药品检验补充检验方法和检验项目批准件编号2009024.pdf

批准件编号2009024药品名称中文名：安神类中成药剂型规格现执行标准现行的国家药品标准（中国药典、局颁标准、部颁标准）申请单位中国药品生物制品检定所见附页国家食品药品监督管理局批准的补充检验方法和项目的内容补充检验本补充检验方法与项目适用于镇静安神类中成药及改善睡眠类保健方法与项食品中非法添加地西泮、硝西泮、氯硝西泮、氯氨卓、奥沙西泮、目的实施马来酸咪哒唑仑、劳拉西泮、艾司唑仑、阿普唑仑、三唑仑、巴比规定妥、苯巴比妥、异戊巴比妥、司可巴比妥等的筛查和验证。补充检验二OO九年十二月四日方法与项目的批准日期主送单位中国药品生物制品检定所、各省（自治区、直辖市）药品监督管理局抄送单位备注、有、鉴)二O丸年十二日安神类中成药中非法添加化学品检测方法本补充检验方法与项目适用于镇静安神类中成药及改善睡眠类保健食品中非法添加地西泮、硝西泮、氯硝西泮、氯氨卓、奥沙西泮、马来酸咪哒唑仑、劳拉西泮、艾司唑仑、阿普唑仑、三唑仑、巴比妥、苯巴比妥、异戊巴比妥、司可巴比妥等的快速筛查和确证。该方法中，薄层色谱法用于快速筛查；高效液相色谱法用于定性检查；经快速筛查或定性检查结果为阳性的样品，需经液-质联用方法验证后出具检验报告。我局已批复的药品补充检验方法和检验项目批准件（批准件编号2006008、2006024)也可同时使用。一、薄层色谱法【检查】(1)地西泮、硝西泮、氯硝西泮、氯氯卓、奥沙西泮、马来酸咪哒唑仑、劳拉西泮、艾司唑仑、阿普唑仑、三唑仑取一次口服剂量的供试品（包衣片除去包衣，胶囊取内容物，丸剂用适量硅藻土分散、液体制剂直接取用)，研细，加三氯甲烷5ml,超声处理15分钟，放冷，滤过，取滤液（液体制剂分取氯仿液)作为供试品溶液（取样量大的样品可适量增加三氯甲烷量，滤过后加大点样量)。另取地西泮、硝西泮、氯硝西泮、奥沙西泮、马来酸咪哒唑仑、劳拉西泮、艾司唑仑、阿普唑仑、三唑仑对照品，加三氯甲烷制成每1ml含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液I。另取氯氯卓对照品加三氯甲烷制成每1m1含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录B)试验，吸取供试品溶液51，对照品溶液21，条状点样，分别点于同一高效硅胶GF54薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲醇(6：3：1)为展开剂，预饱和20分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不得检出相应的荧光淬灭斑点。在上述薄层色谱系统中，劳拉西泮、氯氯卓对照品斑点f值一致。故在劳拉西泮、氯氮卓对照品斑点相应位置有斑点的样品，需用下述方法进一步区分：取上述方法展开的薄层板，晾干，以乙酸乙酯-异丙醇(10：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254m)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不得检出相应的荧光淬灭斑点。续滤液作为供试品溶液。b.口服液取相当于一次口服剂量的溶液，置分液漏斗中，加三氯甲烷约30ml,振摇提取，分取三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣用甲醇25ml溶解，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。测定法分别精密吸取对照品溶液、混合对照品溶液及供试品溶液各201，注入液相色谱仪，记录色谱图，即得。结果判断供试品色谱中，应不得检出与对照品保留时间一致的色谱峰。(2)巴比妥、司可巴比妥钠、异戊巴比妥、苯巴比妥、氯美扎酮照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录ID)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.2%醋酸溶液(25：75)为流动相；检测波长210m(如有与对照品保留时间一致的色谱峰，可更换色谱柱或调整流动相比例再进样一次)。对照品溶液的制备取巴比妥、司可巴比妥钠、异戊巴比妥、苯巴比妥、氯美扎酮对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含0.020mg的溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备取相当于一次口服剂量四分之一的供试品（片剂、水丸研细：胶囊剂取内容物研细；蜜丸应加水10m1超声溶散；糖浆、口服液直接取样，加甲醇100m1,强力振摇1分钟，静置片刻，取上清液，用0.45m滤膜滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各201，注入液相色谱仪，测定，即得。结果判断供试品色谱中，应不得检出与对照品保留时间一致的色谱峰。三、液-质联用方法(LC-MSn)【检查】(1)咪达唑仑、艾司唑仑、阿普唑仑、三唑仑、氯氮卓、硝西泮、奥沙西泮、劳拉西泮、地西泮色谱条件用十八烷基键合硅胶为填充剂：以甲醇-7腈一0.5%甲酸(15：25：60)为流动和：柱温：10。质谱参数；电喷雾电离源(ESI),源电压4.5KV,毛细管温度350，毛细管电压15V,鞘（流迷1.2L/mi,辅助气流速0.151，/mi1,正离子检测，采取一级全扫描及二级全扫描方式，质量范围1001000。对照品溶液的制备与测定分别取马来酸咪达唑仑、艾司唑仑、阿普唑仑、三唑仑、氯氨卓、硝西泮、奥沙西泮、劳拉西泮、地西泮对照品约10mg,置100ml量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品贮备液。分别量取各对照品贮备液1ml,置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为混合对照品贮备液。量取混合对照品贮备液1ml,置10ml量瓶中，以流动相稀释至刻度。取20l注入液质联用仪，进行液-质联用分析，记录液相色谱图及一级质谱图与二级质谱图。供试品溶液的制备与测定取供试品（片剂，取数片，研细：胶囊剂，取数粒，倾取内容物，研细)，分别称取一次口服剂量（液体制剂如口服液，量取一次口服剂量)，分别置100ml量瓶中，加甲醇适量，超声提取20分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。滤过，取续滤液以流动相稀释1050倍，作为供试品溶液，精密量取20l注入液-质联用仪，记录液相色谱图及一级质谱图与二级质谱图。供试品色谱中，应不得检出与对照品保留时间相同的色谱峰；若检出保留时间相同的色谱峰，色谱峰的一级质谱及二级质谱均不得与对照品一致。(2)巴比妥、苯巴比妥、异戊巴比妥、司可巴比妥、氯硝西泮色谱条件用十八烷基键合硅胶为填充剂：以甲醇一水(60：40)为流动相：质谱参数电喷雾电离源(SI),源电压5.0KV,毛细管温度275，毛细管电压-15V,鞘气流速1.05L/min,辅助气流速0.15L/min,负离子检测，采取一级全扫描及二级全扫描方式，质量范围1001000。对照品溶液的制备与测定分别取巴比妥、苯巴比妥、异戊巴比妥、司可巴比妥钠对照品约25mg,置25m1量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，作为贮备液。取氯硝西泮对照品约10mg,置100m1量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，作为贮备液。分别量取上述两种对照品贮备液各1ml,置10m1量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液。取20u1注入液-质联用仪，进行液质联用分析，记录液相色谱图及一级质谱图与二级质谱图。供试品溶液的制备与测定取高效液相色谱法检查(1)项下滤过的续滤液，以甲醇稀释210倍，作为供试品溶液，取201注入液-质联用仪，记录液相色谱图及一级质谱图与二级质谱图。供试品色谱中，应不得检出与对照品保留时间相同的色谱峰；若检出保留时间相时的色谱峰，色谱峰的一级质谱及二级质谱均