血清血清α-α-淀粉酶(淀粉酶(AMSAMS或或AMYAMY)活)活性的测定性的测定Reagentforα-AmylaseTestReagentforα-AmylaseTest一、原理一、原理二、测定方法二、测定方法三、参考值三、参考值四、临床意义四、临床意义五、注意事项五、注意事项六、方法学评价六、方法学评价一、原理:一、原理:样品中样品中α-α-淀粉酶(淀粉酶(11,,4-α-D-4-α-D-葡萄糖水解酶,葡萄糖水解酶,又称淀粉内切酶,对又称淀粉内切酶,对11,,4-4-糖苷键连接的葡萄糖糖苷键连接的葡萄糖有特异性。)催化淀粉分子及糖原中的有特异性。)催化淀粉分子及糖原中的α-1α-1,,44葡萄糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有葡萄糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-α-11,,66糖苷键支链的糊精,在淀粉(已知浓度)糖苷键支链的糊精,在淀粉(已知浓度)充分的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀充分的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其颜色的深浅与未经酶促粉结合成蓝色复合物,其颜色的深浅与未经酶促反应的空白管比较,从而推算出淀粉酶的活力。反应的空白管比较,从而推算出淀粉酶的活力。注:注:11、生物界存在、生物界存在αα和和ββ两种淀粉酶,但人体两种淀粉酶,但人体内仅有内仅有α-α-淀粉酶。淀粉酶。22、淀粉酶分子量、淀粉酶分子量40000~50000,40000~50000,很易由肾很易由肾排出。排出。二、测定步骤:二、测定步骤:各管混匀,各管混匀,660nm660nm波长,以蒸馏水调零,波长,以蒸馏水调零,测定各管吸光度值。测定各管吸光度值。试剂测定(试剂测定(UU))空白(空白(BB))样品(样品(mlml))0.020.02——蒸馏水(蒸馏水(mlml)—)—0.020.02试剂试剂R1R1((mlml))1.001.001.001.00各管混匀,置各管混匀,置3737度水浴度水浴7.57.5分分钟。钟。试剂试剂R2R2((mlml))1001.0022、计算:、计算:注:淀粉浓度注:淀粉浓度0.4g/L0.4g/L样品样品AMYAMY活力(苏氏单位)活力(苏氏单位)==样品样品AMYAMY活力(苏氏单位活力(苏氏单位)=)=02.01005.71554.0BUBAAA800BUBAAA注解注解①①0.4——0.4——淀粉浓度淀粉浓度②②5.0——15.0——1单位定义消耗淀粉单位定义消耗淀粉mgmg数数③③15——115——1单位定义反应时间单位定义反应时间④④7.5——7.5——酶的实际作用时间酶的实际作用时间⑤⑤100——1100——1单位定义用血清单位定义用血清⑥⑥0.0...