大卵径鱼卵的鱼类早期胚胎显微观察的简单易行的新方法(附虹鳟原肠胚照片).doc

       前两天想看看虹鳟鱼卵内部的情况，但由于虹鳟鱼卵属于沉性大卵径卵，卵膜厚，肉眼无法直接观察其早期胚胎发育过程。据有关论文介绍，目前观察虹鳟鱼卵内胚胎发育的主流方法是用甲醛固定液固定后机械取出卵膜后显微镜下观察，或者是用胰蛋白酶处理卵膜，然后进行观察。        但是我除了有一个光学显微镜外几乎没有任何的实验材料。试了好多次都毫无结果。这主要是因为鱼卵是球体， 在显微镜下很难对焦，所以看不到清晰画面。今天我以外的发现把鱼卵夹在两个载玻片之间，卵的某些部分就成了平面了，这样在显微镜下就可以观察了。把要观察的部分压成平面，为了避免把鱼卵压坏，在两个载玻片之间贴上两个木棒，然后把鱼卵放在里面用皮筋捆住两个载玻片。然后就可以随便的去观察被压成平面的部分。此种方法不一定对早期胚胎发育的所有过程都好用，目前我试过的是观察原肠胚很方便。        另外发现在显微镜目镜上拍摄照片，将相机的测光方式调为点测光拍出的效果最好。        下面附有虹鳟76度日时原肠中期的图片，至于到底是不是原肠中期还有待于以后继续考证。        下面所附图片主要是拍的是原肠胚的边缘，边缘细胞大，可能是因为细胞接触抑制所导致中间细胞小。        此外还拍摄了一段原肠胚的录像，已上传至新浪微盘，链接如下        方法如下图              以下为 所拍到的原肠胚照片（局部）