生药的有效和安全性---副本分解.ppt

生药的有效性评生药的有效性评 价与安全性评价价与安全性评价 目标与要求：目标与要求：、掌握生药的有效性评价方法。、掌握生药的有效性评价方法。2 2、了解糖类、苷类、生物碱、挥发油、黄、了解糖类、苷类、生物碱、挥发油、黄酮、醌类等成分的分布及结构类型。酮、醌类等成分的分布及结构类型。3 3、熟悉以上化合物的理化性质、定性和定、熟悉以上化合物的理化性质、定性和定量分析方法。量分析方法。4 4、熟悉生药的安全性评价、熟悉生药的安全性评价 第三章第三章 生药的有效性评价生药的有效性评价 第一节第一节 生药化学成分的分析方法生药化学成分的分析方法 色谱法色谱法 薄层色谱法、高效液相色谱法和气相色薄层色谱法、高效液相色谱法和气相色谱法。谱法。第二节第二节 定量分析方法的方法学验证定量分析方法的方法学验证 验证内容有：准确度、精密度（包验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性等。范围和耐用性等。第三节第三节 生药中各类成分及定量分析生药中各类成分及定量分析 概念概念:初生代谢（初生代谢（primary metabolism）：合成生：合成生命必要的生命物质的代谢过程。包括：糖类、命必要的生命物质的代谢过程。包括：糖类、氨基酸、蛋白质等。氨基酸、蛋白质等。次生代谢（次生代谢（secondary metabolism）:合成次合成次生代谢物的代谢过程。如：生物碱、萜类、生代谢物的代谢过程。如：生物碱、萜类、挥发油、苷类、醌类等。挥发油、苷类、醌类等。一、黄酮类一、黄酮类（一）、定义（一）、定义 1.经典的概念：指基本母核为经典的概念：指基本母核为2-苯基色原酮苯基色原酮（2-phenylchromone）的一系列化合物。）的一系列化合物。2.现在黄酮类化合物是泛指两个苯环（现在黄酮类化合物是泛指两个苯环（A与与B环）通过三个碳原子相互联结而成的一系环）通过三个碳原子相互联结而成的一系列化合物。列化合物。OO12345678913524610O12345678913524610ACBC6-C3-C6（二）主要的生理活性（二）主要的生理活性 1.对心血管的作用：如葛根总黄酮及葛根素对心血管的作用：如葛根总黄酮及葛根素(puerarin)、银杏叶总黄酮等具有扩张冠状、银杏叶总黄酮等具有扩张冠状血管作用血管作用。芦丁（。芦丁（rutin）等具有降低毛细）等具有降低毛细血管脆性和异常通透性作用，可用作止血血管脆性和异常通透性作用，可用作止血药及治疗高血压、动脉硬化的辅助药药及治疗高血压、动脉硬化的辅助药。2.抗菌、抗病毒作用：如黄芩苷，木犀草素抗菌、抗病毒作用：如黄芩苷，木犀草素苷等。苷等。3.止咳祛痰作用：如杜鹃素、甘草素等。止咳祛痰作用：如杜鹃素、甘草素等。（三）分布（三）分布 集中分布于被子植物中集中分布于被子植物中。如唇形科如唇形科、玄参科玄参科、菊科菊科、蔷薇科蔷薇科、芸香科芸香科、豆科豆科、杜鹃花科杜鹃花科、姜科姜科。在裸子植物中也有存在在裸子植物中也有存在，如双黄酮类多存在松柏纲如双黄酮类多存在松柏纲、银杏纲等植物银杏纲等植物中中。（四）分类（四）分类 C3-位有无位有无OH，有：为黄，有：为黄酮醇酮醇(Flavonol)，无：为，无：为黄酮黄酮(Flavone)。C2，C3饱和，加“二氢”。饱和，加“二氢”。二氢黄酮（醇）二氢黄酮（醇）(Flavanone)B环连在环连在C3位，为异黄酮位，为异黄酮（Isoflavone）C环开环，称查耳酮环开环，称查耳酮（Chalcone）C环还原，称黄烷类环还原，称黄烷类 O12345678913524610ACBC6-C3-C6（五）鉴别：（五）鉴别：1、HCl-Mg反应：黄酮、二氢黄酮、黄酮醇、反应：黄酮、二氢黄酮、黄酮醇、二氢黄酮醇类显红二氢黄酮醇类显红-紫红色。紫红色。2、络合反应：、络合反应：铝盐：铝盐：1%AlCl3或或Al(NO3)3生成黄色生成黄色,并有荧光并有荧光 铅盐：铅盐：1%醋酸铅及碱式醋酸铅生成黄醋酸铅及碱式醋酸铅生成黄红色沉淀红色沉淀 镁盐：醋酸镁甲醇溶液镁盐：醋酸镁甲醇溶液 二氢黄酮二氢黄酮(醇醇),显天蓝色荧光显天蓝色荧光,有有5-OH更明显更明显 二、生物碱（二、生物碱（Alkaloids）P56 (一一）定义：来源于生物界的一类含氮有机化定义：来源于生物界的一类含氮有机化合物合物（氨基酸氨基酸、蛋白质蛋白质、肽类肽类、VB除外除外）。（二二）分布：分布：生物碱主要分布于植物界生物碱主要分布于植物界，绝大绝大多数存在于高等植物的双子叶植物中多数存在于高等植物的双子叶植物中。如毛如毛茛科茛科（乌头乌头）、罂粟科罂粟科（罂粟罂粟）、茄科茄科（洋洋金花金花、莨菪莨菪）、豆科豆科（苦参苦参）等等。少数裸子少数裸子植物如麻黄科植物如麻黄科、红豆杉科红豆杉科、三尖杉科也存在三尖杉科也存在生物碱生物碱。（三）存在形式（三）存在形式：少数碱性极弱的生物碱以游离态存在，如酰胺少数碱性极弱的生物碱以游离态存在，如酰胺类生物碱；有一定碱性的生物碱多以有机酸盐类生物碱；有一定碱性的生物碱多以有机酸盐形式存在；少数以无机酸盐形式存在，如盐酸形式存在；少数以无机酸盐形式存在，如盐酸小檗碱、硫酸吗啡等。小檗碱、硫酸吗啡等。（四）生物碱的生物活性：生物碱多具有显（四）生物碱的生物活性：生物碱多具有显著而特殊的生物活性。著而特殊的生物活性。如吗啡具有镇痛作用；小檗碱、苦参碱有抗菌如吗啡具有镇痛作用；小檗碱、苦参碱有抗菌消炎作用；利血平有降血压作用；麻黄碱有止消炎作用；利血平有降血压作用；麻黄碱有止咳平喘作用；奎宁有抗疟作用；喜树碱、秋水咳平喘作用；奎宁有抗疟作用；喜树碱、秋水仙碱、长春新碱、三尖杉碱、紫杉醇等有不同仙碱、长春新碱、三尖杉碱、紫杉醇等有不同程度的抗癌作用等程度的抗癌作用等。（五）分类：（五）分类：有机胺类：麻黄碱、益母草碱、秋水仙碱。有机胺类：麻黄碱、益母草碱、秋水仙碱。（2）吡碇类：槟榔碱、半边莲碱、苦参碱。）吡碇类：槟榔碱、半边莲碱、苦参碱。（3）喹啉类：奎宁、喜树碱。）喹啉类：奎宁、喜树碱。（4）异奎啉类：小檗碱、吗啡、可待因。）异奎啉类：小檗碱、吗啡、可待因。（5）吲哚类：利血平、长春新碱、麦角新碱、士）吲哚类：利血平、长春新碱、麦角新碱、士的宁。的宁。（6）莨菪烷类：莨菪碱、东莨菪碱、古柯碱。）莨菪烷类：莨菪碱、东莨菪碱、古柯碱。（7）嘌呤类：咖啡碱、茶碱、香菇嘌呤。）嘌呤类：咖啡碱、茶碱、香菇嘌呤。（8）萜类：猕猴桃碱、石斛碱、乌头碱。）萜类：猕猴桃碱、石斛碱、乌头碱。（六）性质：（六）性质：、多为无色多为无色、味苦味苦、具左旋的结晶具左旋的结晶。2、多不溶或难溶于水多不溶或难溶于水，溶于乙醇溶于乙醇、甲醇甲醇、氯氯仿仿、乙醚乙醚、苯等有机溶剂；生物碱盐则易苯等有机溶剂；生物碱盐则易溶于水和甲醇溶于水和甲醇、乙醇乙醇，难溶于或不溶于有难溶于或不溶于有机溶剂机溶剂。3、沉淀反应：多和某些沉淀试剂沉淀反应：多和某些沉淀试剂、蛋白质蛋白质、鞣质鞣质、胺类等发生沉淀胺类等发生沉淀。（七）检测：（七）检测：、沉淀反应：一般在酸性溶液中进行。、沉淀反应：一般在酸性溶液中进行。碘化铋钾：生成橘红色沉淀碘化铋钾：生成橘红色沉淀，此反应很灵敏此反应很灵敏。碘化汞钾：生成白色或黄色沉淀碘化汞钾：生成白色或黄色沉淀。碘碘-碘化钾：生成棕红色沉淀碘化钾：生成棕红色沉淀。磷钼酸：生成鲜黄色或棕黄色沉淀磷钼酸：生成鲜黄色或棕黄色沉淀，此反应很此反应很灵敏灵敏。、显色反应：、显色反应：矾酸铵浓硫酸（矾酸铵浓硫酸（Mandelin试剂试剂):遇阿托品遇阿托品显红色，可待因显蓝色，士的宁显紫色。显红色，可待因显蓝色，士的宁显紫色。钼酸铵浓硫酸（钼酸铵浓硫酸（Frobde试剂试剂):遇乌头碱呈遇乌头碱呈黄棕色，小檗碱显棕绿色，阿托品与士的宁黄棕色，小檗碱显棕绿色，阿托品与士的宁不显色。不显色。甲醛浓硫酸试剂（甲醛浓硫酸试剂（Marquis试剂试剂)：遇吗啡：遇吗啡显橙色至紫色，可待因显红色至黄棕色，咖显橙色至紫色，可待因显红色至黄棕色，咖啡碱不显色。啡碱不显色。三、糖类三、糖类(carbohydrates)P83（一）糖类概述：（一）糖类概述：1、糖的含义：又称为碳水化合物糖的含义：又称为碳水化合物,是多是多羟基醛或多羟基酮及其衍生物羟基醛或多羟基酮及其衍生物、聚合物聚合物的总称的总称。2、存在：在自然界中存在：在自然界中，糖的分布极广糖的分布极广。3、主要生物活性：糖类化合物多具有抗主要生物活性：糖类化合物多具有抗肿瘤活性肿瘤活性（香菇多糖香菇多糖）或具有增强免疫或具有增强免疫功能功能（黄芪多糖黄芪多糖）。（二）、糖类的结构与分类（二）、糖类的结构与分类 根据其能否水解和分子量的大小可分为：根据其能否水解和分子量的大小可分为：单糖单糖(monosaccharides)：不能再被简单地水解：不能再被简单地水解 成更小分子的糖。如葡萄糖、鼠李糖等。成更小分子的糖。如葡萄糖、鼠李糖等。低聚糖低聚糖(oligosaccharides)：由：由29个单糖聚合而个单糖聚合而 成，也称为寡糖。如蔗糖、麦芽糖等。成，也称为寡糖。如蔗糖、麦芽糖等。多糖多糖(polysaccharides)：由由10个以上的单糖聚合个以上的单糖聚合而成，分子量很大。其性质也大大不同于单糖而成，分子量很大。其性质也大大不同于单糖和低聚糖。如淀粉、纤维素等。和低聚糖。如淀粉、纤维素等。、单糖、单糖(monosaccharides)：（1）五碳醛糖：五碳醛糖：D-木糖木糖（D-xylose，xyl）、L-阿拉伯阿拉伯糖糖（L-arabinose，ara）。（2）六碳醛糖：六碳醛糖：D-葡萄糖葡萄糖（D-glucose，glc）、D-甘甘露糖露糖（D-mannose，man）、D-半乳糖半乳糖（D-galactose，gal）。（3）六碳酮糖：六碳酮糖：D-果糖果糖（fructose，fru）（4）甲基五碳糖：甲基五碳糖：L-鼠李糖鼠李糖（L-rhamnose，rha）。（5）糖醇：单糖的醛或酮基还原成羟基后所得到的多糖醇：单糖的醛或酮基还原成羟基后所得到的多元醇称糖醇元醇称糖醇。糖醇在天然界分布也很广糖醇在天然界分布也很广，亦多有甜味亦多有甜味。如卫矛醇如卫矛醇、D-甘露醇甘露醇、D-山梨醇山梨醇。、低聚糖、低聚糖(oliosaccharide)按组成低聚糖的单糖数目，低聚糖分为二糖、按组成低聚糖的单糖数目，低聚糖分为二糖、三糖、四糖等。常见的二糖有蔗糖、龙胆二糖三糖、四糖等。常见的二糖有蔗糖、龙胆二糖（gentiobiose）、麦芽糖（）、麦芽糖（maltose）、芸香糖）、芸香糖（rutinose等。等。芸香糖芸香糖 OHOOHOHOHOOHOHOH,OHCH3OHOHOHOHOOHOHOOH,OHHO龙胆二糖龙胆二糖 OOHHOHOOHOHOOHOHOH,OH 麦芽糖麦芽糖 、多糖、多糖(polysaccharide)由 一 种 单 糖 组 成 的 多 糖 为 均 多 糖由 一 种 单 糖 组 成 的 多 糖 为 均 多 糖（homosaccharides），由二种以上单糖组成的由二种以上单糖组成的为杂多糖为杂多糖（heterosaccharides）。包括：包括：植物多糖（纤维素、淀粉、粘液质、树胶）植物多糖（纤维素、淀粉、粘液质、树胶）菌类多糖（猪苓多糖、茯苓多糖、灵芝多糖菌类多糖（猪苓多糖、茯苓多糖、灵芝多糖)动物多糖（肝素、甲壳素）动物多糖（肝素、甲壳素）（三）（三）检查方法：检查方法：Fehling试验试验:如产生砖红色氧化亚铜沉淀如产生砖红色氧化亚铜沉淀，示有还原糖存在示有还原糖存在。非还原性低聚糖和多糖类需非还原性低聚糖和多糖类需水解后才显正反应水解后才显正反应。Molisch试验试验:所有糖类均呈正反应所有糖类均呈正反应。(3)层析试验层析试验:生药浸出液生药浸出液（多糖需水解多糖需水