土壤中分解尿素的细菌的分离与激素1、尿素[CO(NH2)2]——重要的农业氮肥。只能被土壤中细菌分解为NH3才能被植物吸收利用。2、CO(NH2)2+H2O细菌脲酶CO2+2NH3一、研究思路（一）筛选菌株1、实例----耐高温DNA聚合酶的寻找美国科学家布鲁克（1966年）--在美国黄石公园的一个热泉中发现耐热细菌。这说明寻找菌株要到期相应的中寻找。2、实验室中微生物的筛选原理人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等，采用选择培养分离的方法，或抑制使大多数微生物不能生长，或造成有利于该菌生长的环境，经过一定时间培养后使该菌在群落中的数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯培养分离。3、筛选菌株的培养基KH2PO41.4gNaHPO42.1gMgSO4H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。4、选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。（二）、统计菌落数目：1、活体计数法----稀释涂布平板法（1）操作方法：稀释涂布平板→统计菌落数。（2）原理：1个菌落→1个活菌。（3）统计原则①、选30∼300个菌落的平板统计。②、每个稀释度取3个平板取其平均值。（4）统计结果：统计的菌落数往往比活菌的实际数目，因此统计结果一般用表示。每克样品中的菌株数=。C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；V:所用稀释液的体积；M:稀释倍数。2、显微镜直接计数（三）设置对照1、设置对照的目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。2、对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。实验组：对照组：设置对照----同等条件下，培养空白培养基。四、实验设计（一）土壤取样1、土壤是天然培养基----其微生物数量、种类。2、土壤取样：（1）取样的位置：土壤中70∼90％是细菌。在富含有机质的土壤层的3∼8cm处中分布着绝大多数的细菌。1思考：1、该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？碳源：葡萄糖、尿素氮源：2、此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？能。只有产生脲酶的细菌才能利用作为氮源而生存。思考：1、1个菌落1个活菌。2、统计的菌落数实际活的细菌数。3、用稀释涂布平板法一定要重复实验，一般至少要涂布3个平板。4、重复实验结果中小于30...
