ABO血型系统及定型正反不符dy探素.ppt

ABO血型系统及定型血型系统及定型 正定型（细胞定型）用已知抗体特异性的试剂血清检查红细胞的抗原 玻片法 试管法 微量板法 ABO常规定型常规定型 ABO常规定型常规定型 反定型（血清定型）用已知血型的试剂红细胞检查血清中的抗体 试管法 微量板法 正反定型结果相符时，才可以记录血型结果。ABO正反不符时正反不符时 受检红细胞是洗涤后悬浮于NS.吗?是用最敏感的试管法吗?受检者年龄60吗?病人的丙种球蛋白减低吗?病人血清与O型普检红细胞的反应与试剂红细胞一样吗?病人是白血病、肠道阻塞、胃癌、结肠或直肠癌吗？混合视野反应是输血后标本吗？技术上错误的常见来源技术上错误的常见来源 血液标本或试管鉴定不当 红细胞悬浮液过浓或过淡及纤维蛋白、小血凝块的干扰 人为的书写错误 标本混乱 忽略观察溶血现象 未加入试剂 未按照试剂生产商的说明操作 离心机校准不良 试剂受到污染 温度在离心过程中增高 造成正反定型不符的造成正反定型不符的4种变异情况种变异情况 减弱的或减少的抗原反应 未知的抗原反应 减弱的或缺少的抗体反应 未知的抗体反应 减弱或减少的抗原反应减弱或减少的抗原反应 A或B抗原的亚血型 A、B及AB型RBC与试剂抗血清作实验时，预期反应：4 细胞分型法减弱的凝集反应：健康献血员可能A/B亚型 抗AB 血清能检出某些不与抗A/抗B试剂发生反应的A/B亚型 减弱或减少的抗原反应减弱或减少的抗原反应 疾病状态下,抗原强度减弱 如:A型白血病/肿瘤患者在疾病活动期改变为A2或A3亚型,疾病缓解期复原 疾病状态下,血型物质过量,中和抗A/抗B试剂,造成假阴性/弱凝集:卵巢囊肿 胃癌 胰腺癌 肠道阻塞 对策:试管法 红细胞三洗 未知抗原反应未知抗原反应 获得性A 奇异变形杆菌感染的O/B:与抗A反应呈混合视野 未知抗原反应未知抗原反应 获得性B RBC反应象AB型,血清中有抗B抗体 细胞分型法:A抗原B抗原 获得性获得性B的成因的成因 Gerbal等假设细菌的脱乙酰基酶deactetylases可以将A的免疫结构域糖N乙酰氨基半乳糖胺转化为半乳糖胺。这个半乳糖胺与B的免疫多糖半乳糖非常的相似，可以与某些抗B发生反应。抗体致敏的红细胞抗体致敏的红细胞 抗体吸附于红细胞表面，可显示直抗阳性 自身免疫性溶血性贫血 抗高血压药物 输血反应 新生儿溶血病 放散技术移去抗体 减弱或缺少抗体反应减弱或缺少抗体反应 年龄70 丙球蛋白过低血症 丙球蛋白缺乏血症 未知的抗体反应未知的抗体反应 缗钱状凝集 冷自身抗体 未知的ABO同种抗体 未知的其它同种抗体 ABO抗体的区别抗体的区别 特异性 血 清 其它来源 血型 频率 性 质 抗B A 全部 常属IgM效价 8-512 初乳 唾液泪液(IgA)抗AB O、Oh 全部 常属IgG,与Ax,A3凝集 抗A在蜗牛鱼卵中也可发现 抗A B 全部 常属IgM效价 32-2048 抗A1 A2B A2 Ax 22-35%1-8%大多数 少数报告有输血反应 用A2细胞吸收过的抗A血清;双花扁豆(Doliekos biflorus)抗H Oh 非Oh 全部 部分 被H物质抑制 欧洲荆豆(Ulex europaeus)天然抗体和免疫抗体天然抗体和免疫抗体 天然抗体 未经可察觉的抗原刺激而产生的抗体 O型血清中多为IgG抗A和抗B A/B型血清中大多为IgM抗体 免疫抗体 妊娠/输血等 缗钱状凝集缗钱状凝集 球蛋白浓度增高:多发性骨髓瘤/原发性巨球蛋白血症 纤维蛋白原增高 血管扩张剂 霍奇金淋巴瘤 新生儿脐带血中的华尔道胶 冷自身抗体冷自身抗体 抗I是反定型中最常见的自身抗体 有时也见抗i和抗Pr 抗I通常凝集所有供者RBC包括患者自身及反定型所用RBC 抗I引起的凝集比抗A抗B所引起的凝集弱 脐带血所带的I抗原量少通常不被凝集 抗抗HI 与冷凝集有关的最常见的特异性抗体是抗I 有些冷抗体与I和H抗原强的细胞如（O和A2细胞）反应最强，称之为抗HI联合抗体。冷自身抗体之鉴别冷自身抗体之鉴别 抗I 抗i 抗H 抗HI 抗Pr 成OI +-+成AI +-+脐Oi -+-+酶OI +-+抗HI：O成A2成B/A成脐O脐AB 未知的同种抗体未知的同种抗体 ABO同种抗体:A2/A2B中的抗A1 A1/A1B中的抗H 未知的同种抗体:筛选细胞及反定型中的O细胞 一组谱细胞鉴定抗体特异性 ABO亚型亚型 A抗原中主要为A1和A2 其它A亚型：A3、Ax、Aend、Am、Ay、和Ael B亚型一般比A亚型更少：B3、Bx、Bm和Bel等 判断判断ABO亚型亚型:1 红细胞与抗A抗A1抗B及抗AB的凝集程度 2 红细胞上H物质活性的强弱 3 血清中是否存在抗A1 4 分泌型人的唾液中A、B和H物质 A1和和A2的鉴别的鉴别 项目 A1细胞 A2细胞 与抗A反应 4 2 与抗A1反应 成人抗原位点 100万 25万 脐血抗原位点 31万 25万 乙酰D半乳糖胺转移酶 PH 6时最多 PH 7时最多 各种弱各种弱A亚型的鉴别程序亚型的鉴别程序 红细胞 弱凝集 混合外观(Mf）A60 A3 与抗A A3 Ax 10 红细胞呈十分弱的mf凝集 Aend 及/或抗 Aend 只与抗AB呈弱凝集 Ax A1B反应 不凝集 容易吸附放散抗A Am 能吸附 分泌型唾液中有一定量的A物质 及放散 不容易吸附放散抗A Ay 抗A 分泌型唾液含少量的A物质 Am Ay 吸附放散抗A Ael Ael 分泌型唾液只含H物质无A物质 A2 与人源性抗A试剂的反应强度为4,与抗H+/2+可能有不规则抗A1存在 (sometimes)1-8%A2和22-35%的A2B存在抗 A1 血型物质 A H 举例 抗A 抗B Ac Bc Oc 4+4+-A2 A1和A2决定簇的区别是仅存在量的差异 还是抗原决定簇结构不同？用A2细胞重复吸收来源于B型个体的抗A血清可以移去所有抗体，表明二者之间仅是量的差别。A2和A2B个体常常产生抗A1，说明A2细胞上缺乏A1细胞上的一种决定簇。血型前体物质：血型前体物质：Type1 Gal13GlcNAc 1R（血清）Type2 Gal14GlcNAc 1R（红细胞）Type3 Gal13GalNAc1R（红细胞）Type4 Gal13GalNAc 1R（红细胞）Type5 Gal13Gal 1R（人工合成）Type6 Gal14Glc 1R A1和和A2同样存在质的区别同样存在质的区别 A1细胞出现重复的3型A抗原结构，但A2细胞却没有。抗A1是3型或4型A特异性的，或者抗A1可以优先与3型或4型A反应。只有A1转移酶能够转化3型H加一个N乙酰氨基半乳糖基成为3型A 因此A2细胞上可以检测到3型H而不是3型A抗原。双花扁豆植物血凝素检测N乙酰氨基半乳糖胺，当过量的浓度下，它可以凝集A2细胞，因此将它用作A亚型分型试剂更多是依赖A1和A2表现型数量上的差异。A3 最早由Friedenreich在1936年描述 与抗A和抗AB共同孵育时：“混合视野外观”（mixed field agglutination）。即：小的凝集块周围是大量未凝集的细胞。与抗A反应强度低于A2 与抗AB反应呈混合视野,但并不增强 偶有抗A1(occasionally)血型物质 A H A3不像是A2和O细胞的嵌合体 Aend（Afinn，Abantu）Aend最早由Weiner 等于1959年描述 类似于A3细胞：它们与一些抗A和抗AB表现很弱的混合视野外观 Aend分泌型的唾液中只有H物质，但是无A物质 抗A1出现在部分Aend个体的血清中 10细胞凝集（Mf）Am Am细胞不能被抗A和抗AB凝集，或者仅能发生很弱的凝集。Am细胞可以吸附放散抗A。Am分泌型的唾液中包含正常含量的A和H物质，Am血清中通常无抗A1。Am作为ABO位点上一个稀有的等位基因遗传 Am在法国献血者的频率是150 000中有1例。（A型人中占0.0015%），中国台湾的数据是400 000万人中1例。Am 抗原性较弱 抗A:-/w+抗H 4+(甚至会超过Oc)无抗A1产生,与抗AB反应不增强 血型物质:A H Ax Ax表现型最初由Fischer和Hahn于1935年报道，它的主要血清学特点是：红细胞与多数来源于B型血清的抗A不发生反应，但是可以被大多数来源于O型个体的抗AB凝集，没有混合视野表现。血清中含有抗A1，后者有时候可以凝集A1和A2细胞。除了H物质，Ax分泌型个体唾液中可以捡出痕量的A物质 Ax 抗A:-/w+抗H:4+(与Oc的抗H差不多)常有抗A1(Frequently),比A2 A3都高 与抗A+B的反应比抗A明显增强 血型物质 H Ax Ax表现型具有很高的遗传异质性：许多家系资料表明Ax以ABO位点上一种稀有的等位基因的方式遗传 在一些家庭中遗传背景不清楚 在两项独立的研究中，法国Ax的频率为1/77000(A型人中的0.003%)和1/44000 Aint 与抗A1反应较弱 2+与抗A及抗H反应较强 4+/3+仅有A1和Aint的细胞与抗A1发生反应 Aint Landsteiner和Levine：有些A型个体的红细胞既不能定义为A1也不能定义为A2 Aint在黑人中较白人更为常见，Aint是作为ABO位点上的一个等位基因遗传的。它的H抗原强度象A2一样强，甚至更强。Ael 在通常的条件下，Ael细胞与抗A和抗AB不发生凝集，虽然它们可以结合这些抗体，结合的抗体可以通过吸收放散技术检测到 Ael分泌型唾液中无A物质，仅有H物质，血清中常含有抗A1，也可以含有能够凝集A2细胞的抗体 Ael 在Ael血清和红细胞膜上不能检出A转移酶。在法国150000例献血者中，没有检测到Ael表现型，在中国台湾400000人中捡出5例Ael个体 Ael以ABO位点上的一种稀有的等位基因遗传的。Aw Olsson等 对其它弱A亚型的ABO基因的外显子、剪切部位和启动子进行序列测定 那些表现型不太容易被划分到任何现存的分类中。这些异常的基因被称作Aw（15）。Subgroups of A Pheno-type Red cells tested With anti-sera Serum tested with Known red cells Salivaof secretors Anti-A-B-AB-A1-H A1 A2 B O A1 V _ V V _ _ _ V _ A and H Aint+_ V+_ _ V _ A and H A2+_ V _+Some-times.+_ V _ A and H A3 +mf _+mf _+Occa-sionally.+_ V _ A and H Am-/w+_-/w+_ V _ _ V _ A and H Ax-/W+_+/+_ V Fre-quently +_ V _ H B亚型亚型 弱的B变异型是很少的。可能是由于在许多群体中B基因的频率要相对低得多。弱B亚型较难以分类。Salmon做出结论：B亚型最好的分类应参照A变异型：B3、Bx、Bm和Bel，另外加上那些不符合其它4种类型的Bw。B3 1972年 Wiener和Cioffi首先报道一例ABH非分泌型B3。它被作为最稀少的一种B亚型 这种表现型以与抗B和抗AB呈现混合视野反应为特点 血清中缺乏抗B 唾液中含有正常含量的B抗原 B3通常是由于ABO位点上的稀有等位基因所致。Bx 一种异质性的血型 典型的Bx红细胞与抗B和抗AB呈弱凝集。血清中含有弱的抗B Bx分泌型唾液中含有一些B物质，后者常常仅能通过Bx细胞与抗B的凝集抑制试验才能检测到 Bx是ABO位点上的一种稀有的等位基因。Bm Bm细胞不能被抗B或抗AB凝集 B抗原仅能通过敏感的技术比如吸收放散抗B才能检测到。Bm分泌型唾液中B物质的含量接近正常B Bm个体的血清中不含有抗B。通常Bm是作为ABO位点上一个变异的基因来遗传的，但是有几个例外报道。Bel Bel红细胞与抗B和AB不发生凝集反应，但是它们的确可以结合抗B，抗体可以