月季的花药培养详解.ppt

请拿出你的请拿出你的38号号导学案，导学案，课本，双色笔和典题本，还有课本，双色笔和典题本，还有你的你的激情激情！今日赠言：今日赠言：当一个人先从自己的当一个人先从自己的内心开始奋斗，他就是个有价值内心开始奋斗，他就是个有价值的人。的人。花中皇后月季又称“月月红”，自然花期5至11月，开花连续不断，通常扦插就可以成活。课题2 月季的花药培养【课题目标目标】1.识记被子植物花粉发育的过程。识记被子植物花粉发育的过程。2.通过学习花药培养的基本技术，通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力。释实验现象的能力。【课题重点重点】1.被子植物花粉发育过程。被子植物花粉发育过程。2.花药离体培养过程。花药离体培养过程。【课题难点难点】花药离体培养过程。花药离体培养过程。【导学案反馈导学案反馈】1.1.优点优点：书写认真，整体完成情况较好。：书写认真，整体完成情况较好。2.2.不足不足：探究能力有待提高探究能力有待提高 。解决实际问题的能力较弱。解决实际问题的能力较弱。部分同学预习不充分，答题欠思考。部分同学预习不充分，答题欠思考。3.3.改进措施改进措施：认真研读课本，理清思路，注重分析，：认真研读课本，理清思路，注重分析，养成好的自学习惯。养成好的自学习惯。小小 组组 优优 秀秀 个个 人人 得分得分 1组组 2组组 3组组 4组组 5组组 6组组 小小 组组 优优 秀秀 个个 人人 得分得分 7组组 8组组 9组组 10组组 11组组 知识回顾 单倍体育种的过程？单倍体育种的过程？花药离体培养（N）单倍体植株（N）秋水仙素处理，使染色体翻倍 植株（2N）特点：1 明显缩短育种年限 2 后代植株都为纯合子。正常植株（2N）花的结构 花托 花萼 花瓣 雄蕊 花药 花丝 雌蕊 柱头 花柱 子房 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉（一）被子植物的花粉发育 1 雄蕊 一、基础知识 2 花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成的单倍体的生殖细胞.被子植物花粉的发育过程 小孢子母细胞 减数分裂 4个小孢子(小孢子四分体时期)小孢子(单核居中期)小孢子(单核靠边期)小孢子 生殖细胞核+花粉管细胞核 有丝分裂（花粉粒的双核期）生殖细胞将再进行一次有丝分裂，形成两个精子 小孢子母细胞（2n）小孢子时期（n）四分体时期（n）双核期 4个生殖细胞核（n）4个花粉管细胞核（n）4个生殖细胞（n）4个营养细胞（n）42个精子(n)有丝分裂 减数分裂 单核期（n）有丝分裂 注意：二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）4个小孢子 减数分裂 有丝分裂 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有丝分裂 8个精子 1花粉母细胞 三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个花粉管细胞核和两个精子。例题1：两个精子和花粉管细胞核的基因型相同？2N N N N 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（）A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央细胞中央 BD 注：花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒，每个花粉粒的细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞核和1个生殖细胞核，每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。雌蕊 的结构（二）产生花粉植株的两种途径 移栽 花药中的花粉 胚状体 脱分化 愈伤组织 花药中的花粉 脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导 生根 体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似 原因：培养基中的激素种类及浓度配比 部分花药通过胚状体途径形成小植株 烟草花药培养 胚状体发育途径胚状体发育途径 愈伤组织转接种到再生培养基 愈伤组织分化形成再生植株 水稻花药培养 愈伤组织发育途径愈伤组织发育途径 部分花药产生愈伤组织 接种在平板上的水稻花药 1、材料的选择、材料的选择 不同植物的诱导成功率不同不同植物的诱导成功率不同.同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响直接的影响.（一般选月季的初花期）（一般选月季的初花期）合适的花粉发育期合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间）（单核居中期与靠边期之间）2、培养基的组成、培养基的组成（MSMS培养基培养基+不同比例的植物生不同比例的植物生长调节激素）长调节激素）此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等(三)、影响花药培养的主要因素 注意：选择最合适的花粉发育时期:单核期 不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易破碎；不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材料消毒带来困难困难；挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的花蕾，微生物少，易消毒。实验操作实验操作 一、材料的选取一、材料的选取 二、材料的消毒二、材料的消毒 三、接种和培养三、接种和培养（一）材料选取（一）材料选取 2、通过、通过镜检镜检来确定是否处于适宜的发育期来确定是否处于适宜的发育期。方法：方法：醋酸洋红法醋酸洋红法(将染色体染成红色将染色体染成红色)焙花青焙花青-铬矾法铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色花粉细胞核染成蓝黑色)。1、从花药看：月季的初花期 从花粉看：单核期 从花蕾看：完全未开放的 花药（载玻片上）1%的醋酸洋红1滴用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片镜检（花粉粒的细胞核被染成红色）花药（在卡诺氏固定液中处理20min）取出，置于载玻片上焙花青铬矾溶液染色盖上盖玻片镜检（花粉粒的细胞核被染成蓝黑色）月季花药培养时的花粉粒最好是（）A、四分体时期 B、二核或三核花粉粒 C、单核期 C（二）材料的消毒（二）材料的消毒 5 5、无菌水冲洗、无菌水冲洗3 35 5次次 花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态 1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？（三）接种和培养（三）接种和培养 1 1 灭菌后花蕾，要在灭菌后花蕾，要在 下除去萼片和花瓣，下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。并立即将花药接种到培养基上。3 通常每瓶接种花药 ，温度控制在 左右，。幼小植株形成后才 。2 在剥离花药时，要尽量 （否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底 ，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。4 进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的变化 无菌条件 不损伤花药 去除花丝 7-10个 25 不需要光照 需要光照 主要原因是花粉管核和生殖核融合造成的 植物组织培养技术与花药培养技术的比较 项目项目 植物组织培养植物组织培养 花药培养技术花药培养技术 相同点相同点 1、培养基配制方法、无菌技术及接种操、培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。作等基本相同。2、都经过了脱分化、都经过了脱分化 不同点不同点 1、离体培养的外植体为体细胞。2、有丝分裂的过程，染色体数量不变。1、花粉是生殖细胞，得到的单倍体植株，弱小且高度不育。2、秋水仙素处理，染色体加倍，恢复正常的染色体数，为纯种。课题成果评价课题成果评价 一一 选材是否恰当选材是否恰当 二二 无菌技术是否过关无菌技术是否过关 三三 接种是否成功接种是否成功 人工种子：胚状体/顶芽/不顶芽等+人工种皮+人工胚乳 课外知识 练习：小麦高杆（D）对矮杆（d）为显性，抗锈病（T）对不抗锈病（t）为显性，现有高杆抗锈病和矮杆不抗病的两种纯合体，要获得矮杆抗锈病的良种，可用杂交育种和单倍体育种法，步骤如下：高杆抗锈病（DDTT）矮秆不抗锈病 （ddtt）F1：的基因型和表现型 a 各种配子的种类 a 符合要求的单倍体的基因型 良种的基因型表现型 单倍体育种方法的主要优点是 。1、可以明显缩短育种年限 2、后代为纯合子 P：DdTt，高秆抗锈病 DT，Dt,dT,dt ddTT矮秆锈病 杂交育种 花药离体培养 DT，Dt,dT,dt 秋水仙素处理 内容：内容：1.1.导学案上不能自己解决的问题。导学案上不能自己解决的问题。2.2.合作探究部分的问题。合作探究部分的问题。3.3.在预习过程中发现的新问题。在预习过程中发现的新问题。要求：要求：1.1.分层讨论，先分层讨论，先一对一一对一再组内共同讨论，总结再组内共同讨论，总结完善自纠成果完善自纠成果。2.2.时刻联系课本，注重效率，时刻联系课本，注重效率，及时及时整理总结整理总结，记录组内疑问记录组内疑问。3.3.学习组长和学科组长宏观调控，做好学习组长和学科组长宏观调控，做好结果反馈结果反馈及展示点评准备。及展示点评准备。4.4.每个同学都要做到：每个同学都要做到：认真、热烈、高效、有序、激情、投入。认真、热烈、高效、有序、激情、投入。分层目标：分层目标：A A层：深入探究，解决所有疑难问题，做好总结与点评准备；层：深入探究，解决所有疑难问题，做好总结与点评准备；B B层：高效讨论，总结探究点答案，并找出自己的疑难点；层：高效讨论，总结探究点答案，并找出自己的疑难点；C C层：能够对比区别核心内容，杂交育种和诱变育种。层：能够对比区别核心内容，杂交育种和诱变育种。展示基本要求：展示基本要求：言简意赅；言简意赅；认真规范认真规范;注重小结；注重小结；双色粉笔；双色粉笔；注意效率，可多人展示，务必在注意效率，可多人展示，务必在6分钟内完成展示内容。分钟内完成展示内容。展示内容展示内容 小组小组 方式方式 展示内展示内容容 小组小组 方式方式 自主探究一自主探究一 11 口头口头 探究探究1 8 书面书面 自主探究二自主探究二 10 口头口头 探究探究2 7 书面书面 自主探究三自主探究三和四和四 9 口头口头 探究探究3和和4 6、5、4 书面书面 点评要求：点评要求：注意仪态；注意仪态；声音洪亮声音洪亮 拓展提升；拓展提升；引导互动引导互动 其他同学：其他同学：认真思考；认真思考；做好笔记做好笔记 注意倾听；注意倾听；补充质疑补充质疑 交换点评交换点评 学科班长：学科班长：1.1.回扣目标回扣目标 总结收获。总结收获。学科班长：学科班长：1.1.回扣目标回扣目标 总结收获。总结收获。2.2.评出优秀小组和个人评出优秀小组和个人。