血细胞计数板的使用.ppt

江苏省句容市第三中学江苏省句容市第三中学 徐徐 霞霞 血细胞计数板的结构血细胞计数板的结构 1 5 血细胞计数板的使用血细胞计数板的使用 2 血细胞计数板的计算血细胞计数板的计算 3 中间平台分为两半，中间平台分为两半，各刻有一个各刻有一个方格网方格网。方格网内有九个大方方格网内有九个大方格，中间的一个大方格就格，中间的一个大方格就是是计数室计数室。计数室的边长一般为计数室的边长一般为1mm,1mm,计数室的高度为计数室的高度为0.1mm0.1mm，因此计数室的，因此计数室的容积为容积为0.1mm0.1mm3 3。一、血细胞计数板的结构一、血细胞计数板的结构 方格网方格网 计数室计数室 25x16 16x25 计数室的规格计数室的规格 中格中格 中格中格 小格小格 小格小格（400小格）小格）（400小格）小格）1 1镜检计数室镜检计数室 在加样前，先对计数在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。板的计数室进行镜检。若若有污物，则需有污物，则需 ，吹干后才能进行计数。吹干后才能进行计数。二、血细胞计数板的使用步骤二、血细胞计数板的使用步骤 2 2加样品加样品 先将先将 放在计数室上放在计数室上,用吸管吸取培养液用吸管吸取培养液,滴于盖玻滴于盖玻片片 ,让培养液让培养液 。多余培养液用多余培养液用 吸去。吸去。3 3计数计数 稍待片刻，待酵母稍待片刻，待酵母菌菌 ，将计数板放在载物台的将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找中央，先在低倍镜下找到到 ，再换高倍，再换高倍镜观察、计数并记录。镜观察、计数并记录。盖玻片盖玻片 边缘边缘 自行渗入自行渗入 滤纸滤纸 全部沉降到计数室底部后全部沉降到计数室底部后 计数室计数室 清洗清洗 1 1、计数时要求每小格内约有、计数时要求每小格内约有 个菌个菌体为宜。因此培养后期需要对菌液进体为宜。因此培养后期需要对菌液进行行 。2 2、若选用、若选用25251616规格的计数板则选规格的计数板则选 个个中方格（共中方格（共 小格）计数，若选用小格）计数，若选用16162525规格的计数板则选规格的计数板则选 个中方格个中方格（共（共 小格）计数。小格）计数。4 45 5 稀释稀释 5 5 4 4 1 1 2 2 3 3 4 4 5 5 1 1 4 4 3 3 2 2 100100 8080 注意事项注意事项 3 3、位于小方格边界线上的菌体一、位于小方格边界线上的菌体一般只数般只数 线上的。线上的。如遇酵母出芽，芽体大小达到母细如遇酵母出芽，芽体大小达到母细胞的一半时，即作胞的一半时，即作 个菌体计数。个菌体计数。5 5、血细胞计数板洗涤方法：、血细胞计数板洗涤方法：，不能用试管刷。不能用试管刷。4 4、在显微镜下观察到的菌体、在显微镜下观察到的菌体有有活菌也有死菌活菌也有死菌。因此要想统计活菌数，必须对菌体因此要想统计活菌数，必须对菌体 (如台盼如台盼蓝）。蓝）。注意事项注意事项 上方和左边上方和左边 两两 未被染色的为活菌！未被染色的为活菌！染色染色 先浸泡后冲洗先浸泡后冲洗 通过通过1个小方格中酵个小方格中酵母菌的数目去推算母菌的数目去推算 三、利用血细胞计数板进行计算三、利用血细胞计数板进行计算 X 稀释倍数稀释倍数 1个小方格中酵母菌个小方格中酵母菌 的平均数的平均数 1个小方格的体积个小方格的体积 N N 1ml=如何计算如何计算1ml1ml培养液中培养液中酵母菌的数目（酵母菌的数目（N N）？4个中方格（个中方格（100小格）中酵母菌数目小格）中酵母菌数目 100 16x25规格：规格：4个中方格（个中方格（80小格）中酵母菌数目小格）中酵母菌数目 80 25x16规格：规格：0.1x1/400m m3 1ml=1cm3=103mm3 0.1x1/400 x10-3 3 ml 1 2 5 3 4 1 2 3 4