T淋巴细胞结果的解读全国会吴铁军.ppt

淋巴细胞分化图淋巴细胞分化图 按按T T细胞所处的活化阶段细胞所处的活化阶段 初始初始T细胞（细胞（naive T cell）效应效应T细胞（细胞（effector T cell）记忆性记忆性T细胞（细胞（memory T cell）按按T T细胞表面受体（细胞表面受体（TCRTCR）分类分类 +T细胞细胞 +T细胞细胞 按按T T细胞细胞CD4CD4和和CD8CD8分子表型分子表型 CD4+T细胞细胞 CD8+T细胞细胞 按按T T细胞的功能分类细胞的功能分类 Th（辅助（辅助T细胞）细胞）TS（抑制（抑制T细胞）细胞）Tr（调节（调节T细胞）细胞）T T淋巴细胞的分类方法淋巴细胞的分类方法 外周血中各亚群占淋巴细胞总数的比例外周血中各亚群占淋巴细胞总数的比例 60-80%27-51%15-44%T淋巴细胞 CD4T淋巴细胞 CD8T淋巴细胞 淋巴细胞监测注重数量、比例、功能相结合淋巴细胞监测注重数量、比例、功能相结合 血液分析常规检测血液分析常规检测 依据白细胞、淋巴细胞比例依据白细胞、淋巴细胞比例及计数绑定机体免疫状况，及计数绑定机体免疫状况，无法精确判断。无法精确判断。T T淋巴细胞亚群淋巴细胞亚群比例检测比例检测 临床常用，但较片面临床常用，但较片面 T T淋巴细胞亚群数量淋巴细胞亚群数量 观察免疫细胞数值变化，评估观察免疫细胞数值变化，评估免疫状况，通常采用流式细胞免疫状况，通常采用流式细胞仪法，特别针对仪法，特别针对CD4CD4的检测，已的检测，已成为“金标准”。成为“金标准”。功能、数量、比功能、数量、比例结合例结合 更精确评估机体免更精确评估机体免疫状态疫状态 1 2 3 4 目前临床主要可以做以下项目的检测目前临床主要可以做以下项目的检测 淋巴细胞亚群(T+B+NK)的比例和计数 T细胞亚群(CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+比值）MHLA-DR（单核细胞HLA-DR)CD4CD25Treg（调节细胞）及Th17细胞（我们工作）目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目 项项 目目 百分含量百分含量（%淋巴淋巴细胞）细胞）Total B lymphocyte(CD19+)5-18%NK cell(CD3-/CD16+56+)7-40%Total T lymphocyte(CD3+)50-84%T helper/inducer cell(CD3+/CD4+)27-51%T supressor/cytotoxic cell(CD3+/CD8+)15-44%CD4/CD8 0.71-2.78(BD)(BD)健康中国人参考范围健康中国人参考范围 项项 目目 百分含量百分含量（%T淋巴细淋巴细胞）胞）绝对含量绝对含量（cells/L）Total T lymphocyte(CD3+)770-2041 Thelper/inducer cell(CD3+/CD4+/CD8-)34-70%414-1123 Tsupressor/cytotoxic cell(CD3+/CD4-/CD8+25-54%238-874 CD3+CD4+CD8+cell 0.5-4.0%6-56 CD4+CD4+、CD8+TCD8+T淋巴细胞的计数方法一（淋巴细胞的计数方法一（FCM)FCM)取取100l100l全血，加三种不同荧光素全血，加三种不同荧光素标记的鼠抗人标记的鼠抗人CD3CD3、CD4CD4、CD8McAbCD8McAb，阴性对照。阴性对照。加红细胞裂解液，溶血，离心，弃加红细胞裂解液，溶血，离心，弃上清。上清。用用PBSPBS洗洗1 1次，次，PBSPBS重悬细胞，上机检重悬细胞，上机检测。测。FCMFCM分析分析 电子计算机自动计算出阳电子计算机自动计算出阳性细胞百分率及总细胞计数。性细胞百分率及总细胞计数。简单、快速、相对精确简单、快速、相对精确 CD3+T细胞正常范围为：50-84%CD4+T细胞正常范围为：27-51%CD8+T细胞正常范围为：15-44%CD19+B细胞正常范围为：5-18%与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞百分比后乘以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度。CD4TCD4T淋巴细胞的计数方法二（推算）淋巴细胞的计数方法二（推算）不精确、繁琐不精确、繁琐 省钱省钱 举例如下举例如下 患者血常规中淋巴细胞计数为患者血常规中淋巴细胞计数为0.63 0.63 109/L,109/L,淋巴细胞比例测定结果淋巴细胞比例测定结果CD3 CD3 为为64.9%,CD464.9%,CD4为为32.5%,CD832.5%,CD8为为31.1%31.1%CD3CD3细胞计数为细胞计数为0.630.6310109 9/L/L64.9%0.41 64.9%0.41 10109 9 /L/L CD4CD4细胞计数为细胞计数为0.630.63109/L109/L32.5%0.20 32.5%0.20 10109 9 /L/L CD8CD8细胞计数为细胞计数为0.630.63109/L109/L31.1%0.19 31.1%0.19 10109 9 /L/L 推推 算算 单核细胞人类白细胞抗原单核细胞人类白细胞抗原DRDR（CD14/HLACD14/HLA-DRDR）CD14CD14为为LPSLPS复合物受体复合物受体,主要分布在单核细胞，主要分布在单核细胞，HLAHLA-DRDR为活为活化标志。化标志。CD14/HLACD14/HLA-DRDR可反映人体细胞免疫功能，可反映人体细胞免疫功能，30%30%提示免疫麻提示免疫麻痹。也有人认为痹。也有人认为HLAHLA-DRDR浓度如果连续两天浓度如果连续两天低于低于8000AB/C8000AB/C可可认为存在认为存在免疫麻痹免疫麻痹。广泛应用于临床。广泛应用于临床。T T淋巴细胞亚群研究淋巴细胞亚群研究 研究逐年增多研究逐年增多 淋巴细胞亚群变化的常见临床意义淋巴细胞亚群变化的常见临床意义 CD4CD4淋巴细胞减少：淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者用免疫抑制剂的患者 CD8CD8淋巴细胞增多：淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLESLE）、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等）、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等 CD4CD4CD8CD8比值异常：比值异常：比值降低：比值降低：一般被称为“免疫抑制”状态，常见于免疫缺陷病、恶性肿一般被称为“免疫抑制”状态，常见于免疫缺陷病、恶性肿瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等 比值增高：比值增高：表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8CD4/CD8较较移植前明显增加，则可能发生排异反应移植前明显增加，则可能发生排异反应 14 The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after diagnosis of shock.脓毒症休克期存在免疫麻痹脓毒症休克期存在免疫麻痹 存在免疫麻痹的存在免疫麻痹的SepticSeptic患者死亡率大大增加患者死亡率大大增加 100100名名septicseptic患者患者 28天死亡天死亡 无免疫麻痹无免疫麻痹 免疫麻痹免疫麻痹 脓毒症休克患者脓毒症休克患者T T淋巴细胞凋亡、存在免疫紊乱淋巴细胞凋亡、存在免疫紊乱 存活与死亡存活与死亡SepticSeptic中中T T淋巴细胞亚群的变化淋巴细胞亚群的变化 一项对院内感染的老年脓毒症患者的前瞻性对照研究一项对院内感染的老年脓毒症患者的前瞻性对照研究 Injury,Int.J.Care Injured(2007)38,13461357 严重多发伤患者免疫细胞的变化特点严重多发伤患者免疫细胞的变化特点 CD4/CD8降低降低 MHLA-DR降低降低 T细胞及单核细胞细胞及单核细胞凋亡增加凋亡增加 烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化特点烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化特点 烧伤患者白细胞低于正常组烧伤患者白细胞低于正常组 早期早期CD3CD3、CD4CD4、CD8CD8细胞计数细胞计数 均明显下降。均明显下降。HLAHLA-DRDR表达降低。表达降低。CD4/CD8CD4/CD8比值下降。比值下降。CD4T细胞亚群新分类：细胞亚群新分类：Th1、Th2、Treg、Th17 我们的研究我们的研究 抗炎细胞抗炎细胞TregTreg及其分泌的抗炎介质及其分泌的抗炎介质ILIL-1010；促炎细胞；促炎细胞Th17Th17及分泌的促炎介质及分泌的促炎介质ILIL-1717、ILIL-6 6在人体的炎性免疫稳态中在人体的炎性免疫稳态中发挥重要作用。发挥重要作用。22 中国呼吸与危重监护杂志中国呼吸与危重监护杂志,2010,09(04):416-418.结论一：脓毒症患者中结论一：脓毒症患者中TregTreg明显升高，明显升高，表明抗炎反应的增强表明抗炎反应的增强 23 结论二：结论二：在脓毒症患者中在脓毒症患者中Th17表达明显升高表达明显升高 吴铁军吴铁军,亢翠翠亢翠翠,中华急诊医学杂志中华急诊医学杂志,2012,21(04):378-380.脓脓毒毒症症组组 对对照照组组 脓毒症患者中脓毒症患者中Th17Th17表达明显升高，表达明显升高，提示促炎反应的增强。提示促炎反应的增强。24 重症脓毒症患者淋巴细胞增殖能力低下、凋亡重症脓毒症患者淋巴细胞增殖能力低下、凋亡 淋巴细胞淋巴细胞Ag-NoR在健康组中的表达在健康组中的表达 淋巴细胞淋巴细胞Ag-NoR在在Sepsis组中的表达组中的表达 吴铁军，张丽娜吴铁军，张丽娜 中国呼吸与危重监护杂志中国呼吸与危重监护杂志,2010,09(04):416-418.脓毒症组脓毒症组 对照组对照组 重症脓毒症患者存在免疫麻痹重症脓毒症患者存在免疫麻痹 中国急救医学杂志中国急救医学杂志,2011,31(9):836-838.CD14+单核细胞人类白细胞抗原单核细胞人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)表达情况表达情况 对对照照组组 脓脓毒毒症症组组