乙肝五项、梅毒螺旋体抗体的检测及应用孕前优生健康检查临床检验操作技术培训孕前优生健康检查临床检验操作技术培训河南省人口和计划生育科学技术研究院免疫层析快速检测技术免疫层析快速检测技术•历史：放射免疫测定1960酶免疫测定1970荧光免疫测定1980-1990化学发光免疫测定1990膜固相免疫测定1990原理原理•将特异的抗原（或抗体）先固定于固相膜的某一区带，当该干燥的固相膜一端浸入样品后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有经过标记的抗体区域时，样品中相应的抗原即与该标记抗体发生特异性结合，抗原抗体复合物移动到特定区域被捕获，使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。•特点：•快速•简便•可单份检测•稳定性好•检测种类多•可测定物质范围广•不足之处•敏感度略低，价格略高（与ELISA比）•不易制备定量、半定量试剂•质量控制困难免疫层析快速检测试剂结构图免疫层析快速检测试剂结构图免疫层析快速检测常用的结合物免疫层析快速检测常用的结合物•胶体金•乳胶颗粒胶体金胶体金•也称金溶胶，是由金盐还原形成的金颗粒悬液。•由一个基础金核及包围在外的离子层构成。呈球形（小颗粒）或椭圆形（大颗粒）。•对电解质敏感，对试验有影响。•呈色性：胶体金的光散射性与溶胶颗粒的大小密切相关，一旦颗粒大小发生变化，光散射也随之发生变异，产生肉眼可见的显著的颜色变化。固相膜种类固相膜种类•玻璃纤维素膜尼龙膜•聚偏氟乙稀膜硝酸纤维素膜•固相NC膜固相膜特点固相膜特点•多孔性毛细管作用•非共价键高度吸附高度敏感性抗原或抗体易于漂洗操作简便免疫层析快速检测技术分类免疫层析快速检测技术分类•双抗体夹心法测抗原•间接法测抗体•双抗原夹心法测抗体•竞争法测抗体操作步骤操作步骤•试剂盒先恢复室温，从原包装铝箔袋中取出试剂盒，在1小时内尽快地使用。•将试剂盒置于干净平坦的台面上，用塑料吸管垂直滴加3滴（100微升）无气泡的血清/血浆于试剂盒的加样孔内。•等待紫红色条带的出现，测试结果应在15分钟内读取。20分钟后判断无效。结果判断结果判断夹心法结果判断竞争法结果判断质量控制质量控制•应避免样品溶血。溶血、粘稠及高脂标本可能会导致检测结果不稳定。•实验环境应保持一定温度，避风。避免在过高温度下进行实验。•试剂从包装中取出后，应尽快进行实验，避免放置于空气中过长时间，导致受潮。•试剂若为室温应注意防潮；若低温下保存应平衡至室温方可...
