TOSOH-HLC-723G7型全自动糖化血红蛋白分析仪标准操作规程.doc

TOSOH HLC-723G7型全自动糖化血红蛋白分析仪 标准操作规程 1． 检验原理 基于高效液相色谱分析法原理，通过阳离子交换柱利用电位差将血红蛋白组分分离。利用3种不同浓度洗脱液使包括血红蛋白Ac1在内的多种血红蛋白进行梯度分离，分离成6个部分。经检测器检测分离后的各血红蛋白组分的吸光度，以百分率形式表示出各血红蛋白的组分结果与色谱图,传送打印。 2． 标本 2.1 标本的准备 2.1.1 标本的采集和抗凝 2.1.1.1 全血模式：抽取静脉血，用EDTA抗凝，当用同一个试管进行 HbA1c检测和葡萄糖等检测时，需用EDTA和NaF抗凝。全血置4℃可以存放一周。 2.1.1.2 稀释血模式：采集静脉血或末梢血，用去离子水或溶血素/清洗液进行稀释。稀释血需立刻检测。 2.2 标本的容器 2.2.1 HLC-723G7分析仪上既可使用原始样本管，也可以使用样品杯，在样本管架上的放置顺序是随机的。 2.2.2 最少样本量要求：原始样本管中全血为1ml；样品杯中全血为50ml ；样本杯中的稀释血为稀释后400ml（建议患者样本的稀释比例以1:150为佳）。 全血: 50 mL 稀释液: 400 mL 1ml全血 2.2.3 原始样本管和样品杯的放置 2.2.3.1原始管：分析仪可以从不同尺寸的原始采血管中通过盖帽穿刺的方式直接吸取样本。尺寸为φ15×75mm和φ15×100mm的试管可以直接放置在试管架上。尺寸为φ12～φ14mm的原始管在使用适配器后也可放置。在一个标准附件中附带有φ13的适配器。φ12和φ14mm的试管适配器编号请见“消耗品”。 2.2.3.2 样品杯：如果只有少量样品或红血球压积较低时，需要进行预稀释处理。将稀释后的样本颜色与稀释后的质控品或校准品的颜色作比照可以控制稀释处理的尺度。 3． 仪器与试剂 3.1 TOSOH HLC-723G7型全自动糖化血红蛋白分析仪 3.2 消耗品的种类、规格和储存条件 消耗品名称 规格 储存要求 TSKgel G7 HSi 1个/盒 4-15℃保存 G7洗脱缓冲液No.1(S) 800ml/包 4-25℃保存，开封后3月内用完 G7洗脱缓冲液No.2(S) 800ml/包 4-25℃保存，开封后3月内用完 G7洗脱缓冲液No.3(S) 800ml/包 4-25℃保存，开封后3月内用完 溶血素/清洗液（L） 2000ml/瓶 4-25℃保存，开封后3月内用完 HbA1c校准品（定值 1,2） 4ml×5/盒 2 -8℃保存，开封后1周内用完 HbA1c质控品（低值、高值） 0.5ml×4/盒 2 -8℃保存，开封后1周内用完 过滤器 5片/包 常温干燥 打印纸 40m×60mm 3.3层析柱的准备和更换 3.3.1 在下述情况下需要置换层析柱： 3.3.1.1 当层析柱计数达到1500个检测。 3.3.1.2 当超过初始压力2MPa，经更换过滤膜得不到改善时。 3.3.1.3 当色谱峰（特别是SA1c峰，阴影指示）变得平坦或分解2部分时。 3.3.2 步骤： 3.3.2.1 等待检测结束STAND-BY显现，或按STOP键使检测仪恢复到STAND-BY状态。 3.3.2.2 打开显示屏下的门，移开插销，打开层析柱炉。 3.3.2.3 取走旧层析柱。 3.3.2.4 确认主屏（第二屏）上SV1键已打开（O）。 3.3.2.5 将实验室用抹布放在层析柱导管的过滤膜侧（右边）。 3.3.2.6 按PUMP键启动泵。 3.3.2.7 去掉层析柱上防护塞，保存好以备后用（如长时间储存）。 3.3.2.8 先将新层析柱与泵侧（入口）相连，留意标签上的箭图表示的液流方向，指示缓冲液从右到左流入层析柱。当缓冲液从层析柱出口流出，按PUMP键使液流停止。 3.3.2.9 将层析柱出口与检测器一侧（左边）相连，按PUMP键启动泵。 3.3.2.10确认泵压力在6MPa或以上，并且柱连接部无渗漏。 3.3.2.11将层析柱放置于铝盒区，关闭层析柱炉盖，锁上插销。 3.3.2.12按PUMP键停止泵运行。 3.4 过滤器的准备和更换 3.4.1 在下述情况下需要置换过滤器： 3.4.1.1 当过滤器计数达到400个注入。 3.4.1.2 当使用该过滤器是，泵压力超过初始压力2MPa时。 3.4.2 步骤： 3.4.2.1 等待检测结束STAND-BY显现，或按STOP键使检测仪恢复到STAND-BY状态。 3.4.2.2 打开显示屏下的门 3.4.2.3 确认主屏（第二屏）上SV1键已打开（O） 3.4.2.4 取走过滤器出口（上部）导管。 3.4.2.5 逆时针方向旋转使过滤器固定装置松开，直接拔出方式来移动过滤器固定物 3.4.2.6 轻压固定器顶端取出旧过滤元件。小心的将新元件安放在过滤器表面。灰色面朝出口（朝上）。 3.4.2.7 用手拧紧过滤器固定装置上部，直到拧不动为止。 3.4.2.8 将实验室用抹布放在过滤器固定装置的出口并按PUMP键以驱除元件内大气泡。核实无气泡从出口侧出来，按PUMP键停止泵运行。 3.4.2.9 连接出口侧导管。 3.4.2.10再次按PUMP键启动洗脱液运送。确认泵压力在6MPa或以上，并且过滤室或导管连接部无渗漏，如发现渗漏，用力拧紧过滤器固定装置。 3.5 试剂的准备和更换 3.5.1 当试剂剩余不多时，请尽早更换缓冲液、溶血素/清洗液。剩余缓冲液的体积在主屏（第二屏幕）通过图例显示，在主屏（第一屏幕）上触压下行键即可进入第二主屏。. 3.5.2 步骤： 3.5.2.1 等待检测结束STAND-BY显现，或按STOP键使检测仪恢复到STAND-BY状态。 3.5.2.2 用新试剂替换缓冲液或溶血/清洗液。 3.5.2.3 使试剂进样管插入包装箱的底部。 3.5.2.4 当使用铝盒包装的缓冲液时，采用密封膜以保证瓶盖紧闭。 3.5.2.5 当使用瓶装试剂时，须拧紧瓶盖。但不可用paraffin膜或其它密封物来完全密封试剂瓶。完全密封试剂瓶将导致试剂吸取不畅。 3.5.2.6 在维护屏幕按REAGENT CHANGE键 3.5.2.7 相对应的试剂更换键（D/W）变亮。（如：当缓冲液No.1 和No.2已更换，键 #1、 #2变亮） 3.5.2.8 按CHANGE键。确认信息将出现。如果全好，按OK键。 3.5.2.9 分析仪流路中的试剂将自动被新试剂替换。 3.5.2.10当CHANGE…出现，操作既完成。确认试剂更换后图例回复到100%。 3.5.2.11再次开机时仪器自动进行缓冲液No.1 、No.2灌注，并使流路中的缓冲液得以更新，然后泵运行与检测开始。 3.5.3 如果长时间停机，需要进行手动试剂灌注，步骤如下： 3.5.3.1 等待检测结束STAND-BY显现，或按STOP键使检测仪恢复到STAND-BY状态。 3.5.3.2 按维护（MAINTE）屏上的试剂更换键（REAGENT CHANGE）。 3.5.3.3 将进行试剂灌注的键变亮 3.5.3.4 按灌注（PRIME）键，确认信息将出现。如果全好，按OK键。 3.5.3.5 分析仪流路中的试剂将自动被更新。 3.5.3.6 当PRIMING…出现，操作既完成。 3.6 打印纸的准备 3.6.1 拉开打印机盖（上盖）使其靠后。 3.6.2 往下推动纸支持杆至最前面，使剩余纸卷拢。 3.6.3 拉起纸卷，取出卷轴。 3.6.4 将卷轴插入到新纸卷中，注意方向。 3.6.5 将纸支持杆回复至最后面并将纸插入到打印机中。纸将自动传送。因为支持杆安装有2档，确认回复至最后面档。 3.6.6 核实纸是否有扭曲。如存在，推动纸支持杆至最前面，调整好纸张，使支持杆复原。 4． 校准 4.1 分析仪是用带有不同HbA1c值的LEVEL 1和LEVEL 2校准液来校准的。使用TOSOH HbA1c Calibrator Set（TOSOH HbA1c全套校准品）来校准。这套校准品是遵循日本糖尿病协会糖化血红蛋白标准程序基础上建立的二级标准品。不能使用其他的校准品。 4.2 确定在下列情况下进行校准。当需要改变化验条件和相关条件时，可以按照需要不断地进行校准。 4.2.1 每星期一次：如果每天检测100个以内的样品。 4.2.2 每天一次：如果在一台仪器上每天要检测100个以上的样品。 4.2.3 如果质控结果超出了范围 4.2.4 在替换层析柱后 4.2.5 在分析仪维护后 4.3 每瓶校准品加4ml去离子水后静置5-10分钟，轻晃使之溶解，充份混匀并贴上稀释日期的标签，4℃冰箱密封贮藏，7天之内有效，使用前不必再稀释。使用时，倒出>800ul的校准液，放入样本架。 4.4 校准操作 4.4.1按主屏幕中的MENU键进入第二屏，再按下PARAMER键进入参数设置界面①点击CALIB-1。②按右边数字界面输入Calibrator 1 的校准值。③左边CALIB-1值被修改。④同样方法输入CALIB-2的值。按EXIT键退出，进入主屏幕。 4.4.2 把Level1与Level2校准液放置在第一个样品架的1号和2号位置的样品杯中。 4.4.3 按主屏幕上的CALIB（校准）键，使之高亮。按下START键，校准即开始。 4.5 校准完成后，仪器自动进入样品分析程序。校准出现错误时，仪器将停止进入样品分析程序，并返回，需重新设置校准。 5． 操作步骤 5.1 开机 5.1.1　将电源开关按向[｜]接通电源后，打开了主电源。 5.1.2　检查软盘驱动器中是否没有插其他软盘，除了数据储存盘外，不要插入其他软盘。 5.1.3　按下显示屏右上方的POWER键，键上绿色的LED指示灯就会亮起。 5.1.4　仪器会自动依次启动检查采样单元，泵清洗，灌注缓冲洗脱液，并进行取样管路和稀释管路的首次冲洗。开始WARMING UP(预温) 5.1.5　仪器预热完成，将进入STAND-BY状态，可以进行样本分析了。 5.2 常规检测 5.2.1 在打开电源键后，第一个出现的屏幕是主屏幕（第一屏幕）。在显示屏最上方会显示出HbA1c/STD ANALYSIS（HbA1c/标准 分析）。 5.2.2 在分析进行时，主屏幕会一直保持显示信息。当前的操作状态会显示在显示屏的左上方。且出现下列状态指示。 WARMING UP（预温） STAND-BY（待机） ANALYSIS（分析） WASH（冲洗） BUFF PRIME（缓冲液灌注） PUMP CLEAN（清洗泵） 5.2.3 在预温状态下的标本检测 5.2.3.1在进行WARNING UP（升温）操作时，把样品放置在标本架上，金属终止标志放在最后一个样本架的末端，然后放入进样轨道，并按下START（开始）键。 5.2.3.2 等待WARNING UP（预温）结束。 5.2.3.3 系统会自动进入ANALYSIS（分析）状态,开始分析标本。 5.2.4 在待机状态下的标本检测 5.2.4.1 在完成预温，分析或冲洗操作后，分析仪会进入待机状态。在这种状态下，泵会停止运行，不再消耗试剂。 5.2.4.2 在此状态下可以把样品放置在标本架上，金属终止标志放在最后一个样本架的末端，然后放入进样轨道，按下START（开始）键，系统会自动进入ANALYSIS（分析）状态, 开始分析标本。 5.2.5 在分析状态下的标本检测 5.2.5.1 确定前批样本还没检测完毕，并将前批最后一个样本架末端的金属终止标志拔下。5.2.5.2 把增测的样品放置