动物细胞培养动物细胞融合生产单克隆抗体动物细胞核移植动物细胞工程常用技术其它动物细胞工程的基础学习目标动物细胞培养定义、过程、条件、应用动物体细胞核移植技术定义、过程、应用、存在问题一、动物细胞培养1.概念：细胞增殖动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。2.原理：3.过程取出组织胚胎或幼龄动物的器官组织剪碎组织胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶内（培养液）置于适宜环境中培养加培养液稀释动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官胰蛋白酶处理取出组织胚胎或幼龄动物器官组织剪碎单个细胞细胞悬液细胞贴壁接触抑制转入培养瓶内（培养液）置于适宜环境中培养思考：转入培养瓶内培养会发生哪些现象？■细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。■培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于帖附。细胞进行有丝分裂，数量不断增多。接触抑制■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。取出组织胚胎或幼龄动物的器官组织剪碎组织胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理单个细胞制成细胞悬液加培养液转入培养瓶内培养（细胞贴壁；接触抑制）原代培养定义：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养动物组织块细胞悬液细胞悬液原代培养（细胞贴壁；接触抑制）传代培养胰蛋白酶处理分散成单个细胞幼龄动物的器官组织；动物胚胎加入培养液用胰蛋白酶等处理贴壁细胞；分瓶继续培养。适宜条件当原代培养的细胞处于接触抑制后，用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，然后加入新的培养液，将细胞分离稀释，并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内，这个过程称传代培养（分瓶培养的过程）。传代培养10代细胞50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系遗传物质已改变遗传物质未改变动物胚胎或幼龄动物的组织、器官配置细胞悬液胰蛋白酶处理转入培养瓶单个细胞加培养液稀释分瓶原代培养原代培养特点：细胞贴壁、接触抑制动物胚胎或幼龄动物的组织、器官配置细胞悬液胰蛋白酶处理10代细胞转入培养瓶40-50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液稀释传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。分瓶继续传代培养少部分细胞获得不死性，细胞突变，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。细胞株：一般说遗传物质未改变细...
