乙肝五项修改版.ppt

目录 1.1.乙肝的定义及传播途径乙肝的定义及传播途径 2.2.乙肝五项的具体内容乙肝五项的具体内容 3.3.乙肝五项的检测方法及原理乙肝五项的检测方法及原理 4.4.乙肝五项各项指标详解乙肝五项各项指标详解 5.5.乙肝五项不同结果的意义乙肝五项不同结果的意义 一、乙肝的定义：慢性乙型肝炎（简称乙肝）是指乙肝病毒检测为阳性，病程超过半年或发病日期不明确而临床有慢性肝炎表现者。临床表现为乏力、畏食、恶心、腹胀、肝区疼痛等症状。肝大，质地为中等硬度，有轻压痛。病情重者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌、脾大，肝功能可异常或持续异常。根据临床表现分为轻度、中度和重度。乙肝的传播途径 血液传播：主要包括输血及血制品、注射器针头及针炙、牙科及手术器械等医疗行为，血液传播：主要包括输血及血制品、注射器针头及针炙、牙科及手术器械等医疗行为，纹身、纹眉、穿耳眼、做双眼皮、刮面等具有损伤性的美容行为。纹身、纹眉、穿耳眼、做双眼皮、刮面等具有损伤性的美容行为。母婴传播：指携带乙肝病毒的母亲在怀孕期、分娩期、哺乳期将乙肝病毒传播给婴儿母婴传播：指携带乙肝病毒的母亲在怀孕期、分娩期、哺乳期将乙肝病毒传播给婴儿 的一种方式。的一种方式。密切接触传播：家庭日常生活可造成传播的情况主要有：密切接触传播：家庭日常生活可造成传播的情况主要有：HBsAgHBsAg阳性人的创伤出血、阳性人的创伤出血、月经血、痔疮血污染家庭环境；与月经血、痔疮血污染家庭环境；与HBsAgHBsAg阳性人共用牙刷、口杯、毛巾和剃刀；阳性人共用牙刷、口杯、毛巾和剃刀；HBsAgHBsAg阳性人同乳幼儿密切接触，尤其是口喂小儿。阳性人同乳幼儿密切接触，尤其是口喂小儿。性接触传播：男女性生活可通过精液、阴道分泌液传播乙肝病毒。性接触传播：男女性生活可通过精液、阴道分泌液传播乙肝病毒。乙肝五项的概念 乙肝五项也称为乙肝两对半，包括乙肝表面抗原（用HBSAg表示）、乙肝表面抗体（用抗-HBS表示）、e抗原（用HBeAg表示）、e抗体（用抗-HBe表示）、核心抗体（用抗-HBc表示）。乙肝五项检查，便是抽出患者静脉血，检测血液中乙肝病毒的血清学标志。金标法 金标法乙肝两对半快速检测板是采用层析法检测乙肝病毒五标法乙肝两对半快速检测板是采用层析法检测乙肝病毒五项血清学标志项血清学标志HBsAgHBsAg、HBsAbHBsAb、HBeAgHBeAg、HBeAbHBeAb、HBcAbHBcAb。酶免法（ELISA法）ELISAELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有法中有3 3种必要的试剂：固相的抗原或抗体，酶标记的抗原种必要的试剂：固相的抗原或抗体，酶标记的抗原或抗体，酶作用的底物。或抗体，酶作用的底物。HBsAgHBsAg、HBeAgHBeAg检测试纸条采用双抗体夹心法测抗原检测试纸条采用双抗体夹心法测抗原；HBsAbHBsAb检测试纸条采用双抗原夹心法；检测试纸条采用双抗原夹心法；HBeAbHBeAb、HBcAbHBcAb此两项在检测试纸条上采用了竞争抑制法。由于此两项在检测试纸条上采用了竞争抑制法。由于e e抗原较核心抗原仅多抗原较核心抗原仅多2929个氨基酸，个氨基酸，e e抗原很容易转变成核心抗原抗原很容易转变成核心抗原，因此，因此HBcAbHBcAb和和HBeAbHBeAb的测定均采用竞争法的测定均采用竞争法 乙肝五项的检测方法及原理 ELISAELISA法在临床实验室已得到普遍应用，特别是用于各种肝炎法在临床实验室已得到普遍应用，特别是用于各种肝炎 标志物的检测，但标志物的检测，但ELISAELISA法需时较长法需时较长,其主要原因是由于液相中的抗原（抗其主要原因是由于液相中的抗原（抗 体）需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反应。但作为基层医疗单位、急体）需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反应。但作为基层医疗单位、急 诊病人和手术前的应急的单个标本检测，包括现在的血站的流动采血点献诊病人和手术前的应急的单个标本检测，包括现在的血站的流动采血点献 血员的快速筛检是根本无法用血员的快速筛检是根本无法用ELISAELISA法来实现的。法来实现的。2020世纪世纪7070年代初，年代初，FANKLFANKL 等建立了免疫胶体金技术，开始作为一种免疫标记技术而被使用，随后逐等建立了免疫胶体金技术，开始作为一种免疫标记技术而被使用，随后逐 渐广泛应用于免疫检测技术。各种金标检测条，检测卡已被广泛使用。相渐广泛应用于免疫检测技术。各种金标检测条，检测卡已被广泛使用。相 对而言，对而言，ELISAELISA法检测准确性要高于金标法，法检测准确性要高于金标法，金标法检测限为金标法检测限为1ng/ml,ELISA1ng/ml,ELISA 法灵敏度为法灵敏度为0.5ng/ml0.5ng/ml，国产，国产ELISAELISA法试剂最高灵敏度可达法试剂最高灵敏度可达 0.1ng/ml0.1ng/ml。故在。故在 实际应用中，根据实际情况两种方法联合起来，特别是实际应用中，根据实际情况两种方法联合起来，特别是 在大批量检测时可在大批量检测时可 用金标法作为初筛，这样可大量节约时间，更快速、准确为病人服务。用金标法作为初筛，这样可大量节约时间，更快速、准确为病人服务。（1 1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。合的抗体及杂质。（2 2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。他未结合的物质。（3 3）加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻）加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。检物质的量正相关。（4 4）加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜）加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。色反应的程度进行该抗原的定性或定量。根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。双位点一步法即在双抗体夹心法基础上使用针对抗原分子上两个不双位点一步法即在双抗体夹心法基础上使用针对抗原分子上两个不同表位的单克隆抗体，分别作为固相抗体和酶标抗体。测定时将待检标本同表位的单克隆抗体，分别作为固相抗体和酶标抗体。测定时将待检标本和酶标抗体同时加入进行反应，两种抗体互不干扰，经一次温育和洗涤后和酶标抗体同时加入进行反应，两种抗体互不干扰，经一次温育和洗涤后，即可加入底物进行显色测定。，即可加入底物进行显色测定。钩状效应：双位点一步法中，如果待检测标本中抗原浓度过高，过钩状效应：双位点一步法中，如果待检测标本中抗原浓度过高，过量抗原则会分别与固相抗体和酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，类量抗原则会分别与固相抗体和酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，类似于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，所得结果将低于实际的含量，这种似于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，所得结果将低于实际的含量，这种现象称之为钩状效应。现象称之为钩状效应。固相抗体 底物 竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原为例，酶标抗原和待测抗原对固相特异性抗体具有相同的结合力为例，酶标抗原和待测抗原对固相特异性抗体具有相同的结合力，因此两者竞争结合固相特异性抗体。反应体系中，固相抗体和，因此两者竞争结合固相特异性抗体。反应体系中，固相抗体和酶标抗原是固定限量，且前者的结合位点少于酶标和非酶标抗原酶标抗原是固定限量，且前者的结合位点少于酶标和非酶标抗原的分子数量和。免疫反应后，结合于固相的酶标抗原量与标本中的分子数量和。免疫反应后，结合于固相的酶标抗原量与标本中待检抗原含量成反比。待检抗原量越多，相应的结合特异性抗体待检抗原含量成反比。待检抗原量越多，相应的结合特异性抗体越多，而酶标抗原和固相抗体结合越少，底物显色反应浅；反之越多，而酶标抗原和固相抗体结合越少，底物显色反应浅；反之则显色越深，即底物显色与待检标本中抗原含量成反比。则显色越深，即底物显色与待检标本中抗原含量成反比。间接法检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记间接法检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。即将已知抗原吸附于固相载体上。待检标本中相应抗体。即将已知抗原吸附于固相载体上。待检标本中相应抗体与之结合，形成固相抗原与之结合，形成固相抗原-抗体复合物，再用酶标二抗与抗体复合物，再用酶标二抗与固相免疫复合物中的抗体结合，形成固相抗原固相免疫复合物中的抗体结合，形成固相抗原-抗体抗体-酶标酶标二抗复合物，根据加底物后的显色程度确定待检抗体含量二抗复合物，根据加底物后的显色程度确定待检抗体含量。捕获法的原理是将抗人捕获法的原理是将抗人IgMIgM抗体（抗人抗体（抗人IgMIgM链抗链抗体）吸附于固相载体上，待检标本中的体）吸附于固相载体上，待检标本中的IgMIgM类抗体多被类抗体多被固相抗体捕获。加入特异抗原与固相抗体捕获的固相抗体捕获。加入特异抗原与固相抗体捕获的IgMIgM抗抗体结合，再加入抗原特异的酶标抗体，形成固相抗人体结合，再加入抗原特异的酶标抗体，形成固相抗人IgMIgM-IgMIgM-抗原抗原-酶标抗体复合物。最后根据加底物后的酶标抗体复合物。最后根据加底物后的显色程度确定待检显色程度确定待检IgMIgM抗体的含量。固相捕获法主要用抗体的含量。固相捕获法主要用于血清中于血清中IgMIgM类抗体的测定。类抗体的测定。1 1、HBsAg(HBsAg(乙肝表面抗原乙肝表面抗原)它是乙肝病毒的外壳物质，本身没它是乙肝病毒的外壳物质，本身没有传染性。它的阳性往往提示有完整的病毒颗粒存在。有传染性。它的阳性往往提示有完整的病毒颗粒存在。2 2、抗一、抗一HBs(HBs(乙肝表面抗体，乙肝表面抗体，HbsAb)HbsAb)它是它是HBVHBV自然感染人恢复自然感染人恢复期出现的抗体，此时期出现的抗体，此时HBsAgHBsAg自然消失了。它的存在提示人对乙肝有自然消失了。它的存在提示人对乙肝有了抵抗力，不会再得乙型肝炎了。我国有了抵抗力，不会再得乙型肝炎了。我国有27.42%27.42%的人口有此抗体。的人口有此抗体。3 3、HBeAg(HBeAg(乙型肝炎乙型肝炎e e抗原抗原)它产生于病毒内部，可分泌血液它产生于病毒内部，可分泌血液中，中，e e抗原阳性提示病毒有活动，乙肝病毒复制速度很快，而且是抗原阳性提示病毒有活动，乙肝病毒复制速度很快，而且是具有传染性的指标。具有传染性的指标。4 4、抗、抗HBe(HBe(乙肝乙肝e e抗体，抗体，HBeAb)HBeAb)是人体针对是人体针对e e抗原产生的一抗原产生的一种蛋白物质，阳性结果提示病毒的传染性变弱，病情已处于恢复种蛋白物质，阳性结果提示病毒的传染性变弱，病情已处于恢复阶段。但另一种情况可能是乙肝病毒发生了变异，此时血清中无阶段。但另一种情况可能是乙肝病毒发生了变异，此时血清中无HBeAgHBeAg，但可产生抗一，但可产生抗一HBeHBe，出现这种情况就需要查，出现这种情况就需要查HBVHBVDNADNA来判来判定是否还有病毒存在。定是否还有病毒存在。5 5、抗一、抗一HBc(HBc(乙肝核心抗体，乙肝核心抗体，HbcAb)HbcAb)这种抗体分这种抗体分IgMIgM和和lgGl