糖皮质激素的抗炎作用.ppt

糖皮质激素的抗炎作用糖皮质激素的抗炎作用 实验目的实验目的 学习用蛋清致炎剂致动物实验性急性炎症学习用蛋清致炎剂致动物实验性急性炎症的方法的方法。观察糖皮质激素的抗炎作用观察糖皮质激素的抗炎作用。实验原理实验原理 异体蛋白进入机体以后，可在短时异体蛋白进入机体以后，可在短时间内引起组织的急性炎症反应，炎间内引起组织的急性炎症反应，炎症部位明显肿胀，体积增大。本实症部位明显肿胀，体积增大。本实验用蛋清为异种蛋白质，注入大鼠验用蛋清为异种蛋白质，注入大鼠足跖内，可致局部急性炎症反应，足跖内，可致局部急性炎症反应，使局部组织肿胀。通过测定炎症部使局部组织肿胀。通过测定炎症部位的体积，观察炎症的发生及氢化位的体积，观察炎症的发生及氢化可的松的抗炎作用。可的松的抗炎作用。糖皮质激素（糖皮质激素（GCSGCS）是由肾上腺皮质中束状带分泌的一类甾）是由肾上腺皮质中束状带分泌的一类甾体激素，主要为皮质醇，具有调节糖、脂肪、和蛋白质的生体激素，主要为皮质醇，具有调节糖、脂肪、和蛋白质的生物合成和代谢的作用，还具有抑制免疫应答、抗炎、抗毒、物合成和代谢的作用，还具有抑制免疫应答、抗炎、抗毒、抗休克作用。抗休克作用。抗炎作用：抗炎作用：GCSGCS有快速有快速、强大而非特异性的抗炎作用强大而非特异性的抗炎作用。对各对各种炎症均有效种炎症均有效。在炎症初期在炎症初期，GCSGCS抑制毛细血管扩张抑制毛细血管扩张，减轻减轻渗出和水肿渗出和水肿，又抑制白血细胞的浸润和吞噬又抑制白血细胞的浸润和吞噬，而减轻炎症症而减轻炎症症状状。在炎症后期在炎症后期，抑制毛细血管和纤维母细胞的增生抑制毛细血管和纤维母细胞的增生，延缓延缓肉芽组织的生成肉芽组织的生成。而减轻疤痕和粘连等炎症后遗症而减轻疤痕和粘连等炎症后遗症。抗炎作用机制：抗炎作用机制：GCSGCS扩散进入胞浆内扩散进入胞浆内，并与并与GRGRHspHsp结合结合。同同时时HspHsp被分离被分离。GCSGCS和和GRGR复合物进入细胞核复合物进入细胞核，与靶基因启动子与靶基因启动子序列的序列的GREGRE结合结合，增加抗炎细胞因子基因转录增加抗炎细胞因子基因转录，与与nGREnGRE结合结合。抑制致炎因子的基因转录抑制致炎因子的基因转录，而产生抗炎作用而产生抗炎作用。图解图解 实验对象实验对象 大鼠大鼠，雌雄各半雌雄各半，体重体重150150克克。实验器材与试剂实验器材与试剂 器材：大鼠后足容积器材：大鼠后足容积测量器测量器、1 1mLmL注射器注射器、5050mLmL小烧杯小烧杯。试剂：新鲜蛋清试剂：新鲜蛋清，氢氢化可的松注射液化可的松注射液，生生理盐水理盐水。实验步骤实验步骤 1 1.取大鼠取大鼠2 2只只，标记标记，称重称重，分别腹腔注射下列药物分别腹腔注射下列药物,1 1号鼠生理盐水号鼠生理盐水3 3mL/kg,mL/kg,2 2号鼠：氢化可的松溶液号鼠：氢化可的松溶液1515mg/kgmg/kg (0 0.5 5%溶液溶液3 3mL/kgmL/kg）。2 2.取带有侧管的大鼠后足容积测量器取带有侧管的大鼠后足容积测量器，将注射器与侧管将注射器与侧管相连相连，盛入水盛入水，使液面与使液面与2020mLmL处平齐处平齐。3 3.将各鼠右踝关节的突起点处用圆珠笔画圈作为测量标将各鼠右踝关节的突起点处用圆珠笔画圈作为测量标志志，依次将各鼠右后足放入容积测量器内依次将各鼠右后足放入容积测量器内，使后肢暴露使后肢暴露在筒外在筒外，浸入的深度以圆圈处与浸入的深度以圆圈处与2020mlml刻度重合为度刻度重合为度。该该足进入液体以后足进入液体以后，液面升高液面升高，液体自侧管溢出流入注射液体自侧管溢出流入注射器中器中，溢出液体的毫升数即为该鼠右后足的体积溢出液体的毫升数即为该鼠右后足的体积。依次依次测定各鼠右后足的正常体积测定各鼠右后足的正常体积。4 4.各鼠腹腔注射药后各鼠腹腔注射药后1515minmin，从右后足掌心向掌从右后足掌心向掌趾关节方向进针趾关节方向进针，皮下注射新鲜蛋清皮下注射新鲜蛋清0 0.1 1mlml。5 5.注射蛋清后注射蛋清后2020minmin、4040minmin、6060minmin、8080minmin，分分别测量右后足的体积别测量右后足的体积，记录溢出液体的毫升数记录溢出液体的毫升数。各鼠致炎以后的体积减去正常的体积各鼠致炎以后的体积减去正常的体积，即为各个即为各个时间右后足的肿胀度时间右后足的肿胀度。即：各个时间点右后足肿即：各个时间点右后足肿胀度胀度 =致炎后的容积致炎后的容积 -致炎前的容积致炎前的容积。6 6.根据公式计算：根据公式计算：右后足肿胀率右后足肿胀率（%）=（致炎后最大容积致炎后最大容积 -致炎前致炎前的容积的容积）/致炎前的容积致炎前的容积 100100%计算结果填入下表计算结果填入下表 组别组别 剂量剂量（mg/kmg/kg)g)致炎前容致炎前容积（积（mLmL）致炎后容积（致炎后容积（mL)mL)右后足右后足肿胀率肿胀率（%）20min20min 40min40min 60min60min 80min80min 生理盐水生理盐水组组 氢化可的氢化可的松组松组 糖皮质激素的抗炎作用 注意事项注意事项 蛋清应实验当天现行配置蛋清应实验当天现行配置，置于置于4 4冰箱保冰箱保存存。注意操作的一致性注意操作的一致性，测量要有专人负责测量要有专人负责。尽量减小误差尽量减小误差。思考题思考题 结合本次实验结果结合本次实验结果，讨论氢化可的松讨论氢化可的松的抗炎作用的抗炎作用。