浅谈草鱼出血病的病因及防治.doc

浅谈草鱼出血病的病因及防治 潘智 摘要：草鱼出血病严重困扰草鱼养殖业的发展，根据对该病的研究进展，调查了草鱼出血病的流行病学和发病环境，总结了草鱼出血病的危害及防治方法。 关键词：草鱼；出血病；病因；防治 草鱼出血病( Haemorrhagic Disease of Grass Carp)是由草鱼呼肠孤病毒（简称GCHV,国际上也简称GCRV)引起的流行性广、死亡率高、危害性大的病毒性水生动物疾病,其结果往往造成大批量草鱼鱼种或成鱼死亡。 一、 病因及症状 1、 病原 草鱼出血病是由草鱼出血病病毒引起的。草鱼出血病病毒隶属呼肠孤病毒科，水生呼肠孤病毒属ⅱ。因该病毒有毒物质等代谢产生内毒素、溶血素，致使鱼患败血症、毒血症造成出血。 2、 症状 病鱼外部表现一般暗黑而微带红色，小的鱼种，在阳光或灯光透视下，可见皮下充血现象。部分病鱼的口腔、下颌、头顶部或眼眶周围充血，甚至眼球突出，鳃盖、鳍条基部也出现充血。将病鱼的皮肤剥除，肌肉显示点状或块状充血，病情严重时全身肌肉呈鲜红色，鳃部有红色斑块或失血变白。肠道充血，全肠或局部因充血而呈鲜红色，肠系膜有红点，但肠道平滑肌一般仍完好，具韧性，无腐烂或水肿等情况。 根据病鱼所表现的症状及病理变化，该病可分为3 种类型：①红肌肉型。病鱼外表无明显的出血症状或仅表现轻微出血，但肌肉充血明显，往往全身肌肉均呈红色，同时鳃瓣严重失血出现“ 白鳃”，在较小的草鱼种（ 7 厘米～10 厘米） 中比较常见。②红鳍红鳃盖型。病鱼的鳃盖、头顶、口腔、眼眶、鳍条基部充血或出现红点，腹下、鳞片下点状充血，但肌肉充血不明显或局部点状充血，在较大的草鱼种（ 13 厘米以上） 中多出现。③肠炎型。病鱼体表及肌肉的充血现象均不大明显，但肠道严重充血，肠道全部或局部呈鲜红色，肠系膜及周围脂肪、鳔壁有时有点状充血，在各类草鱼中都可遇见。以上3 种类型的症状，不能截然分开，有时可混合出现。 二、草鱼出血病类型 草鱼出血病是常见的病毒性水生动物疾病，根据病鱼所表现的症状及病理变化，大致可以分为“红肌肉型”、“红鳃红鳃盖型”、“肠炎型”三种类型。红肌肉型：病鱼外表无明显的出血现象或仅表现轻微出血，但肌肉明显充血，有的表现为全身肌肉充血，有的表现为斑点状充血。此此同时，鳃瓣则往往严重贫血，出现“白鳃”症状。这种类型一般在较小的草鱼种，也就是在规格7~10厘米的草鱼种中比较常见。红鳃红鳃盖型：病鱼的鳃盖、鳍条、头顶、口腔、眼腔等表现明显充血，有时鳞片下也有充血现象，但肌肉充血不明显或仅局部表现点状充血，这种类型一般在较大的草鱼种。也就是在规格13厘米以上的草鱼种比较常见。肠炎型：其特点是体表和肌肉充血现象不太明显，但肠道严重充血，肠道全部或部分呈鲜红色，肠系膜、脂肪、鳔壁有时有点状充血。这种症状在大小草鱼种中都可遇见。以上三种类型的症状，不能截然分开，有时可两种类型，甚至三种类型都表现出来，呈混杂出现。草鱼出血病与其他爆发性出血病病原不同，草鱼出血病病原是病毒，爆发出血病病原是嗜水气单细胞菌、河弧菌、鲁克耶尔森氏菌等，暴发性出血病是细菌性疾病，细菌性出血病与病毒性区别主要在于前者肠壁弹性较差，无光泽。肠腔内有大量黄色粘液，肠腔内没有食物，草鱼出血病重点以防治为主，具体用法用量应视不同品种、不同体质、不同水质酌情掌握，并注意安全用药和休药期。 三、 草鱼出血症的防治方法 1、 疫苗防治 我国鱼用疫苗的研究虽然起步较晚，但对草鱼出血病的免疫预防分别从灭活疫苗、减毒疫苗、基因疫苗等方面进行了研究，并取得了突破性进展。 灭活疫苗又称死疫苗，系采用加热、使用灭活剂等理化方法在确保免疫原性不受影响的情况下将活病原微生物杀死而制成。从1973年起，中国科学院水生生物研究所、中国水产科学研究院长江水产研究所等就开始研制草鱼出血病细胞培养灭活疫苗，并且取得了明显的成效[11,12]。减毒疫苗又称弱毒疫苗或活疫苗，是应用减毒或无毒的活病原微生物制成。许淑英等[13]研究结果表明，用减毒疫苗免疫草鱼后，草鱼的成活率和免疫保护率均达100％。基因疫苗是将某一病原的主要免疫原性蛋白的密码基因DNA转移、重组后获得的。章怀云等[14] 纠采用外源DNA处理方法，将鲤鱼精液、肝脏的总D；对草鱼出血症疫苗的优缺点比较，组织灭活疫苗优点是；3.2中草药防治；中草药具有天然、高效、毒副作用小、抗药性不显著、；了抗生素及其替代品不能解决的药物残留问题，而且能；中草药虽然在防治鱼病方面有一定的功效，但在实际应；3.3干扰素防治；干扰素(Interferon，IFN)是一种重要；通过PCR及Southe 纠采用外源DNA处理方法，将鲤鱼精液、肝脏的总DNA以精子载体处理草鱼受精卵，获得了数批经外源DNA处理的草鱼群体。研究结果表明。经鲤鱼总DNA处理的当年草鱼对草鱼出血病病毒的抗性显著增强。XU等[15]使用呼肠孤病毒的VP7基因构建质粒转化大肠杆菌，制得重组蛋白，变性后按 0.5、1.0、2.0 mg/尾的注射剂量分为3个免疫组，以等体积的氢氧化铝为佐剂进行注射。经SDS-PAGE电泳分析，发现了相对分子质量为34000的蛋白表达带；Western Blot检测结果显示表达的蛋白具有很好的抗原性；间接凝集试验结果表明，3个免疫组均有抗体产生；攻毒试验结果表明，0.5、1.0、2.0 mg/尾重组蛋白剂量组的保护率分别为 90%、85%、90%，对照组为0，表明所构建的疫苗具有较好的免疫作用。 对草鱼出血症疫苗的优缺点比较，组织灭活疫苗优点是研制周期短，使用安全，易于保存，缺点是使用剂量大，接种后不能再体内产生长久免疫，需要加入适当的佐剂以增强免疫效果。减毒活疫苗的优点是能在体内繁殖，不必添加佐剂，免疫周期长，不影响肉类品质，且有些弱毒苗可以刺激机体细胞产生干扰素。缺点是贮存运输不方便，保存时间短，成本和生产技术要求高。亚单位疫苗副作用少，不易致癌及回复突变，疫苗以直接被合成或通过重组DNA技术生产，缺点是制备过程复杂，成本高，要求技术含量高。 3.干扰素的免疫调节功能 干扰素(Interferon,IFN)是一种重要的细胞功能调节因子,具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等功能,是现代生物学、医学等研究中一个十分活跃的领域。但目前对IFN的研究主要见诸于人类和高等脊椎动物,就低等动物的鱼类研究尚处起步阶段。邵健忠等(CARPINI行研究,结果表明N-著的激活作用,它能提高草鱼巨噬细胞内O2、H2O2和酸性磷酸酶(ACP)的活性与含量,促进草鱼巨噬细胞的吞噬和抗病毒的能力。贾方钧[等对人工诱导的鲫鱼干扰素防治草鱼出血病的效果进行了研究,结果表明,人工诱导的鲫鱼干扰素确能有效防治草鱼出血病。腹腔注射和药浴浸泡两种途径均有一定效果。苏建明等采用显微注射法将人α2干扰素抗病基因转移到草鱼受精卵中,获得转基因群体,通过PCR及Southern杂交对转基因草鱼进行分子水平的检测,以进一步验证外源人α2干扰素是否整合入草鱼基因组,结果表明,外源人α2干扰素抗病基因已整合入草鱼基因组中。采用腹腔注射法,对转基因鱼进行草鱼出血病病毒接种攻毒试验,结果显示,转基因草鱼比对照组的抗病毒能力有显著提高。