显微镜的使用与细胞观察.ppt

显微镜的使用显微镜的使用 与细胞观察与细胞观察 普通生物学实验普通生物学实验 2 目录目录 1生物学实验课的基本要求生物学实验课的基本要求 2实验目的实验目的 3实验用品实验用品 4实验内容实验内容 光学显微镜的使用练习光学显微镜的使用练习 制作并观察人口腔上皮细胞临时装片制作并观察人口腔上皮细胞临时装片 制作并观察洋葱细胞临时装片制作并观察洋葱细胞临时装片 5生物绘图生物绘图 3 生物学实验课的基本要求生物学实验课的基本要求 课前预习实验指导，主动参阅相关资料。课前预习实验指导，主动参阅相关资料。准确理解老师对实验的要求。准确理解老师对实验的要求。利用实验指导或相关资料完成实验。利用实验指导或相关资料完成实验。实验操作一定要规范。实验操作一定要规范。在实验过程中要认真观察，积极思考，并可在实验过程中要认真观察，积极思考，并可以与其他同学讨论。不做与实验无关的事。以与其他同学讨论。不做与实验无关的事。训练自己独立实验的能力。训练自己独立实验的能力。认真、规范、准时完成实验报告。认真、规范、准时完成实验报告。4 实验目的实验目的 了解双目显微镜的基本构造了解双目显微镜的基本构造及其维护及其维护，掌握，掌握显微镜的使用方法。显微镜的使用方法。学习临时装片制作的技术。学习临时装片制作的技术。观察动、植物细胞临时装片，了解动、植物观察动、植物细胞临时装片，了解动、植物细胞的基本结构特点。细胞的基本结构特点。学习生物绘图的基本方法。学习生物绘图的基本方法。5 实验用品实验用品 材料材料：人口腔上皮细胞；洋葱（人口腔上皮细胞；洋葱（Allium cepa）鳞茎。）鳞茎。器材和仪器器材和仪器：BK1000显微镜、投影仪、解剖器材、培养皿、烧显微镜、投影仪、解剖器材、培养皿、烧杯、滴管、载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸、杯、滴管、载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸、纱布、蒸馏水。纱布、蒸馏水。试剂：试剂：生理盐水、生理盐水、0.1%的亚甲基蓝溶液、的亚甲基蓝溶液、I2KI溶液。溶液。6 实验内容实验内容 显微镜的构造和使用显微镜的构造和使用 临时装片的制作与观察临时装片的制作与观察 1 1 制作并观察人口腔上皮细胞临时装片制作并观察人口腔上皮细胞临时装片 2 2 制作并观察制作并观察洋葱洋葱细胞临时装片细胞临时装片 7 College of Life Sciences 显微镜的构造和使用显微镜的构造和使用 8 单目显微镜的结构单目显微镜的结构 9 13 12 双目复式显微镜的构造双目复式显微镜的构造 1.1.目镜目镜 2.2.止紧螺钉止紧螺钉 3.3.物镜转换器物镜转换器 4.4.物镜物镜 5.5.载物台载物台 6.6.聚光器（光栏聚光器（光栏调节杆）调节杆）7.7.聚光器调节螺聚光器调节螺旋旋 8.8.粗、细准焦螺旋粗、细准焦螺旋 9.9.镜座镜座 10.10.亮度调节开亮度调节开关关 11.11.标本片夹手柄标本片夹手柄 12.12.镜臂镜臂 13.13.纵横向移动纵横向移动手轮手轮 11 显微镜的构造图显微镜的构造图 显微镜的构造显微镜的构造 10 机械部分机械部分 显微镜的构造可分为保证成象的光学系统和用以安显微镜的构造可分为保证成象的光学系统和用以安装光学系统的机械部分。装光学系统的机械部分。机械部分：机械部分：镜座和镜柱：镜座和镜柱：镜臂：镜臂：镜筒：镜筒：物镜转换器：物镜转换器：载物台：载物台：调节轮：大的为粗调节轮，小的为细调节轮，旋转调节轮：大的为粗调节轮，小的为细调节轮，旋转一周镜筒升降一周镜筒升降0.10.1毫米。毫米。11 光学部分光学部分 光学部分包括物镜、目镜、聚光器、反光镜等。物镜和目镜直接参与显光学部分包括物镜、目镜、聚光器、反光镜等。物镜和目镜直接参与显微镜的成像，聚光器和反光镜起调节光强度和改变入射光的作用。微镜的成像，聚光器和反光镜起调节光强度和改变入射光的作用。物镜物镜：也叫接物镜（或镜头），它由：也叫接物镜（或镜头），它由15组透镜组成，其功能是聚集组透镜组成，其功能是聚集来自标本的光线，使标本第一次放大成一个倒立的实像。来自标本的光线，使标本第一次放大成一个倒立的实像。a放大倍数放大倍数：从：从3到到100，常用的低倍镜为，常用的低倍镜为10，高倍镜为，高倍镜为40，油镜头为油镜头为100，放大倍数的计算方法：，放大倍数的计算方法：物镜的放大倍数物镜的放大倍数=相当的光学筒长相当的光学筒长/物镜的焦距物镜的焦距（光学筒长（光学筒长=物镜上焦点平面到目镜下焦点平面的距离）物镜上焦点平面到目镜下焦点平面的距离）b工作距离工作距离：是指物镜最下面透镜的表面到盖玻片上表面之间的距离：是指物镜最下面透镜的表面到盖玻片上表面之间的距离。物镜的放大倍数越大，它的工作距离越小。低倍镜的工作距离为。物镜的放大倍数越大，它的工作距离越小。低倍镜的工作距离为6.5毫米，高倍镜为毫米，高倍镜为0.6毫米，而油镜头仅为毫米，而油镜头仅为0.2毫米，使用时要倍加注意。毫米，使用时要倍加注意。C焦点深度焦点深度：指视野中垂直范围内所能清晰观察到的界限。在用不同：指视野中垂直范围内所能清晰观察到的界限。在用不同倍数的物镜观察物体时，所能看到垂直的清晰范围是不同的。物镜的倍倍数的物镜观察物体时，所能看到垂直的清晰范围是不同的。物镜的倍数越大，焦点深度越浅。数越大，焦点深度越浅。D分辨力分辨力：是分辩被检物体细微结构的能力，也就是判别两个物体点：是分辩被检物体细微结构的能力，也就是判别两个物体点之间最短距离的本领。是衡量显微镜质量优劣的主要根据。分辨力与镜之间最短距离的本领。是衡量显微镜质量优劣的主要根据。分辨力与镜口率（又称数值孔径）关系很大，镜口率越大，分辩率越高，物镜的价口率（又称数值孔径）关系很大，镜口率越大，分辩率越高，物镜的价值也越高。值也越高。12 目镜目镜：也叫接目镜，其作用是将由物镜放大的倒立实像放大成一个：也叫接目镜，其作用是将由物镜放大的倒立实像放大成一个正立的虚像。目镜仅起放大物像的作用，并不增加显微镜的分辨力。正立的虚像。目镜仅起放大物像的作用，并不增加显微镜的分辨力。一般目镜有数个，它的放大倍数分别是一般目镜有数个，它的放大倍数分别是5，7，10，15等。等。聚光器聚光器：安装在载物台下，一般由：安装在载物台下，一般由23个凸透镜组成，上面的透镜是个凸透镜组成，上面的透镜是平面的。它的功用是收集从光源射来的平行光线，并汇集成光束，集平面的。它的功用是收集从光源射来的平行光线，并汇集成光束，集中在一点，以增强照明度，再经过被检物体照射到物镜中去。利用齿中在一点，以增强照明度，再经过被检物体照射到物镜中去。利用齿轮和齿条升降，能调节光线的强弱，使物像明晰。轮和齿条升降，能调节光线的强弱，使物像明晰。虹彩光圈虹彩光圈：装在聚光器之下，由一片压一片的铁片组成。调拔操纵：装在聚光器之下，由一片压一片的铁片组成。调拔操纵杆可以改变光圈的大小，调节光线的强弱。有的显微镜在载物台下安杆可以改变光圈的大小，调节光线的强弱。有的显微镜在载物台下安装有盘光阑，它是一片有数个口径大小不同并可转动的金属圆盘。它装有盘光阑，它是一片有数个口径大小不同并可转动的金属圆盘。它旋转时，可以调节下方反射来的光线强弱，以适于被检标本的要求。旋转时，可以调节下方反射来的光线强弱，以适于被检标本的要求。反光镜反光镜：安装在聚光器及虹彩光圈的下方。它可向各方向转动，它：安装在聚光器及虹彩光圈的下方。它可向各方向转动，它的作用是把光源射出的光线反射至聚光器或通光孔。它分平、凹两面的作用是把光源射出的光线反射至聚光器或通光孔。它分平、凹两面，凹面镜有聚光作用，在光源微弱时使用，如光源充足则用平面镜。，凹面镜有聚光作用，在光源微弱时使用，如光源充足则用平面镜。13 显微镜的成像原理显微镜的成像原理 14 显微镜的成像原理显微镜的成像原理 其实普通的光学显微镜是根据凸透镜的成像原理，要经过其实普通的光学显微镜是根据凸透镜的成像原理，要经过凸透镜的两次成像。第一次先经过物镜（凸透镜凸透镜的两次成像。第一次先经过物镜（凸透镜1 1）成像）成像，这时候的物体应该在物镜，这时候的物体应该在物镜(凸透镜凸透镜1 1）的一倍焦距和两倍）的一倍焦距和两倍焦距之间，根据物理学的原理，成的应该是放大的倒立的焦距之间，根据物理学的原理，成的应该是放大的倒立的实像。而后以第一次成的物像作为实像。而后以第一次成的物像作为“物体物体”，经过目镜的，经过目镜的第二次成像。由于我们观察的时候是在目镜的另外一侧，第二次成像。由于我们观察的时候是在目镜的另外一侧，根据光学原理，第二次成的像应该是一个虚像，这样像和根据光学原理，第二次成的像应该是一个虚像，这样像和物才在同一侧。因此第一次成的像应该在目镜（凸透镜物才在同一侧。因此第一次成的像应该在目镜（凸透镜2 2）的一倍焦距以内，这样经过第二次成像，第二次成的像）的一倍焦距以内，这样经过第二次成像，第二次成的像是一个放大的正立的虚像。如果相对实物说的话，应该是是一个放大的正立的虚像。如果相对实物说的话，应该是倒立的放大的虚像。倒立的放大的虚像。15 阅读阅读 ：显微镜的机械结构：显微镜的机械结构 本显微镜的机械结构紧凑，精度较高。粗、微调机构集中在仪器的下方，重心较本显微镜的机械结构紧凑，精度较高。粗、微调机构集中在仪器的下方，重心较低，安放稳定。载物台位于弧形镜臂上面，试样为复置安放，能胜任体积宽广的低，安放稳定。载物台位于弧形镜臂上面，试样为复置安放，能胜任体积宽广的被观察物体。目镜管呈被观察物体。目镜管呈45倾斜，工作者观察舒适。照明附设在圆形底盘内，便倾斜，工作者观察舒适。照明附设在圆形底盘内，便于移放。各部分构造分述如下，见图于移放。各部分构造分述如下，见图19。底座起支撑整个镜体的作用。为了防止震动，有的在底座上装有四只防震橡皮脚底座起支撑整个镜体的作用。为了防止震动，有的在底座上装有四只防震橡皮脚。照明照明7 照明设备装于底盘内，在底座内装有一低压（照明设备装于底盘内，在底座内装有一低压（68V，15W）灯泡作为光源）灯泡作为光源，由变压器降压供电，靠调节次级电压（，由变压器降压供电，靠调节次级电压（68V）来改变灯光的亮度，灯座具有偏）来改变灯光的亮度，灯座具有偏心环，为调整光源后固定灯座于底盘用。光源前有聚光镜组（一），反光镜及孔心环，为调整光源后固定灯座于底盘用。光源前有聚光镜组（一），反光镜及孔径光栏，安装在圆形底盘上，聚光镜组（二）及视场光栏安装在物镜支架上，它径光栏，安装在圆形底盘上，聚光镜组（二）及视场光栏安装在物镜支架上，它们组成显微镜的照明系统，使试样表面获得充分、均匀的照明。们组成显微镜的照明系统，使试样表面获得充分、均匀的照明。粗动调焦装置粗动调焦装置6 粗动手轮安装在镜体齿轮箱的两侧，位置适合观察者手臂支撑于粗动手轮安装在镜体齿轮箱的两侧，位置适合观察者手臂支撑于工作桌上操作。手轮传动内部的齿轮，使支承载物台的弯臂作上下升降。在粗动工作桌上操作。手轮传动内部的齿轮，使支承载物台的弯臂作上下升降。在粗动手轮之一侧，附设有制动环，用以紧固调焦正确后的载物台位置，使不易受到偶手轮之一侧，附设有制动环，用以紧固调焦正确后的载物台位置，使不易受到偶然震动而变异，尤以用于显微照相时的必要有效装置。如需紧固载物台不动，可然震动而变异，尤以用于显微照相时的必要有效装置。如需紧固载物台不动，可将制动环按右螺旋方向旋紧，如需再调节粗动手轮，则必须先将此环以反方向旋将制动环按右螺旋方向旋紧，如需再调节粗动手轮，则必须先将此环以反方向旋松，否则易损坏机件。松，否则易损坏机件。图图19 XJB1 型金相显微镜外形结构图型金相显微镜外形结构图 微动调焦装置微动调焦装置5 微动手轮与粗动手轮同轴，用于使显微镜本体沿着滑轨缓慢移动微动手轮与粗动手轮同轴，用于使显微镜本体沿着滑轨缓慢移动。左侧的手轮上刻有分度，每分格表示微动升降。左侧的手轮上刻有分度，每分格表示微动升降0.002mm，机体齿轮箱刻有二条，机体齿轮箱刻有二条白线