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1 第二章 一般血液学检验 The General Examination Of Hematology 2 1.The method of determination and clinical significance of red blood cell,white blood cell and hemoglobin.2.Red blood cell and white blood cell morphology evaluation and clinical significance.3.Diagnosis and classification of anemia.4.Blood cell differential count and its clinical significance.5.Quality control and estimate of red blood cell examination and white blood cell examination.KEY POINTSKEY POINTS 3 主要内容 第一节第一节 外周血液血细胞形态学检验外周血液血细胞形态学检验 第二节第二节 红细胞检验红细胞检验 第三节第三节 白细胞检验白细胞检验 4 第一节第一节 外周血液血细胞外周血液血细胞 形态学检验形态学检验 一、血细胞涂片的制作和染色一、血细胞涂片的制作和染色 1 1、血涂片的制作、血涂片的制作 手工涂片法手工涂片法 自动涂片法自动涂片法 5 2 2、血涂片的染色、血涂片的染色 主要成分：主要成分：碱性美兰碱性美兰与与酸性伊红酸性伊红 血细胞是由蛋白质组成的，带有氨基端和血细胞是由蛋白质组成的，带有氨基端和羧基端。各种血细胞的化学性质不同，对羧基端。各种血细胞的化学性质不同，对染料的亲和力也不同。物理吸附、化学亲染料的亲和力也不同。物理吸附、化学亲和与电荷作用的共同结果。如血红蛋白是和与电荷作用的共同结果。如血红蛋白是碱性蛋白，就和酸性碱性蛋白，就和酸性伊红伊红结合；细胞核蛋结合；细胞核蛋白是酸性蛋白，就和碱性白是酸性蛋白，就和碱性美兰美兰结合；还有结合；还有一种颗粒两种染料都结合，为中性颗粒。一种颗粒两种染料都结合，为中性颗粒。瑞氏染色瑞氏染色 6 显微镜检查法显微镜检查法 计算机图象分析计算机图象分析 二、红细胞形态检查二、红细胞形态检查 方方 法法 7 形态形态:表面积表面积/体积比值大；体积比值大；增加气体透过面积；增加气体透过面积；作为呼吸载体作为呼吸载体,结合、运结合、运输氧和输氧和COCO2 2。1 1、正常红细胞形态、正常红细胞形态 8 大小异常大小异常 染色异常染色异常 形态异常形态异常 结构异常结构异常 2 2、异常红细胞形态、异常红细胞形态 9 大小异常 小红细胞小红细胞 大红细胞大红细胞 还包括巨红细胞和红细胞大小不等。还包括巨红细胞和红细胞大小不等。10 11 染色异常染色异常 低色素性：低色素性：中央淡染区中央淡染区 扩大，甚至中间不着色。扩大，甚至中间不着色。高色素性：高色素性：红细胞内生理性中央浅染区缩红细胞内生理性中央浅染区缩小甚至消失，整个红细胞均染成红色，系小甚至消失，整个红细胞均染成红色，系红细胞内血红蛋白含量增高所致。红细胞内血红蛋白含量增高所致。嗜多色性：嗜多色性：红细胞呈灰蓝色或灰红色，胞红细胞呈灰蓝色或灰红色，胞体较大，属于尚未完全成熟的红细胞，提体较大，属于尚未完全成熟的红细胞，提示骨髓造红细胞能力活跃。示骨髓造红细胞能力活跃。12 形态异常 水滴型红细胞 刺毛红细胞 椭圆型红细胞 类型很多，原因复杂 常见有：13 口形红细胞 球型红细胞 靶形红细胞 还包括新月形、缗钱状、裂片形等。14 结构异常结构异常 嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞 染色质小体染色质小体 卡卡-波环波环 有核红细胞有核红细胞 15 16 17 18 卡卡-波环波环 胞质中出现的紫红色细线圈状结构，环行或8字形，常与染色质小体同时存在，可见于白血病、增生性贫血等。19 三、白细胞形态检查三、白细胞形态检查 20 1 1、中性粒细胞核象变化、中性粒细胞核象变化 成熟成熟 幼稚幼稚 21（1）核象左移 外周血中杆状核超过外周血中杆状核超过5%5%和和/或出现杆状核或出现杆状核以前的细胞，为核左移以前的细胞，为核左移 。见于急性感染、。见于急性感染、急性中毒、急性溶血。急性中毒、急性溶血。22（2 2）核象右移）核象右移 一般外周血中的中性粒细胞以一般外周血中的中性粒细胞以3 3叶为主，叶为主，如果如果5 5叶以上超过叶以上超过3%3%，为核右移。大多数，为核右移。大多数由于缺乏造血物质，如恶性贫血、巨幼由于缺乏造血物质，如恶性贫血、巨幼细胞性贫血。细胞性贫血。23 空泡变性空泡变性 棒状小体棒状小体 中毒颗粒中毒颗粒 杜勒小体杜勒小体 2 2、中性粒细胞其它异常、中性粒细胞其它异常 24 25 26 27 在传染性单核细胞增多征、病毒性肺炎、在传染性单核细胞增多征、病毒性肺炎、病毒性肝炎等病毒感染时或过敏原的刺激病毒性肝炎等病毒感染时或过敏原的刺激下，可使得淋巴细胞增生，并出现形态学下，可使得淋巴细胞增生，并出现形态学的变化。的变化。分为分为空泡型空泡型、不规则型不规则型和和幼稚型幼稚型 3 3、异常淋巴细胞、异常淋巴细胞 28 29 1 1、方法、方法 显微镜计数法显微镜计数法 血细胞分析仪法血细胞分析仪法 一、红细胞计数一、红细胞计数 第二节第二节 红细胞检验红细胞检验 30 成年男性：成年男性：(4.0(4.05.5)5.5)10101212/L/L 成年女性：成年女性：(3.5(3.55.0)5.0)10101212/L/L 新生儿：新生儿：(6.0(6.07.0)7.0)10101212/L/L 2 2、参考值、参考值 31 3 3、临床意义、临床意义 A A、生理性增多、生理性增多 新生儿、高原生活、剧烈运动、精神新生儿、高原生活、剧烈运动、精神因素等因素等 （1 1）增）增 多多 32（B B）绝对性增多：）绝对性增多：继发性继发性 心、肺疾病 异常血红蛋白病 某些肿瘤等 原发性原发性 真性红细胞增多症 病理病理性增性增多多 （A A）相对性增多：相对性增多：血浆水分丢失，有形成分相对增 加，绝对值没有发生变化 33 生理性减少生理性减少 儿童、孕妇、老年人儿童、孕妇、老年人 病理性减少病理性减少 A A、骨髓造血功能低下、骨髓造血功能低下 如再障如再障 B B、造血原料缺乏、造血原料缺乏 如缺铁贫、巨幼贫如缺铁贫、巨幼贫 C C、红细胞破坏增加、红细胞破坏增加 如溶贫如溶贫 D D、红细胞丢失过多、红细胞丢失过多 （2 2）减）减 少少 34 二、血红蛋白测定（二、血红蛋白测定（hemoglobin Hbhemoglobin Hb）35 血红蛋白是由血红蛋白是由四条多肽链四条多肽链组成的组成的,二二条条 链链(每条含每条含141141个氨基酸残基个氨基酸残基)和和二条二条 链链(每条含每条含146146个氨基酸残基个氨基酸残基)。每条多肽链的。每条多肽链的螺旋结构形成一个疏水性的空间，可保护血螺旋结构形成一个疏水性的空间，可保护血红素分子不与水接触，红素分子不与水接触，FeFe2+2+不被氧化。不被氧化。FeFe2+2+位位于血红素卟啉环的中央，与卟啉环的于血红素卟啉环的中央，与卟啉环的4 4个吡个吡咯基以及多肽链上的组氨酸形成六配位体。咯基以及多肽链上的组氨酸形成六配位体。每个血红蛋白分子可逆结合每个血红蛋白分子可逆结合4 4个氧分子，每个氧分子，每克血红蛋白可结合克血红蛋白可结合1.34 mL1.34 mL氧气。氧气。36 1 1、测定方法、测定方法 氰化高铁血红蛋白法（氰化高铁血红蛋白法（HiCN）十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SDSSDS-HbHb）叠氮高铁血红蛋白法（叠氮高铁血红蛋白法（HiNHiN3 3）37 2、参考值、参考值 成年男性：成年男性：120120160g/L160g/L 成年女性：成年女性：110110150g/L150g/L 新生儿：新生儿：170170200g/L200g/L 38 测定方法测定方法 手工温氏比积法手工温氏比积法 分析仪微量法分析仪微量法 三、血细胞比容测定三、血细胞比容测定 （hematocrit，Hct）红细胞比积（红细胞比积（Hct、PCV ）：又叫红细）：又叫红细胞体积分数。指在一定条件下经离心沉胞体积分数。指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。的比值。39【参考值参考值】男性：男性：0.400.40-0.50L/L0.50L/L（4040-5050容积容积%）。）。女性：女性：0.370.37-0.48L/L0.48L/L（3737-4848容积容积%）。）。【临床意义临床意义】红细胞比积增高：红细胞比积增高：相对性增多（血液浓缩）。相对性增多（血液浓缩）。绝对性增高（真性红细胞增多症）。绝对性增高（真性红细胞增多症）。红细胞比积减少：红细胞比积减少：见于各种贫血。见于各种贫血。40 四、红细胞相关参数的计算四、红细胞相关参数的计算 1 1、平均红细胞容积（、平均红细胞容积（mean corpuscular volume,MCV）。）。MCV=每升血液中红细胞比积每升血液中红细胞比积 每升血液中红细胞数每升血液中红细胞数【参考范围】80809595flfl 41 四、红细胞相关参数的计算四、红细胞相关参数的计算、平均红细胞血红蛋白量、平均红细胞血红蛋白量 （mean corpuscular hemoglobin,MCH）MCH=每升血液中血红蛋白量每升血液中血红蛋白量 每升血液中红细胞数每升血液中红细胞数【参考范围】27273131pgpg 42.平均红细胞血红蛋白浓度平均红细胞血红蛋白浓度（mean copuscular hemoglobin concentration，MCHC）四、红细胞相关参数的计算四、红细胞相关参数的计算 MCHC=每升血液中红细胞比积 每升血液中血红蛋白量【参考范围参考范围】320320360360g/Lg/L（32%32%36%36%）43 四、红细胞相关参数的计算四、红细胞相关参数的计算、红细胞体积分布宽度、红细胞体积分布宽度（RDW）定义：定义：是反映周围血红细胞间体积差异的参数是反映周围血红细胞间体积差异的参数通过变异系数定量的表示红细胞体积分通过变异系数定量的表示红细胞体积分布的离散程度。布的离散程度。原理：原理：血细胞自动分析仪通过电阻的改变，产血细胞自动分析仪通过电阻的改变，产生脉冲信号的强弱生脉冲信号的强弱 。【参考范围参考范围】成人：成人：15.0%15.0%新生儿：男新生儿：男15.9%15.9%女女16.16.2%2%44【临床意义】根据上述指标可进行贫血的形态学分类。根据上述指标可进行贫血的形态学分类。四、红细胞相关参数的计算四、红细胞相关参数的计算 45 各各种种贫贫血血时时三三项项指指数数的的变变化化 MCVMCV MCHMCH MCHCMCHC 大大细细胞胞性性贫贫血血 正正常常 正正常常 正正常常 正正常常细细胞胞性性贫贫血血 正正常常 正正常常 正正常常 单单纯纯小小细细胞胞贫贫血血 正正常常 正正常常 正正常常 小小细细胞胞低低色色素素性性贫贫血血 正正常常 正正常常 正正常常 46 MCVMCV RDWRDW IDAIDA 巨幼贫巨幼贫 溶贫溶贫 铁粒幼贫血铁粒幼贫血 再障再障 单纯小细胞性贫血单纯小细胞性贫血 47 五、网织红细胞（reticulocyte）计数 界于晚幼红细胞和成熟红界于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞。细胞之间的过渡阶段细胞。因其胞质中残存的核糖核因其胞质中残存的核糖核酸经碱性染料活体染色后，酸经碱性染料活体染色后，呈现点状或线网状结构，呈现点状或线网状结构，故名故名网织红细胞网织红细胞。48、计数方法、计数方法（1