动物细胞融合与单克隆抗体(教师).doc

常宁二中高三生物组学案 2012-2-23 动物细胞融合与单克隆抗体 【考点要求：】 1、比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同 2、理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。 3、理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用 【考点解析】 1、动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同 项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电刺激、振动、聚乙二醇（PEG）诱导 克服远源杂交不亲和，获得杂种植株 动物细胞融合 细胞膜的流动性 用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合 除应用植物细胞杂交手段外，还有用灭活病毒诱导 制备单克隆抗体 【例1】动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 ①诱导融合的方法完全相同 ②所用的技术手段不相同 ③所采用的原理完全相同 ④都能形成杂种细胞 A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 2、单克隆抗体的制备 （1）单克隆抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群，其产生的抗体就是单克隆抗体。 【例2】下列哪—项属于克隆 A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞 D．将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞群体 制备过程： 第一步：将　　　 　注射到小鼠体内进行免疫； 第二步：从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的　　　　　　　细胞，与小鼠的　 　　　　　　　细胞在　　　　　　　，或聚乙二醇的诱导下融合； 第三步：在特定的　　　　　培养基中，筛选出　　　　　细胞； 第四步：克隆化培养杂交瘤细胞，进行抗体检测，从中挑选出　　　　　　　　的细胞群，继续培养； 第五步：将该杂交瘤细胞在 条件下大规模培养或注射到小鼠　 　　　内增殖，然后再从培养液或小鼠腹水中提取，分离纯化单克隆抗体； （2）产生抗体的细胞是：浆细胞 产生单克隆抗体的细胞是：杂交瘤细胞 （3）杂交瘤细胞的特点：既能无限增殖，又能分泌特异性抗体 （4）第一次筛选是为了获得：杂交瘤细胞 第二次筛选时为了获得：既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞 （5）单克隆抗体的优点是：特异性强、灵敏度高、可大量制备 （6）①单克隆抗体可以作为诊断试剂，准确识别各种抗原物质，与抗原的特异性结合具有准确、高效、简易、快速的特点。②单克隆抗体还可以用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症。单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。 【例3】利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 【高考回顾】 1、（01天津、山西卷）科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 A．经过免疫的B淋巴细胞 B．不经过免疫的T淋巴细胞 C．经过免疫的T淋巴细胞 D．不经过免疫的B淋巴细胞 2、（04全国一）用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是 A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D．筛选杂交积累细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 3、（05高考）关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是 A．可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C．可以利用基因工程技术生产 D．可以在生物体内生产，不能体外生产 4、（06广东卷）单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是 A特异性强、灵敏度高 B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌 5、（08全国卷一）5．下列关于细胞工程的叙述，错误的是 A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C．小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制务单克隆抗体 D．某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 6、（11江苏）关于现代生物技术应用的叙述，错误的是 A．蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C．植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育 【反馈练习】 1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ） A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 2、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞　 ②小鼠骨髓瘤细胞　 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③ 3、试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果,下面对其生物学原理及技术的叙述正确的是 ( ) A．都属于无性生殖,能保持母本性状 B．都是细胞工程的技术范围 C．都充分体现了体细胞的全能性 D．都不会发生基因重组和变异 4、如图表示用于预防和治疗禽流感的单克隆抗体生产过程,请回答下列问题： (1)若A细胞是小鼠的骨髓瘤细胞,则B细胞取自 体内的B淋巴细胞,促进d过程的 诱导剂是 。 (2)假设仅考虑两个细胞的融合,则可形成 种类型的C细胞,因此需用 ______________________筛选出具有 特点的D细胞用于 培养。D细胞的名称是 。 (3)在细胞培养所用的培养基中除需要加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素外,通常还需加入 等一些天然成分。 (4)目前注射禽流感疫苗是预防禽流感的一种措施。决定禽流感病毒在人体细胞中增殖变化的物质是 参考答案：(1)感染禽流感病毒的动物或人 聚乙二醇或灭活的病毒 (2)3 选择培养基 既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞 (3)血清、血浆 (4)禽流感病毒的RNA 【创新应用】 右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答： 　（1）该方案能达到预期效果吗？　　　　　。原因是　　　_________________________________________________　。 　（2）图中②为　　____　过程，常用　　____　　作为诱导剂。该细胞继承了　___________　　，因此不仅能分泌　　　______________，还有　　　______　本领。 （3）该方案的目的是　_____________　。 参考答案：（1）不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞 （2）细胞融合 灭活病毒（或PEG） 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 在体外培养条件下大量增殖（3）制备单克隆抗体 4