapheresis（pt）Extended Life Platelet（donor）LRS：Leukocyte-Reduced Apheresis Platelet RBC：Therapetic Phlebotomy目前不用，以放血方式治疗 PMN（Polymorphonuclear Cell；多形核细胞）MNC（Mononuclear Cell；单核细胞）血液细胞分离仪-事前准备 Pt/donor同意书 医师声明书 Pt/donor声明书 会诊单 抽血检验项目 血液常规检查（Blood Routine）、ABO血型、Rh血型、不规则抗体筛检、肝功能（ALT）、梅毒血清反应（VDRL）、C型肝炎病毒抗体（anti-HCV）、B型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、爱滋病毒抗体（HIV-I、HIV-II）、人类嗜T淋巴球病毒抗体（HTLV-I、HTLV-II）、游离钙（Free Ca）。执行收集的前几日，口服钙片、喝温牛奶以预防低血钙反应。按时前往，务必进食，但勿吃太油腻的食物（如炸排骨、炸鸡腿，包括豆浆）。禁烟、尼古丁、咖啡（因会增加血管收缩）。血液细胞分离仪-原理 藉由各种血液成分比重不同的不同及利用不同的离心速度将血液分离，并利用光学透视原理测细胞之密度，即由献血人身上收集所需之血液成分或由病人身上收集或移除所需的血液成分，而将其余的血液成分经由血液分离机持续性的运转回输给病人或献血者。血液细胞分离仪-应用 执行各项稀有血液成分收集，提供临床病人输血需求可协助临床急症病人异常血液成分移除、减轻及避免立即性的生命威胁。血液细胞分离仪-符合条件 WBC 3000 l HB 9.0 mg/dl Plt 30,000 l 血液细胞分离仪-勿错 1.Kit 2.圆盘 3.步骤 血液细胞分离-步骤 装圆盘 装Kit 装saline、ACD（Anticoagulant Citrate Dextrose；抗凝剂）机器priming 排除空气 Pt/donor携带病历报到 Pt/donor躺于病床或献血椅并盖好被子 量血压、量体温 机器priming ok 扎针两手臂（血管粗access、return）或一中央静脉管（access）一手臂（return）确定扎针 ok 机器RUN 设置预设值 随时注意access端之血量 达到预设值 量血压 移除access端 机器Rineback 将其余血液成分回输体内 移除return端 卸除kit 处理collect products Kit WBC TPE ELP LRS 项目 DLI（Donor Lymphocyte Infusion）Therapeutic Leukocytopheresis（pt）Granulocytapheresis（donor）PBSC（Peripheral Blood Stem Cell）Therapetic Plasma Exchange Therapetic Thrombocytapheresis（pt）Extended Life Platelet（donor）Leukocyte-Reduced Apheresis Platelet 步骤 MNC PMN Deplete PMN Collet AutoPBSC TPE ELPD Deplete ELPC Collet LRS End point 5000 ml 约4000ml 约4000ml 10000 ml Collet/replac volume 130 ml 700 ml 250 ml 50 ml 或 依机器 TBV 11.5倍 700 ml 300 ml 300 ml Plasma volume 0 ml 60 ml TBV 11.5倍 Time 约2 hrs 23 hrs 34 hrs 4 hrs 34 hrs 23 hrs 约2 hrs 约2 hrs Intel flow（ml/min）4555 4555 4555 4555 4555 4555 4555 4555 Intel:AC Ratio 13.0 10.011.0 10.011.0 13.013.5 13.013.5 10.011.0 11.012.0 11.012.0 血液细胞分离仪-预设值 血液细胞分离仪-产物检验项目 Kit WBC TPE ELP LRS 项目项目 DLI（Donor Lymphocyte Infusion）Therapeutic Leukocytopheresis（pt）Granulocytapheresis（donor）PBSC（Peripheral Blood Stem Cell）Therapetic Plasma Exchange Therapetic Thrombocytapheresis（pt）Extended Life Platelet（donor）Leukocyte-Reduced Apheresis Platelet Pre WBC WBC WBC WBC Platelet Platelet Platelet Post WBC WBC WBC WBC Platelet Platelet Platelet collect products Lym-Surface maker WBC CBC+DC CD34+CFU-C Blood culture Platelet Platelet Platelet WBC 1106 l PRBC Priming 对象 小小孩 预防因收集后导致Hb 于RUN前用相同血型之2 PRBC先行Priming 使kit中充满RBC，使小小孩减少RBC loss Kit中大约130 ml的血量残留，会造成收集（移除）后Hb不变或降低 血液细胞分离-过程可能之反应 血管损伤 血肿 血压降低 血量减少 过敏 溶血 空气栓塞 呼吸窘迫 淋巴球及血小板减少 蛋白质及免疫球蛋白减少 凝血因子减少 最常见的为因抗凝剂（ACD）造成而有低血钙的症状（如肢端、脸部麻感、肌肉震颤感、胸闷、心律不齐、休克）需告知医师并立即处理 发生低血钙时，怎么办？喝温牛奶 Calcium Gluconate（葡萄糖钙）1.对水喝 1Amp（10ml）：10ml water 2.第三条静脉注射 1Amp+90ml saline 以50ml/1hr滴速 3.正压pump 1Amp以5ml/1hr滴速 PBSC 理想 collect products 通常收集23次 达到 MNC 4 8 108/kg CD34+2.0 106/kg MNC：Mononuclear Cell CD34+：CD34阳性细胞 为Stem Cell之maker collect bag中 MNC=Total WBC量 Total collect量 DC Pt体重 （扣除seg及band）CD34+以Flow cytometry检测 不可照光（照光-杀死Lymphocyte）PBSC冷冻 自体移植 异体移植Pt与donor时间无法配合时 仪器：Planer kyro 560-16微电脑控制可程序冷冻仪 MVEXLC 1200自动充填液态氮存贮系统 PBSC冷冻 1.配制成10DMSO：Stem Cell+Plasma+10ml DMSO（细胞冷冻保护剂）Stem Cell+Plasma=90 ml Plasma加入DMSO前及加入Stem cell前均必须预冷（0）无菌操作 PBSC冷冻 2.置入Planer kyro 560-16微电脑控制可程序冷冻仪 开始+4 慢慢以 -1.0/min to-8 -25.0/min to-50 +8.0/min to-20 -1.0/min to-60.0 -5.0/min to-120.0 3.再置入 MVEXLC 1200自动充填液态氮存贮系统存贮 可程序冷冻仪 自动充填液态氮存贮 PBSC解冻、回输 37 水浴 用15滴的IV set（静脉输注器）慢慢回输5分钟 后再快速输完一袋 10分钟输完一袋 快速输完，避免细胞解冻后DMSO因高温放出毒性毒杀细胞 DMSO（细胞冷冻保护剂）DMSO与Plasma（protein）混合会放热而使Plasma变性，故Plasma在与DMSO混合前后均置于0冰水中降温，以防混合后的放热造成Plasma变性，因DMSO在0温度以上会对细胞产生毒性，因而毒杀细胞。GVHD（graft-vs-host disease；移植物抗宿主疾病）CD4+、CD8+Tcell引发 在移植后23周发生 急性：移植后830天 -皮肤（红疹及脱屑）、胆道（黄疸）、胃肠（严重腹泻）慢性：移植后100200天 -皮肤、肝、眼、口腔黏膜、其它器官 GVHD（graft-vs-host disease；移植物抗宿主疾病）最后终因感染或肝、肾功能衰竭或DIC (Disseminated Intravascular Coagulation，散播性血管内凝固症)而死亡，死亡率高达7590 。预防方法移植前后给予免疫抑制剂cyclosporine，若仍发生GVHD则给予高剂量类固醇治疗。若移植后一直没有GVHD反应给DLI（Donor Lymphocyte Infusion）产生轻微GVHD癌症细胞才不易复发。感想 受训之感想 察言观色 主动 多问 谢谢聆听！