S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法).doc

标准化操作规程 作业指导书 SOPREG013.01 赣州市人民医院输血科 第 6 页 共 6 页 文件名 交叉配血试验标准化操作规程（盐水法） 编制人 审核人 批准人 批准日期 修改日期 签 字 修改日期 签 字 复审日期 签 字 复审日期 签 字 落石出 交叉配血试验标准化操作规程（盐水法） 一、目的 为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。 二、方法 采用盐水介质试管法； 三、原理 交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。试验通常包括： 主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体； 次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体； 自身对照试验：受血者红细胞对受血者血清，是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。 四、适用范围 适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。 五、仪器设备 普通离心机；血型专用离心机； 六、试剂 1、试剂名称：0.9%氯化钠注射液 2、试剂生产厂家：湖南科伦制药有限公司； 3、批准文号：国药准字H2005006143020455； 4、包装规格：500ml/瓶； 5、贮藏条件；18-25℃避光保存。 6、有效期：自检定合格之日起二年； 七、检测样本要求 1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。 2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。 3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。 4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。 八、操作步骤 1、将受血者与献血者的红细胞血清分离； 2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液； 3、取洁净小试管（10mmx60mm）2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。 4、按标记主侧管加受血者血清1滴和供血者红细胞悬液1滴。次侧管加供血者血清1滴和受血者红细胞悬液1滴。混匀，以1000r/min离心1min，轻轻侧动试管，观察结果。冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。 5、结果判断： ABO同型配血，主侧和次侧管均无溶血及凝集表示无输血禁忌，可以输血。反之不能。 九、质量控制 1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评，且成绩合格； 2、每日做室内质量控制，且要求在控。 3、严格执行查对制度，判断结果后应仔细核对、记录，必要时应镜下观察红细胞形态。 4、交叉配血标本应在2～8℃保存留一周，以备复查。 十、生物参考区间 相合；不相合。 十一、注意事项与干扰因素 1、不能单独应用盐水介质交叉配血进行临床发血，必须结合其他介质方法交叉配血相合后方可发血。 2、交叉配血标本必须正确有标识，其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态； 3、交叉配血试验血样，要求是输血前3天内的血样（预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗体）。 4、标本血液离体后要求尽快送检，至检测完毕最长不能超过3d，每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃～8℃保存7天； 5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效； 6、患者使用的药物影响的处理：如果使用右旋糖酐、PVP等治疗，应注意将红细胞洗涤；如果受者使用肝素治疗，则应用硫酸鱼精蛋白对抗，使样本凝结； 7、交叉配血试验注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别，应结合镜下观察或离心去上清液后重悬观察。 8、抗体筛选试验阴性，而交叉配血结果阳性，提示有未检测明的同种抗体存在。 9、交叉配血结果不相合提示有未查明的同种抗体存在。 10、注意交叉配血试验过程中离心力、温度、红细胞浓度、抗原抗体的比例； 11、血清或血浆中如含有溶血性抗体，则相应红细胞被溶解而不凝集，交叉配血结果阳性，如排除标本中补体干扰因素的影响，可来活后重新试验。 12、注意在室温反应中或抗球蛋白试验中显示有自身抗体，应加做自身对照试验或直接抗人球蛋白试验加以鉴别。 十二、参考文献 1、胡丽华主编，临床输血检验，第1版。中国医药科技出版社，2004； 2、叶应妩，等主编，全国临床检验操作规程，第3版。东南大学出版社，2006，11； SOPREG013.01 第 6 页 共 6 页