化脓及创伤感染标本的细菌学检验操作规程SOP微-002.doc

单位及实验室名称 项 目 汉源县人民医院检验科 化脓及创伤感染标本的细菌学检验 编号：LAB/SOP/HY/微-002 日期：2010年5月3日 版本：第一版，第0次修订 第1页，共3页 一、【标本采集】 1.开放性脓肿和脓液分泌物：先以无菌盐水冲洗溃疡面，用无菌棉拭子采取脓液及病灶深部的分泌物，而瘘管则以无菌方法采取组织碎片，放入无菌试管中送检。 2.大面积烧伤的创面分泌物：用无菌棉拭子取多部位创面的脓液或分泌物，置灭菌试管内送检。可将蘸有脓液的最内层敷料放入无菌平皿内送检。 3.封闭性脓肿：先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。然后以无菌注射器抽取脓汁及分泌物；也可于切开排脓时，以无菌棉拭子采取。 4.做厌氧菌培养时，一定以无菌注射器抽取脓汁分泌物，厌氧状态下送检。 二、【检验方法】 1.直接涂片检查 （1）一般细菌涂片检查：取脓汁或分泌物直接涂片、染色、镜检，可初步报告：找到革兰氏ⅹ菌，形似ⅹ菌。如发现具有芽孢或荚膜的细菌，报告时应注明其大小与位置，以及疑是ⅹ菌。如镜检时未发现细菌，可初步报告为“直接涂片，未找到细菌”。 （2）对疑有结核杆菌感染的标本，还应做抗酸染色。 2.细菌培养 （1）一般细菌培养：取脓汁棉拭子或脓汁接种于血平板上，中国兰、巧克力平板划线分离，分别置需氧或CO2环境35℃孵育培养18-24h，观察结果。如有细菌生长，分别涂片行革兰氏染色镜检。并作生化反应或血清学鉴定，即可报告：“培养出ⅹ菌”，如观察48h后无菌生长，则报告“培养48h后，无细菌生长。” （2）厌氧菌培养：可将标本接种于牛心、牛脑浸出液或布氏杆菌肉汤培养基中，置厌氧环境下培养。 （3）结核杆菌培养：一般将脓汁约0.1ml直接接种到结核杆菌培养基3-4w培养。 三、【检验程序】 脓汁、创伤分泌物 ↓ ————————————————————————————— ↓ ↓ ↓ 涂片、革兰染色及抗酸染色镜检 需氧培养 厌氧培养 ↓ ↓ ↓ 初步报告 血平板（巧克力平板）及伊红美兰或麦康凯平板 厌氧血平板及硫乙醇酸钠培养基或疱肉增菌培养基 ∣ ↓←—————————— 观察菌落 ↓ ↓———————————————————————————↓ 涂片、染色镜检 纯培养 ↓ 生化反应及血清学鉴定 ↓ 药物敏感性试验 ↓ 报告结果 作者：肖德慧 时间：2010-5-3 3