细胞内细胞因子染色法中山医学院免疫学教研室实验原理细胞因子跨膜分泌阻滞剂BFA，使新产生细胞因子滞留在细胞内；破膜剂使荧光抗体可以进入细胞内，并可以检测相应细胞因子；流式细胞记数技术可以记数细胞，分析相应细胞的质和量。方法特点1.单细胞水平计数2.简单、快捷、灵敏3.实验结果客观实验过程取淋巴细胞，刺激剂作用，37℃孵育1小时加入BFA继续培养5小时，用PBS洗涤。4%多聚甲醛室温固定8分钟后，PBS洗涤。重悬细胞，4℃放置几小时或过夜。加入荧光标记抗体,4℃避光30分钟，洗涤。缓冲液2重悬，流式细胞记数仪检测。结果分析需要的缓冲液1.1×PBS1升（洗细胞用）2.PBS+0.1%BSA+NaN30.05%500ml(用于染色后FACS前)3.PBS+BSA+NaN3+0.1%Saponin250ml(封闭染色后用)4.PBS+BSA+NaN3+Saponin+5%milk40ml流...
