大肠埃希菌.doc

大肠埃希菌 形态与染色特性： 1、周身鞭毛 2、能运动 3、无芽孢，不产生荚膜。 4、菌体两端钝圆、中等大小，杆状(有时呈卵圆形)、1-3umx0.6um 5、革兰氏阴性 培养特性： 1)需氧及兼性厌氧菌 2)对营养的要求不高，最适生长温度为37℃，最适pH为7.2—7.4。 3)在普通琼脂平板上培养24小时，可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小的菌落．其菌落与沙门氏菌比较相似。 4)在肉汤培养基中生长18～24小时变为均匀浑浊，而后底部出现粘性沉淀物，并伴有臭味 生化反应： 1.对糖的代谢能力：　　 大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。 2.IMViC试验为“+、+、-、-”。即为典型大肠杆菌。 培养基 菌落形态 曙红亚甲蓝琼脂 紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色，菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，常有金属光泽 麦康凯琼脂 鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润 生化试验： ①靛基质试验 为阳性，玫瑰红色吲哚，培养基为蛋白胨水培养基。 （液面呈玫瑰红色为阳性，呈试剂本色为阴性。） 原理：大肠埃希菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。 ②甲基红试验 为阳性，呈鲜红色或橘红色，培养基为磷酸盐葡萄糖胨水培养基。（呈鲜红色或橘红色为阳性，呈黄色为阴性） 原理：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解为大量混合酸，使培养基pH下降至4.5以下，加入甲基红指示剂可呈红色。 ③乙酰甲基甲醇生成试验（V-P） 为阴性（无红色），要加入α-萘酚乙醇试液1ml，混匀，再加40%氢氧化钾试液0.4ml。 培养基为磷酸盐葡萄糖胨水培养基。（在4h（通常在30min时）内出现红色判为阳性，无红色判为阴性） 原理：葡萄糖→丙酮酸（脱羧）→乙酰甲基甲醇→2，3—丁烯二醇，在有碱存在时氧化成二乙酰，后者和胨中的胍基化合物起作用产生粉红色的化合物。 ④枸橼酸盐利用实验 为阴性，培养基本来为绿色，不变色为阴性，培养基为枸橼酸盐培养基斜面。（培养基变蓝色，为阳性；不变，为阴性） 原理：细菌分解柠檬酸盐生成碳酸盐，进而氨盐分解，产生氨，培养基变碱，显深蓝色。