血清CK-MB活性假性增高原因分析.ppt

血清血清CKCK-MBMB活性假性活性假性增高原因分析增高原因分析 1 CK-MB活性假性增高现象活性假性增高现象 2 肌酸激酶肌酸激酶(CK)同工酶的组成同工酶的组成 3 肌酸激酶肌酸激酶MB同工酶检测原理同工酶检测原理 4 CK-MB测定的干扰因素测定的干扰因素 5 注意事项注意事项 CK-MB活力假性增高现象活力假性增高现象 联合测定联合测定CK、CKCK-MBMB对心肌梗死有极大对心肌梗死有极大的临床意义。当心梗时，的临床意义。当心梗时，CKCK-MBMB一般占总一般占总CKCK的的5%5%，最高值可达，最高值可达121238%38%。有些临床标本。有些临床标本CKCK-MBMB占占CKCK总活力总活力38%38%以上，或者以上，或者CKCK结果在正结果在正常范围内，而常范围内，而CKCK-MBMB结果却明显偏高，甚至结果却明显偏高，甚至出现出现CKCK-MBMB结果高于结果高于CKCK。此为明显的假阳性。此为明显的假阳性结果。结果。非心肌梗死病例非心肌梗死病例CKCK、CKCK-MBMB活性及活性及CKCK-MBMB 占总占总CKCK活性不同百分值例数活性不同百分值例数 肌酸激酶肌酸激酶(CK)(CK)同工酶的组成同工酶的组成 CKCK是由是由M M和和B B两种亚单位组成的二聚体两种亚单位组成的二聚体,在细胞质内在细胞质内共有三种同工酶：共有三种同工酶：CKCK-MM,CKMM,CK-MBMB和和CKCK-BBBB。巨巨CK1CK1:CK:CK同工酶（抗原）与自身抗体的复合物，同工酶（抗原）与自身抗体的复合物，最多的是最多的是CKCK-BBBB与与IgGIgG或或IgAIgA的复合物，也有少数为的复合物，也有少数为CKCK-MMMM与与IgGIgG或或IgAIgA的复合物。的复合物。巨巨CK2CK2:在细胞线粒体内还有另一种同工酶，称为在细胞线粒体内还有另一种同工酶，称为CKCK-MtMt。存在于线粒体膜上，当线粒体崩解时，线。存在于线粒体膜上，当线粒体崩解时，线粒体的小碎片进入血液，故粒体的小碎片进入血液，故CKCK-MtMt成低聚状态。成低聚状态。CKCK同工酶在人体组织的分布同工酶在人体组织的分布 组组 织织 CK U/克湿重克湿重 CK-MM%CK-MB%CK-BB%骨胳肌骨胳肌(腓肠肌腓肠肌)3280 99 1 0 骨胳肌骨胳肌(肋间肌肋间肌)1894 99 1 1 心肌心肌(乳头状肌乳头状肌)620 87 13 0 心肌心肌(右心房右心房)402 7688 22 02 脑脑 200 0 0 100 回肠回肠 161 3 1 96 结肠结肠 137 34 1 96 胃胃 122 24 14 9495 CK-MB检测原理检测原理 目前常用的检测目前常用的检测CKCK-MBMB的方法是的方法是免疫抑制法免疫抑制法。利用人血清中利用人血清中CKCK-BBBB含量很少的特点，采用抗含量很少的特点，采用抗CKCK-M M单体的抗体将单体的抗体将M M亚基完全抑制，然后通过一系列反亚基完全抑制，然后通过一系列反应来检测应来检测CKCK-B B的活性，再将的活性，再将CKCK-B B的活性结果乘的活性结果乘2 2即即得得CKCK-MBMB的活性。即的活性。即CKCK-MB=2CKMB=2CK-B B。CKCK-MBMB测定的干扰因素测定的干扰因素 1 1、试剂因素：试剂污染或使用已过有效期的试剂、试剂因素：试剂污染或使用已过有效期的试剂 2 2、仪器因素：未使用、仪器因素：未使用CKCK-MBMB的校准品或质控品的校准品或质控品 3 3、方法学因素：、方法学因素：巨巨CKCK1 1 巨巨CKCK2 2 CKCK-BBBB 4 4、溶血溶血因素：腺苷酸激酶（因素：腺苷酸激酶（AKAK）5 5、恶性肿瘤恶性肿瘤 6 6、其他因素：如儿童、随机误差、其他因素：如儿童、随机误差等等 巨巨CKCK1 1、巨、巨CKCK2 2对对CKCK-MBMB检测的影响检测的影响 巨巨CKCK1 1是巨分子酶，比正常情况下相应的酶有是巨分子酶，比正常情况下相应的酶有着高分子团，不被抗着高分子团，不被抗CKCK-M M抗血清所抑制。抗血清所抑制。巨巨CKCK2 2是一种不正常低聚的线粒体是一种不正常低聚的线粒体CKCK，巨，巨CKCK2 2抗抗原性与原性与CKCK-M M不同，不同，抗抗M M亚基抗体不能抑制巨亚基抗体不能抑制巨CKCK2 2 。计算时结果乘以计算时结果乘以2 2，更加扩大了误差。表现为，更加扩大了误差。表现为血清中血清中CKCK-MBMB占占CKCK总活力总活力5O%5O%以上以上，而，而CKCK活力正活力正常或仅为轻度或中度增高常或仅为轻度或中度增高 。部分脑部疾患、前列腺等组织肿瘤部分脑部疾患、前列腺等组织肿瘤，组织中，组织中CKCK-BBBB释放进入外周血，测定释放进入外周血，测定CKCK-MBMB的活性会偏高。的活性会偏高。测定的测定的CKCK-MBMB活性活性CKCK-MBMB2CK2CK-BBBB CKCK-BBBB对对CKCK-MBMB检测的影响检测的影响 红细胞内含有大量的腺苷酸激酶（AK）从而催化ADP反应生成ATP而引起NADPH的吸光度的改变，使CK和CK-MB测定结果假性偏高。由于CK-MB是CK-B2，假性偏高较CK更明显。可能出现CK-MB明显偏高，而CK正常的情况。溶血对溶血对CKCK-MBMB检测的影响检测的影响 部分恶性肿瘤病人免疫系统紊乱，由于癌细胞刺激产生的免疫球蛋白可做为底物或辅酶与试剂发生反应，其反应的方向速度及曲线与CK-MB的反应大至相同，导致 CK-MB的测定值大于CK的测定值。恶性肿瘤对恶性肿瘤对CKCK-MBMB检测的影响检测的影响 主要是由于儿童中枢神经发育不完全，血主要是由于儿童中枢神经发育不完全，血脑屏障不完整，脑部的脑屏障不完整，脑部的CKCK-BBBB进入外周血，进入外周血，使使CKCK-MBMB检测结果偏高。检测结果偏高。成人成人CKCK-MBMB正常范围：正常范围：0 025 U/L25 U/L 有研究表明有研究表明0 01212岁儿童正常范围：岁儿童正常范围：0 047.08 U/L47.08 U/L 儿童儿童CKCK-MBMB检测结果偏高检测结果偏高 1、注意标本是否溶血，及时检测 2、对CK正常而CK-MB活性异常的标本应结合其他方 法来确定CK同功酶的具体成分及其含量。3、结合临床。如脑组织、胃肠道及子宫平滑肌坏死可使血清中的CK-BB升高；体质较差的人群、妇女及老人等体内存在巨CK1；恶性肿瘤、肝硬变、心脏病等患者血清中可能存在巨CK2，可使CK-MB活性假性增高。注注 意意 事事 项项