血培养的意义及操作流程.ppt

血培养的意义及操作规范血培养的意义及操作规范 明确血培养的临床意义 血培养查病原菌对诊断以下疾病很重要：菌血症 感染性心内膜炎 临床不明原因感染 假体植入后感染人工关节、人工瓣膜 脉管导管相关性菌血症 化脓性关节炎 肺炎 血培养是最好的工具帮助它们合理用药、减少死亡率 INFECTION SEPSIS 感染感染 败血症败血症 SIRS 炎性反应炎性反应 BACTEREMIA 菌血症菌血症 TRAUMA 外伤外伤 PANCREATITIS 胰腺炎胰腺炎 BURNS 烧伤烧伤 OTHER 其它其它 FUNGEMIA 真菌血症真菌血症 PARASITEMIA 寄生虫血症寄生虫血症 VIREMIA 病毒血症病毒血症 OTHER 其它其它 败血症败血症(SEPSIS)全球：全球：18001800万病例万病例 美国：确诊病例美国：确诊病例130130万万 欧洲和日本：确诊病例欧洲和日本：确诊病例190190万万 每年治疗费用：每年治疗费用：167167亿美金美国亿美金美国 6767亿美金欧洲亿美金欧洲 美国美国 导致死亡病种排名第十位导致死亡病种排名第十位 每年导致大约每年导致大约4040万人死亡万人死亡 败血症在败血症在1010年间增加了年间增加了139139 非心内非心内ICUICU病区最常见的死亡病因病区最常见的死亡病因 在在130130万病例中，有万病例中，有7878万例发生在万例发生在ICUICU病区病区 1.D March 2003 report 3.Medtap International 2.Crit Care Med 2001;29:1303-10 4.Society for Critical Care Medicine(press release 2004)败血症败血症(SEPSIS)血培养是检测菌血症和真菌血症的最简单、血培养是检测菌血症和真菌血症的最简单、最准确和最常用的一种方法，是确认机体血最准确和最常用的一种方法，是确认机体血流感染的病原学基础。流感染的病原学基础。尽早做血培养检测和早期正确抗菌治疗是控尽早做血培养检测和早期正确抗菌治疗是控制败血症应首要采取的措施。制败血症应首要采取的措施。Vincent J-L,Sakr Y,Sprung CL,et al.Sepsis in European intensive care units:Results of the SOAP study.Crit Care Med 2006;34:344-355 败血症的检测败血症的检测 血培养的作用血培养的作用 证实感染性病原体证实感染性病原体 做进一步的鉴定和药敏试验做进一步的鉴定和药敏试验 指导正确的抗菌药物使用指导正确的抗菌药物使用 血培养操作规范血培养操作规范 何时需要血培养何时需要血培养 血培养标本采集的时机血培养标本采集的时机 血培养采集的量及套数血培养采集的量及套数 规范的皮肤消毒及培养瓶的准备规范的皮肤消毒及培养瓶的准备 血培养标本的储存和运输血培养标本的储存和运输 血培养报阳时间及阳性标本的处理血培养报阳时间及阳性标本的处理 CLSI血培养的原则和操作程序推荐（Approved）指南 Proposed Guideline 2006Proposed Guideline 2006年年1010月出版：月出版：M47M47-P P Approved Guideline 2007Approved Guideline 2007年年5 5月月出版出版:M47:M47-A A 2005-09-08出版：出版：BSOP 37 第第5版版 http:/www.hpa-standards.org.uk/pdf_sops.asp 参编单位：参编单位：医学微生物协会医学微生物协会,临床微生物协会临床微生物协会 苏格兰苏格兰微生物协会微生物协会,IBMS,Welsh微生物协会微生物协会 统一由卫生防护署统一由卫生防护署（Health Protection Agency）领导）领导 英国英国HPA 的血培养的研究的血培养的研究及操作程序及操作程序 血培养操作规范血培养操作规范 怀疑患者有血流感染的症状和情况有：怀疑患者有血流感染的症状和情况有：不明原因的发烧(38)或体温过低(36)严重的局部感染，如脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、腹部术后感染等 侵入性处臵，如静脉导管留臵、导尿管留臵、机械通气等 白细胞增多，粒细胞减少，血小板减少 休克，寒颤，僵直 多器官衰竭 心率异常加快 低血压或高血压 呼吸频率加快 何时需要血培养何时需要血培养 使用抗菌药物之前采血使用抗菌药物之前采血 当可疑临床症状出现后，应尽可能早地采血培养。在当可疑临床症状出现后，应尽可能早地采血培养。在应用抗菌药物之前采血培养是最理想的。如果患者已应用抗菌药物之前采血培养是最理想的。如果患者已经开始应用抗菌药物进行治疗，则应该在下一次用药经开始应用抗菌药物进行治疗，则应该在下一次用药前采血培养。前采血培养。患者寒颤发热前患者寒颤发热前1 1小时，在此期间，应同时（或间隔小时，在此期间，应同时（或间隔3030-60 min60 min）采集）采集2 2-3 3套血培养，只有在怀疑患者有感套血培养，只有在怀疑患者有感染性心内膜炎或其它血管内感染（如导管相关性感染）染性心内膜炎或其它血管内感染（如导管相关性感染）时，才有必要间隔较长时间多次采集血培养。时，才有必要间隔较长时间多次采集血培养。血培养标本采集的时机血培养标本采集的时机 血培养采集套数血培养采集套数 对于成人，通常推荐在短时间内对于成人，通常推荐在短时间内(一般为一般为1 1小时内小时内)连续采连续采血，做血，做2 2套至套至3 3套套(1(1瓶需氧瓶需氧+1+1瓶厌氧瓶厌氧/套套)血培养。血培养。对于儿童则在短时间内，在不同位臵，抽两瓶（需氧）。对于儿童则在短时间内，在不同位臵，抽两瓶（需氧）。当怀疑感染性心内膜炎或其它的血管内感染当怀疑感染性心内膜炎或其它的血管内感染(导管相关性导管相关性)菌血症和真菌血症时，则间隔采血菌血症和真菌血症时，则间隔采血(例如每隔例如每隔1 1-2 2小时采血小时采血一次一次)，2 2套至套至3 3套套(2(2瓶瓶/套套)血培养。血培养。不同临床症状时采血方法的推荐不同临床症状时采血方法的推荐 症状症状 推荐采血方法推荐采血方法 可疑的急性初期菌血症或真菌血症：脑膜炎、骨髓炎、关节炎、肺炎 从不同的解剖学位置连续地采集两对或三对血培养 不明原因的发热（例如：隐匿的脓肿，伤寒、布鲁氏杆菌病或其它诊断不明的发热综合症）从不同的解剖学位置连续采集两对或三对血培养。如果经24-48小时培养后结果是阴性，从不同的解剖学位置再次连续采集多于两对的血培养 血培养持续阴性的可疑菌血症或真菌血症 考虑当前的培养方法，是否能覆盖分枝杆菌、真菌或苛养菌的检出 Baron,EJ.,M.P.Weinstein,W.M.Dunne,Jr.,P.Yagupsky,D.F.Welch,and D.M.Wilson.Cumitech 1C,Blood Cultures IV.Coordinating ed.,E.J.Baron.ASN Press,Washington,D.C 2005 血培养采血量血培养采血量 对于成人，每瓶血培养需要对于成人，每瓶血培养需要5 5-10ml10ml血液。血液。对于儿童，每瓶需要对于儿童，每瓶需要2 2-4ml4ml血液。血液。对于婴幼儿，采血量不应超过患儿总血量的对于婴幼儿，采血量不应超过患儿总血量的1%1%。CLSICLSI要求每次采集要求每次采集2 2-3 3套标本套标本,每套应包括一个需氧培养每套应包括一个需氧培养瓶瓶,一个厌氧培养瓶一个厌氧培养瓶 成年病人不能只采成年病人不能只采1 1瓶血培养标本，采血量不足和只做瓶血培养标本，采血量不足和只做1 1套血培养所得得结果是很难正确解释的套血培养所得得结果是很难正确解释的 Cockrill2004Cockrill2004年报告年报告:163:163位病人位病人,血培养仪血培养仪 采血套数及血量 1套(20ml)2套(40ml)3套(60ml)检出率 65%80%96%血培养采集套数及血量血培养采集套数及血量 由于多数病例中，细菌和真菌均一过性存在于血液中由于多数病例中，细菌和真菌均一过性存在于血液中,单次血培养单次血培养检测的敏感性有限检测的敏感性有限 取两对以上血培养是必要的取两对以上血培养是必要的 污染通常只出现在一个血培养瓶中，对于真正的血流感染，多个污染通常只出现在一个血培养瓶中，对于真正的血流感染，多个血培养瓶都会呈阳性血培养瓶都会呈阳性 血培养组合的累积检出率,随采样次数增加而增加 Weinstein MP.,Lee A.,Mirrett S.,Barth Reller L.Detection of Bloodstream Infection in Adults:How Many Blood Cultures Are Needed?J Clin Microbiol 2007;45:3546-3548 血培养采集套数及血量血培养采集套数及血量 多对血培养的采血方式多对血培养的采血方式 从不同部位采集 采集2对到3对 Wayne,P.A.Principles and procedures for Blood Cultures;Approved Guideline,CLSI document M47-A.Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI);2007 报告时间提前 出现阳性时间：出现阳性时间：需氧瓶有需氧瓶有9%9%比厌氧瓶早比厌氧瓶早1 1天报告结果天报告结果 厌氧瓶有厌氧瓶有5%5%比需氧瓶早比需氧瓶早1 1天报告结果天报告结果 因此因此,只做需氧菌不做厌氧菌培养只做需氧菌不做厌氧菌培养,将有将有19%19%的的菌株不能发现菌株不能发现,另有另有5%5%的血培养延迟的血培养延迟1 1天报告天报告阳性结果阳性结果 血培养采集套数及血量血培养采集套数及血量 Khanna P,Collignon P.Anaerobic bottles are still important in blood culture Khanna P,Collignon P.Anaerobic bottles are still important in blood culture sets.Eur J ClinMicrobiol InfectDis,2001,20:217sets.Eur J ClinMicrobiol InfectDis,2001,20:217-219219 总结：总结：如果血培养只做需氧瓶培养，漏检的不仅如果血培养只做需氧瓶培养，漏检的不仅是严格厌氧菌是严格厌氧菌,也会影响兼性厌氧菌的分离也会影响兼性厌氧菌的分离率及报告阳性结果的时间率及报告阳性结果的时间 血培养采集套数及血量血培养采集套数及血量 在血培养过程中，标本采集是决定性的步骤。在整个操作过程中必须采取标准的严格的无菌措施。一份被正确地采集而不被污染的标本是提供准确、可靠结果的关键。血培养标本应该由医务人员采集(医生，护士或技术人员)，他们接受过训练并取得采血资格。规范的皮肤消毒及培养瓶的准备规范的皮肤消毒及培养瓶的准备 规范的皮肤消毒及培养瓶的准备规范的皮肤消毒及培养瓶的准备 培养瓶的选择培养瓶的选择 成年人的常规血培养应该用一对瓶一对瓶 需氧瓶+厌氧瓶 FA+FN 对已经使用抗菌药物治疗的患者 用含活性炭的抗菌药物吸附瓶 SA+SN 未使用抗菌药物治疗的患者 用标准血培养瓶 Riley J.A.,Heiter B.J.,Bourbeau O.O.Comparison of recovery of blood culture isolates from two BacT/ALERT FAN aerobic blood culture bottles with recovery from