血型鉴定及交叉配血中常见问题分析及处理(省医王保龙).ppt

王保龙王保龙 王王 敏敏 朱梅红朱梅红 血型鉴定和交叉配血中血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理常见问题分析和处理 安徽省立医院输血科安徽省立医院输血科 1 1 ABOABO血型正反定不一致的原因分析及处理血型正反定不一致的原因分析及处理 2 2 交叉配血交叉配血中常见问题分析及处理中常见问题分析及处理 3 3 意外抗体筛选的意义和意外抗体筛选的意义和检测检测方法方法 Click to add Title 4 4 弱弱D D检测的意义和检测方法检测的意义和检测方法 Click to add Title 4 4 血型相容性检测血型相容性检测 血型相容性检测血型相容性检测 受血者和供血者受血者和供血者AB0AB0血型是否相容血型是否相容 受血者和供血者受血者和供血者RhDRhD血型是否相容血型是否相容 主次侧交叉配血是否相容主次侧交叉配血是否相容 受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体 第一部分第一部分 ABO正反定型不符正反定型不符的原因分析和处理的原因分析和处理 第二部分第二部分 原因原因 一一、实验者操作技术的错误实验者操作技术的错误 二二、红细胞标本问题红细胞标本问题 三三、血清标本的问题血清标本的问题 原因原因 一、实验者操作技术错误一、实验者操作技术错误 未加入抗体或血清未加入抗体或血清 未识别溶血未识别溶血 血清与红细胞比例不当血清与红细胞比例不当 离心速度、时间不够离心速度、时间不够 使用失效或错误试剂使用失效或错误试剂 实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误 1.假假阴阴性结果性结果 原因原因 离心速度过大、时间过长离心速度过大、时间过长 使用了受到细菌污染的试剂使用了受到细菌污染的试剂 试验器皿不干净试验器皿不干净 实验结果记录、解释错误实验结果记录、解释错误 2.假假阳阳性结果性结果 二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 患者近期接受了大量患者近期接受了大量ABOABO血型相容但不同型的红细血型相容但不同型的红细胞，如骨髓移植患者，或非胞，如骨髓移植患者，或非O O型人接受型人接受O O型红细胞型红细胞 原因原因 二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 某些某些ABOABO基因变异的个体或基因变异的个体或ABOABO亚型红细胞，一亚型红细胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABOABO抗原太抗原太弱，应用抗弱，应用抗A A、抗抗B B试剂未能出现预期的凝集试剂未能出现预期的凝集反应反应 原因原因 二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B B抗原红抗原红细胞或细胞或Tn/TTn/T多凝集红细胞，人血清抗多凝集红细胞，人血清抗A A、抗抗B B试剂可能与这些异常的红细胞反应试剂可能与这些异常的红细胞反应 原因原因 二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血清中含针对抗血清中含针对抗A A、抗抗B B试剂中染色剂或其他试剂中染色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应成分的抗体，出现假阳性反应 原因原因 二、红细胞标本问题二、红细胞标本问题 患者血清中高活性、高浓度患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体冷自身抗体严重致敏（包严重致敏（包被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致试剂的特异性免疫反应所致 红细胞表面包被红细胞表面包被IgGIgG类抗体类抗体 原因原因 三、血清标本的问题三、血清标本的问题 小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。原因原因 三、血清标本的问题三、血清标本的问题 免疫抑制疾病患者血清中免疫抑制疾病患者血清中ABOABO抗体减少或消失。老抗体减少或消失。老年人年人ABOABO抗体减弱抗体减弱 4 4-6 6月龄内婴儿血清中月龄内婴儿血清中ABOABO抗体阴性或很弱，一般抗体阴性或很弱，一般只测正定只测正定 原因原因 三、血清标本的问题三、血清标本的问题 血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集，如白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特缗钱状红细胞的非特异凝集。异凝集。血清中含抗血清中含抗A A、抗抗B B以外的其他红细胞抗体，如以外的其他红细胞抗体，如抗抗M M、抗抗I I等。等。患者接受了患者接受了ABOABO血型不同的骨髓移植血型不同的骨髓移植 原因原因 三、血清标本的问题三、血清标本的问题 患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体 大量大量C 1C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗分子由于异常高效价的补体结合抗体抗A A、抗抗B B作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了A A、B B抗原抗原位点，不发生凝集位点，不发生凝集 原因原因 基本程序基本程序 1.1.重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误 2.2.查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史 3.3.彻底洗涤标本或试剂红细胞彻底洗涤标本或试剂红细胞 4.4.应用抗应用抗ABAB、抗抗A1A1、或抗或抗H H检测红细胞检测红细胞 5.5.分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰体干扰 6.6.室温孵育室温孵育3030minmin后，离心观察结果，以检测弱的抗原后，离心观察结果，以检测弱的抗原抗体反应抗体反应 7.7.做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰 分析和处理分析和处理 一、一、抗原表达减弱所致的抗原表达减弱所致的ABOABO正反定不符正反定不符 二、抗二、抗-A A、抗、抗-B B血清的意外反应所致的血清的意外反应所致的ABOABO正反定不符正反定不符 三、三、意外的血清学反应所致的意外的血清学反应所致的ABOABO正反定不符正反定不符 分析和处理分析和处理 ABOABO正反定不符的分类正反定不符的分类 一、抗原表达减弱所致的一、抗原表达减弱所致的ABOABO正反定不符正反定不符 血型抗原表达减弱的常见原因血型抗原表达减弱的常见原因 ABO亚型红细胞亚型红细胞 白血病或其他恶性疾病患者的红细胞白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原抗原太弱，应用抗太弱，应用抗A、抗抗B试剂未能出现预期试剂未能出现预期的凝集反应的凝集反应 新生儿新生儿 分析和处理分析和处理 抗原表达减弱所致抗原表达减弱所致ABOABO正反定不符的处理正反定不符的处理 将抗将抗A A、抗抗B B和抗和抗A A，B B试剂与洗涤过的红细胞在试剂与洗涤过的红细胞在室温或室温或4 4孵育孵育3030minmin，以增强抗原以增强抗原、抗体的结合抗体的结合 用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞，以增用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞，以增强抗原、抗体的结合强抗原、抗体的结合 应用抗应用抗ABAB、抗抗A1A1、或抗或抗H H检测红细胞检测红细胞 分析和处理分析和处理 一、抗原表达减弱所致的一、抗原表达减弱所致的ABOABO正反定不符正反定不符 用人血清抗用人血清抗A A、抗抗B B进行吸收放散试验进行吸收放散试验，检测弱，检测弱A A、B B抗原，但不是所有单克隆抗体试剂都适宜做吸收放抗原，但不是所有单克隆抗体试剂都适宜做吸收放散试验，单克隆抗散试验，单克隆抗A A、抗抗B B必须经过系统验证，必须经过系统验证，且同时要做且同时要做O O型血吸收放散试验作对照型血吸收放散试验作对照 检测唾液中检测唾液中A A、B B和和H H血型抗原物质血型抗原物质 分析和处理分析和处理 获得性获得性B B红细胞红细胞 获得性类获得性类A A抗原抗原 混合视野凝集混合视野凝集 抗体包被红细胞抗体包被红细胞 分析和处理分析和处理 二、二、抗抗-A A、抗、抗-B B血清的意外反血清的意外反应所致的应所致的ABOABO正反定不符正反定不符 引起抗引起抗-A A、抗、抗-B B血清意外反应的因素血清意外反应的因素 获得性获得性B B红细胞红细胞(特征特征)常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生在正常人在正常人 通常只有通常只有A A 型人能出现获得性型人能出现获得性B B抗原抗原 常伴有常伴有T T和和T nT n多凝集红细胞出现多凝集红细胞出现(细菌感染时细菌感染时)自身抗自身抗B B不与自身获得性不与自身获得性B B抗原反应抗原反应(无自凝现象无自凝现象)分析和处理分析和处理 二、抗二、抗-A A、抗、抗-B B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符 获得性获得性B B红细胞红细胞(鉴定鉴定)调整人血清抗调整人血清抗B B试剂试剂pHpH至至6.06.0时，即不与获得性时，即不与获得性B B细胞反应细胞反应 分泌型者唾液中无分泌型者唾液中无B B血型物质血型物质 乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常B B细胞不受细胞不受影响影响 分析和处理分析和处理 二、抗二、抗-A A、抗、抗-B B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符 二、抗二、抗-A A、抗、抗-B B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符 获得性类获得性类A A抗原抗原 造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性TnTn抗原激活，类同抗原激活，类同A A抗原抗原 TnTn和和T T一样属隐蔽行院抗原一样属隐蔽行院抗原,激活暴露后与所有血型的激活暴露后与所有血型的血清和人血清血型抗体出现凝集反应血清和人血清血型抗体出现凝集反应(全凝后多凝全凝后多凝)蛋白酶能降解蛋白酶能降解TnTn分子，消除与抗分子，消除与抗A A凝集反应性，而正常凝集反应性，而正常A A抗原不受影响抗原不受影响,也可通过也可通过ABAB血清证实血清证实 分析和处理分析和处理 混合视野凝集混合视野凝集 非非O O型人近期输用型人近期输用O O型血型血 骨髓移植后骨髓移植后 A3A3细胞与抗细胞与抗A A呈典型的混合视野凝集现象呈典型的混合视野凝集现象 单合子的镶嵌红细胞后双合子的交移体红细胞单合子的镶嵌红细胞后双合子的交移体红细胞 分析和处理分析和处理 二、抗二、抗-A A、抗、抗-B B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符 抗体包被红细胞抗体包被红细胞 患患HDNHDN婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成人，其红细胞严重包被人，其红细胞严重包被IgGIgG抗体分子抗体分子 与含一定蛋白质浓度的试剂（抗与含一定蛋白质浓度的试剂（抗D D、抗抗A A、抗抗B B）产生凝集产生凝集 45 45 放散后放散后，抗体解离，即可准确定型，抗体解离，即可准确定型 二、抗二、抗-A A、抗、抗-B B血清的意外反应所血清的意外反应所致的致的ABOABO正反定不符正反定不符 分析和处理分析和处理 抗体太弱或消失抗体太弱或消失 非正常高浓度的抗非正常高浓度的抗A A、抗抗B B可引起前带现象可引起前带现象 A2A2、A2BA2B或其他或其他ABOABO亚型人血清中可能有抗亚型人血清中可能有抗A1A1 患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集 分析和处理分析