尿液自动化分析(5).ppt

第七节第七节 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 检验医学教研室检验医学教研室 2 自动尿液分析系统自动尿液分析系统 尿液干化学分析仪尿液干化学分析仪 尿沉渣分析仪尿沉渣分析仪 计算机联控计算机联控 分析报告分析报告 3 尿液检验流程尿液检验流程 4 尿液自动化分析尿液自动化分析 5 第一节第一节 尿液干化学分析仪尿液干化学分析仪 目前临床广泛使用尿干化学分析系统，目前临床广泛使用尿干化学分析系统，将检测尿液各种成分的试剂附着在纸（或胶片将检测尿液各种成分的试剂附着在纸（或胶片）上做成试纸（或干片），采用反射光原理检）上做成试纸（或干片），采用反射光原理检测试剂颜色变化测试剂颜色变化 。具有操作简便、效率高，。具有操作简便、效率高，100100-360360份样本份样本/h h作为尿液的过筛检查。作为尿液的过筛检查。6 尿液干化学分析的发展尿液干化学分析的发展 19561956年：年：美国人美国人AmesAmes和和LillyLilly发明了尿糖干化学试带发明了尿糖干化学试带 19571957年：年：利用利用“蛋白质误差蛋白质误差”的原理推出尿蛋白检测试带的原理推出尿蛋白检测试带，19581958年：年：推出尿糖推出尿糖、尿蛋白二联试带尿蛋白二联试带 19591959年：年：推出尿糖推出尿糖、尿蛋白尿蛋白、尿尿pHpH三联试带三联试带 2020世纪世纪7070年代年代：第一台干化学分析仪问世：第一台干化学分析仪问世 现代尿液分析自动化的标志现代尿液分析自动化的标志 试带逐步发展到多项试带逐步发展到多项，八联八联、十联十联、十一联十一联、十二联十二联 从目测发展到自动化仪器检测从目测发展到自动化仪器检测，由半自动化到全自动化由半自动化到全自动化 国产试剂代替进口试剂国产试剂代替进口试剂。7 一、尿干化学分析仪分类一、尿干化学分析仪分类 按自动化程度分按自动化程度分 1.1.半自动尿液分析仪：半自动尿液分析仪：2.2.全自动尿液分析仪：全自动尿液分析仪：按检测项目分按检测项目分 8 8项项：pHpH、PROPRO、GLUGLU、KETKET、BILBIL、UROURO、BLDBLD、NITNIT 1010项项：8 8项项 +LEU+LEU、SGSG 1111项项：1010项项 +VitC+VitC 1212项项：1010项项 +颜色、透明度颜色、透明度 8 各种尿干化学分析仪各种尿干化学分析仪 9 尿干化学试带种类 单项试纸：PRO、GLU、BLD、BIL等 多联试纸：3A、8A、10A、11A、12A等。10 二、尿干化学分析仪与试带的基本结构二、尿干化学分析仪与试带的基本结构 （一）尿干化学分析仪基本结构 1.机械系统：将试带传送到检测区，检测后再将试带送将试带传送到检测区，检测后再将试带送 到废物盒。到废物盒。半自动尿仪半自动尿仪:支架式、传送带式支架式、传送带式 全自动尿仪全自动尿仪：浸入式加样、点式加样：浸入式加样、点式加样 2.光学系统：光源、单色光处理、光电转换（光源、单色光处理、光电转换（CCDCCD技术）技术）3.电路及计算机系统：光电转换系统、光电转换系统、I/VI/V转换系统、转换系统、CPUCPU、显示器、面板。、显示器、面板。11 二、干化学尿液分析仪的原理和特点二、干化学尿液分析仪的原理和特点 种类较多种类较多，目前国产尿仪质量也很稳定目前国产尿仪质量也很稳定。【原理原理】光学系统采用光学系统采用球面积分仪球面积分仪、双波长反射式光度计双波长反射式光度计，整个光学系统在试纸条表面上移动，逐次测量试纸面，整个光学系统在试纸条表面上移动，逐次测量试纸面上反射光与参比光的比例。三个光电管和特定波长滤光上反射光与参比光的比例。三个光电管和特定波长滤光片，分别进行测量。片，分别进行测量。参比光参比光为为深红色滤光片深红色滤光片（720720nmnm）；测量光电管中加有；测量光电管中加有绿色滤光片绿色滤光片（550550nmnm）对对NITNIT、KETKET、BILBIL、UROURO进行测量；进行测量；另一个加另一个加红色滤光片红色滤光片（620620nmnm），），对对PHPH、GLUGLU、PROPRO、BLDBLD进行测量。经电荷耦合（进行测量。经电荷耦合（CCDCCD）技术进行）技术进行光电转换，光电转换，再经再经数字模拟转换，数字模拟转换，用微电脑进行处理后输出（显示屏、打用微电脑进行处理后输出（显示屏、打印机、外接电脑等）。印机、外接电脑等）。12 尿液自动分析仪结构图尿液自动分析仪结构图 CPU 13(二二)试带的结构试带的结构 塑料基质载体塑料基质载体 吸水层吸水层 试剂层试剂层2 2（碘酸盐层）（碘酸盐层）尼龙保护膜尼龙保护膜 透明膜透明膜 试剂层试剂层1 1 试带的多层膜结构试带的多层膜结构 14 尿试带的多层膜结构尿试带的多层膜结构（1 1）过滤层）过滤层：尼龙膜，起保护作用，尼龙膜，起保护作用，防止大分子物质对反应的影响防止大分子物质对反应的影响 （2 2）反应层：）反应层：绒制品，包括绒制品，包括过碘酸盐区过碘酸盐区（有的无此区）和（有的无此区）和试试 剂区剂区，过碘酸盐区可破坏，过碘酸盐区可破坏VitCVitC的干扰；试剂区含有的干扰；试剂区含有 试剂成分主要与所测物质发生反应，产生颜色反应试剂成分主要与所测物质发生反应，产生颜色反应 （3 3）吸水区：）吸水区：可使尿液均匀快速深入，并能抑制尿液流到相可使尿液均匀快速深入，并能抑制尿液流到相 邻反应区。邻反应区。（4 4）支持层：）支持层：不被尿液浸润的塑料片做支持层。不被尿液浸润的塑料片做支持层。空白块空白块：用于消除尿自身颜色在试剂块上产生颜色的干扰。用于消除尿自身颜色在试剂块上产生颜色的干扰。15 三、尿干化学分析仪原理与试带反应原理三、尿干化学分析仪原理与试带反应原理 （一）检测原理 试带上试带上试剂试剂块分别与尿中块分别与尿中相应的成分相应的成分发生化学反应并呈现不发生化学反应并呈现不同的颜色，颜色深浅与尿液中相应成分含量成正比。空白快作同的颜色，颜色深浅与尿液中相应成分含量成正比。空白快作为为“补偿区补偿区”。试带上的模块被双波长（参考波长试带上的模块被双波长（参考波长720nm720nm、测定波长、测定波长620nm/550nm620nm/550nm）光照射，）光照射，色块颜色越深，吸收光亮越大，反射光亮越小，反射反射率越小色块颜色越深，吸收光亮越大，反射光亮越小，反射反射率越小 色块颜色越浅，吸收光亮越小，反射光亮越大，反射反射率越大色块颜色越浅，吸收光亮越小，反射光亮越大，反射反射率越大 检测试块反射率、空白反射率、总反射率计算检测试块反射率、空白反射率、总反射率计算 R R试剂试剂=T=Tm m/T/Ts s R R空白空白=C=Cm m/C/Cs s R R总总=T=Tm mC Cs s/(T/(Ts s C Cm m）R:R:反射率；反射率；T:T:试块试块;C:;C:空白块；空白块；m:m:测量波长反射强度；测量波长反射强度；s:s:参考波长反射强度参考波长反射强度 16（二）尿试纸法的项目和反应原理（二）尿试纸法的项目和反应原理 项 目 代号 反应原理 试剂主要成分 酸碱度 pH pHpH指示剂指示剂 甲基红甲基红、溴麝香草酚蓝溴麝香草酚蓝 蛋白质 PRO 指示剂的蛋白质误差法指示剂的蛋白质误差法 溴酚蓝溴酚蓝、枸橼酸钠枸橼酸钠、表面活性剂表面活性剂 葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶 葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶、过氧化物酶过氧化物酶、色原受体色原受体 隐血隐血 BLD Hb类过氧化酶法类过氧化酶法 过氧化氢茴香素或过氧化氢枯烯过氧化氢茴香素或过氧化氢枯烯、色原受体色原受体 胆红素胆红素 BIL 偶氮反应法偶氮反应法 2,4-二氯苯胺重氮盐二氯苯胺重氮盐 尿胆原尿胆原 URO 醛反应法醛反应法 对二甲氨基苯甲醛或对甲氧基苯重四氟化硼对二甲氨基苯甲醛或对甲氧基苯重四氟化硼 酮体酮体 KET 亚硝基铁氰化钠法亚硝基铁氰化钠法 亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠 亚硝酸盐亚硝酸盐 NIT 亚硝酸盐还原法亚硝酸盐还原法 氨基苯砷酸氨基苯砷酸、1,2,3,4-四氢并喹啉四氢并喹啉-3酚酚 白细胞白细胞 LEU 酯酶法酯酶法 吲哚酚酯吲哚酚酯、重氮盐重氮盐 比密比密 SG 多聚电解质离子解离法多聚电解质离子解离法 甲氧乙烯顺丁烯二酸甲氧乙烯顺丁烯二酸、溴麝香草酚蓝溴麝香草酚蓝 抗坏血酸抗坏血酸 VitC 吲哚酚法吲哚酚法 2,6-二氯酚靛酚钠二氯酚靛酚钠 17(二二)试带使用注意事项试带使用注意事项 1 1.严格按操作说明书要求进行操作；严格按操作说明书要求进行操作；2 2.试带要在有效期内使用；试带要在有效期内使用；3 3.试带从冷藏变成室温前不要打开瓶盖试带从冷藏变成室温前不要打开瓶盖，用后盖紧用后盖紧瓶盖；开过盖的试带瓶不建议放在冷藏温度瓶盖；开过盖的试带瓶不建议放在冷藏温度，可可放阴凉放阴凉、干燥干燥、避光处避光处。4 4.禁止用手触摸试剂区禁止用手触摸试剂区，5 5.不同厂家的同类试纸不同厂家的同类试纸，其原理其原理、方法方法、结果结果 不相同不相同，不可混用不可混用。18 尿干化学方法学评价尿干化学方法学评价 优点：优点：具有操作简便、检测快速、同时获得多项结果具有操作简便、检测快速、同时获得多项结果 缺点：缺点：影响因素多，必须结合尿理学检查、显微镜检查，影响因素多，必须结合尿理学检查、显微镜检查，互相验证、综合分析互相验证、综合分析 目前国内采用方法：目前国内采用方法：干化学法干化学法LEULEU、BLDBLD、PROPRO、NITNIT四项皆（四项皆（-），可不镜检。），可不镜检。其中任一项出现异常时，则必须镜检。其中任一项出现异常时，则必须镜检。注意事项：注意事项：以尿沉渣作为诊断依据或观察疗效时，不宜用干化学过筛以尿沉渣作为诊断依据或观察疗效时，不宜用干化学过筛 尿外观与尿沉渣有关，当尿外观异常时，应注意镜检尿外观与尿沉渣有关，当尿外观异常时，应注意镜检 干化学干扰因素多，且有一定的假（干化学干扰因素多，且有一定的假（-），因此无论干化学结果如），因此无论干化学结果如何，必要时需做镜检何，必要时需做镜检 有泌尿系统疾病，不宜用干化学过筛，应全部进行镜检。有泌尿系统疾病，不宜用干化学过筛，应全部进行镜检。19(三三)试纸分析的假阳性和假阴性试纸分析的假阳性和假阴性 1.尿中含高浓度尿中含高浓度VC,VC,可使试纸法葡萄糖和隐血结果呈可使试纸法葡萄糖和隐血结果呈 假假(一一);2 2.尿蛋白试纸是利用尿蛋白试纸是利用PHPH指示剂的蛋白质误差原理指示剂的蛋白质误差原理,白蛋白蛋 白的反应性最强白的反应性最强,球蛋白的反应性弱球蛋白的反应性弱,一些高分子化学一些高分子化学 物物(如聚乙烯吡咯酮如聚乙烯吡咯酮)可产生假可产生假(+)(+);3 3.某些药物某些药物（如氯丙嗪如氯丙嗪、酚噻嗪酚噻嗪、吩嗪类药物吩嗪类药物）可使尿可使尿 BILBIL、UROURO等呈假等呈假（+）；4 4.尿尿PHPH超过超过8 8.0 0以上以上，PROPRO呈假呈假(+)(+)；20 尿试纸法产生假（尿试纸法产生假（+）、假（）、假（-）的常见原因）的常见原因 项目 假（假（+）假（假（-）pH 尿液久置尿液久置，使结果升高使结果升高 浸入尿中时间过长浸入尿中时间过长，使结果偏低使结果偏低 SG 高蛋白质、酸性尿使结果偏高高蛋白质、酸性尿使结果偏高 碱性尿使结果偏低碱性尿使结果偏低 PRO 尿尿pHpH8.08.0、氯乙烯、磷酸盐、季胺、氯乙烯、磷酸盐、季胺类消毒剂类消毒剂 大量青霉素尿、庆大霉素尿、大量青霉素尿、庆大霉素尿、pHpH8.08.0 GLU 强氧化剂次氯酸钠、过氧化物强氧化剂次氯酸钠、过氧化物 VitCVitC500mg/L500mg/L KET 肌酐、酞、苯丙酸肌酐、酞、苯丙酸 试剂带潮解、标本防止时间过长试剂带潮解、标本防止时间过长 BIL 大量氯丙嗪、盐酸苯偶氮吡啶大量氯丙嗪、盐酸苯偶氮吡啶